소난자 체외성숙에 있어 소 태아혈청 (fetal bovine serum: FBS) 첨가시 높은 성숙율을 보이며 핵 이식 후 배 발달율에 있어서도 높다. 하지만 배양액 내에 포함된 소 태아혈청은 수정란 이식 후 태아의 발육 중 및 태어난 직후에 발생되는 송아지에서 나타나는 몇몇 비정상적인 현상들의 원인인 것으로 보고되고 있다 (Walker 등, 1998). 본 실험은 성숙배양시 소 태아혈청과 이의 대체물질로서 BSA 또는 PVA 와 같은 macromolecules의 첨가가 소 난자의 성숙과 핵 이식 후 배 발달에 미치는 효과를 알아보기 위하여 실시하였다. (중략)
전기영동에 의하여 진도개와 삽사리의 혈청 단백질을 분석하였다. 이들의 혈청 단백질 전기영동상은 5개의 분획으로 나눌 수 있었다. 진도개의 총 혈청단백질은 8.40$\pm$1.63(g/dl)이었으며 albumin과 globulin의 비(A/G)는 0.81 $\pm$ 0.25이었다. 삽사리의 총 혈청단백질은 8.23 $\pm$2.20(g/dl)이었고 A/G는 0.78 $\pm$ 0.23이었다. 연령에 따라 Y-globulin의 양이 가장 크게 변했으며 진도개와 삽사리의 albumin과 globulin의 비는 다른 품종의 개들보다 낮았다.
소 난자 체외성숙에 있어 소 태아혈청 (fetal bovine serum: FBS)첨가시 높은 성숙율을 보이며 핵 이식 후 배 발달율에 있어서도 높다. 하지만 소 태아혈청은 hormone, growth factor, vitamine 그리고 다수의 어떤 잘 알려지지 않은 인자를 포함한 복잡한 배지로 알려져 있으며, 수정란 이식 후 태아의 발육중 및 태어난 직후에 발생되는 송아지에서 나타나는 몇몇 비정상적인 현상들의 원인인 것으로 보고되고 있다. 본 실험은 체외 배양시 소 태아혈청과 이의 대체물질로서 BSA 또는 PVA가 첨가된 배양조건에서의 복제 수정란의 배 발달율을 비교함과 동시에 배반포의 세포수 그리고 세포자연사 (Apoptosis)를 각각의 조건에서 비교함으로써 배발달에 미치는 효과를 알아보기 위하여 실시하였다. 핵이식은 소 체세포를 이용하였으며, 핵 이식 후 CR1aa 기본 배양액으로 FBS, BSA, 그리고 PVA를 첨가하여 5% $CO_2$, 5% $O_2$, 39$^{\circ}C$ 조건하에서 7~8일간 배양하였다.
韓國産 개구리 目의 8種에 대하여 血色素와 血淸 단백질의 cellulose acetate 電基泳動圖를 조사하였다. 혈색소의 전기영동도는 종에 따라 그 구성성분의 수와 이동도에 차이가 있었다. 두꺼비와 금개구리에서는 단일 밴드로 나타났고, 여타의 종에서는 2밴드로 분리되었다. 혈청단백질의 전기영동도는 종에 따른 특징을 잘 나타내고 있다. 이들 동물의 혈청단백질에서는 다형현상이 나타나지 않았다. 모든 실험재료에서 albumin은 뚜렷이 나타나지만 prealbumin은 나타나지 않았다. 두꺼비에서는 albumin과 postalbumin 사이가 분명하게 분리되지 않았다. 따라서 혈청단백질의 전기영동도에서 두꺼비와 다른 종들을 쉽게 구별할 수가 있었다.
피프로닐은 N-페닐피라졸계의 살충제로 해충 방지제로 사용되고 있으며, WHO에서는 피프로닐을 발암물질 2급으로 분류 및 규제하고 있다. 피프로닐은 급성중독 시에 현기증, 근육약화, 호흡곤란, 피부자극, 심박수 증가 등의 다양한 증상이 나타나는 것으로 알려져 있고 피프로닐 설폰 또한 이와 비슷한 증상을 유발하는 것으로 알려져 있다. 최근 피프로닐이 함유된 계란이 유통되면서 전 세계적으로 독성 문제가 확산되고 있는 상황이다. 본 연구에서는 동물 혈청 시료 중 피프로닐 및 피프로닐 설폰의 노출량 분석법 개발을 시도하였다. 이동상에 따른 차이 및 액체-액체 추출과 고체상추출 전처리 방법에 따른 결과를 비교하였다. 이동상은 증류수(A)와 아세토니트릴(B)을 선정하였고, 전처리 방법은 고체상추출로 진행하였다. 분석법검증을 수행한 결과, 일내/일간 정확도는 82.2~114.1% 이었고, 정밀도는 20% 이하로 나타났다. 검출한계는 피프로닐 0.027 ng/ml, 피프로닐 설폰은 0.087 ng/mL 이었고, 검량선 회귀식의 결정계수(r2)는 0.99 이상으로 우수한 직선성을 보여주었다. 본 연구에서 개발된 동물 혈청 중 피프로닐 및 피프로닐 설폰 분석방법을 이용하여 일부 동물 혈청에서의 농도를 확인하였다. 본 연구에서 개발한 분석법을 이용하여 동물 혈청뿐만 아니라 피프로닐 및 피프로닐 설폰의 인체 모니터링을 위한 분석법으로도 사용 할 수 있을 것으로 판단된다.
[ $\cdot$ ]동물용의약품등 제조업 신규 허가 $\cdot$동물용의약품등 수입관리자 신규 승인 $\cdot$동물용의약품 제조$\cdot$수입업 폐업 신고 $\cdot$동물용의약품 제조$\cdot$수입업 휴업 신고 $\cdot$동물용의약품등 제조업 허가사항 변경 $\cdot$동물용의약품등 수입자 확인사항 변경 $\cdot$동물용의약품 품질관리우수업체 신규 지정 $\cdot$동물용의약품 품질관리우수업체 변경 지정 $\cdot$혈청검사 및 검역수수료 규칙 개정 $\cdot$통합공고 개정 고시 $\cdot$구제역 방역 특별대책 추진 $\cdot$니트로후란제제 수출용 품목허가 허용
배의 발생과 분화에 따른 혈청 alpha-fetoprotein (AFP)의 생리적 기능 규명을 위한 기초실험의 일환으로, 모체와는 완전히 독립된 상태에서 발생과 분화가 이루어지는 계배의 혈청을 재료로 하여 CM-Sephadex C-50, hydroxyapatite 및 DEAE-Sepharose A-25등의 크로마토그라피 방법에 의해 닭 혈청 AFP를 분리하였다. 계 AFP는 분자량이 약 60 Kd로 사람 및 다른 포유동물 AFP의 분자량 (64-74 Kd)보다 작았다. 닭 AFP, 계배혈청 및 닭 혈청 등을 토끼에 면역하여 항체를 제조하였고, 이를 이용하여 닭의 배발생 단계에 따른 혈청 AFP 함량의 변화를 전기영동 및 면역학적 방법으로 정성 및 정량 분석을 실시하였다. 혈청 AFP 함량은 발생 7일-배 (AFP 농도 : 0.81 mg/ml)부터 점차 증가하여 13일-배에서 최고치인 2.46 mgfml로 나타났으며 그 이후 급격히 감소되어 부화 직후에는 매우 낮은 농도 (0.22mg/ml)였고 부화 4일에 거의 없어 졌으며, 이와 같은 AFP 함량의 변화는 혈청 알부민 함량의 변화와 거의 반비례 함을 알았다. For the preliminary step to investigate the site of AFP synthesis, the ontogenic characteristics and the physiological function of AFP, alpha-fetoprotein was isolated from chick embryo serum through the procedures of CM-Sephadex C-50, hvdroxvapatite and DEAE-Sephadex A-50 chro-matography. The isolated AFP was proved to be pure and its molecular weight was found to be about 60 Kd. With this purified AFP, rabbit anti-chick hor was produced. The serum AFP level in chick embryo has been investagated by using polyacrylamide gel electrophoresis, immunoelec-trophoresis and single radial immunodiffusion from 7 days of incubation until 4 days after hatch-ing. It was found that the AFP level is increased from 0.81 mg/ml at daw-7 embryo to maximum value of 2.46 mg/ml at day-13 embryo, followed by rapid decreases until hatching.
진도개와 삽사리 혈청 lactate dehydrogenase와 혈청 alkaline phosphatase의 동위효소 및 효소활성도를 분석하였다. 전기영동결과 진도개와 삽사리의 혈청에서는 5두지 종류의 LDH의 동위효소가 모두 확인되었다. LDH의 활성도는 진도개의 경우 522.53 $\pm$ 279.96(U/L)이었고 삽사리는 534.10 $\pm$ 280.35(U/L)이었다. 진도개와 삽사리의 혈청 alkaline phosphatase전기 영동상에서 는 한 종류의 동위효소만 관찰되었고 활성도는 진도개의 경우 7.61 $\pm$ 4.52(K-A unit)였고 삽사리는 10.46 $\pm$ 7. 10(K-A unit) 였다. 삽사리의 ALP 활성도는 연령에 따라 커다란 차이를 나타내었다.
망간은 정소 독성을 나타내며, 뇌기저핵에 작용하여 혈청 프로락틴의 농도를 증가시킨다. 그리고 혈청 프로락틴 농도 상승에 의한 과프로락틴혈증(hyperprolactinemia)은 정소의 정자 생성을 억제한다. 본 연구에서는 망간의 전신 노출이 흰쥐 정소의 정자 생산과 혈청 프로락틴 농도에 미치는 영향을 조사하기 위하여 실험동물을 대조군 $(0.0mg/m^3)$과 망간 노출군 (Mn $1.5mg/m^3$)으로 나누고, 노출군은 다시 노출 기간에 따라 4주와 13주 노출군 등 4군으로 분류하였다(n=10). 노출 기간에 따라 실험동물의 체중 변화와 사료 섭취량 등 일반적 소견 관찰, 혈액과 정소의 망간 농도, 정자의 수와 기형 등을 관찰하였다. 그리고 망간 노출에 따른 혈청 프로락틴 농도를 조사하여 망간 노출 조건에 따른 혈청 프로락틴 농도 변화 및 정소 독성을 조사하였다. 망간 노출 4주 및 13주군에서 노출기간에 따라 혈액 및 정소의 망간 농도가 유의하게 증가되었다. 대조군에 비하여 망간 노출군에서 노출기간에 따라 정자의 수가 감소되었으며, small head와 bent tail 등 기형 정자의 빈도는 증가하였다. 혈청 프로락틴의 농도는 망간 투여군에서 대조군에 비하여 유의하게 증가하였다. 그러나 실험동물의 체중 변화 및 사료 섭취량은 실험군간에 차이가 없었다. 이러한 결과들로 보아 $1.5mg/m^3$ 농도의 아만성 망간 노출은 흰쥐의 혈청 프로락틴 농도를 증가시키고, 정소 독성의 원인으로 추정된다. 그리고 전신 노출에 의한 망간의 흰쥐 정소 독성의 무유해영향농도(NOAEL)는 $1.5mg/m^3$ 이하로 예측된다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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