The objective of this study is to investigate the effect of multivitamin on macrophage activity in Raw 264.7 cell and repeated oral dose toxicity in Sprague-Dawely rat of multivitamin. Raw 264.7 cells were treated with 50 and $100{\mu}g/mL$ multivitamin for 24 h. To measure the activity of macrophages, NO and TNF-${\alpha}$ assays were performed in Raw 264.7 cells. Treatment with 50 and $100{\mu}g/mL$ multivitamin for 24 h significantly increased production of NO and TNF-${\alpha}$ compared with control groups, indicating activation of macrophages. The female rats were treated with multivitamin of control group, low group (0.24 g/kg), medium group (1 g/kg) and high group (2 g/kg) intragastrically for 4 weeks, respectively. We examined the body weight, the feed intake, the clinical signs and serum biochemical analysis. We also observed the histopathological changes of liver, ovary, brain, adrenal gland, spleen, kidney, heart and lung in rats. No significant differences in body weights, feed intake, biochemical analysis and histopathological observations between control and multivitamin treatment group were found. In conclusion, multivitamin is physiologically safe and improve macrophage activity.
Yu, Ju Hyeong;Geum, Na Gyeong;Ye, Joo Ho;Jeong, Jin Boo
Korean Journal of Plant Resources
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v.34
no.5
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pp.411-419
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2021
In this study, we investigated in vitro immune-enhancing and anti-obesity activity of Abelmoschus manihot roots (AMR) in mouse macrophage RAW264.7 cells and mouse adipocytes 3T3-L1 cells. AMR increased the production of immunostimulatory factors such as nitric oxide (NO), inducible nitric oxide synthase (iNOS), interleukin-1β (IL-1β), interleukin-6 (IL-6) and tumor necrosis factor-α (TNF-α) in RAW264.7 cells. The inhibition of toll like receptor (TLR) 2 and 4 blocked AMR-mediated production of immunostimulatory factors in RAW264.7 cells. In addition, the inhibition of mitogen-activated protein kinases (MAPKs) signaling pathway reduced AMR-mediated production of immunostimulatory factors. From these results, AMR is considered to have immune-enhancing activity through TLR2/4-mediated activation of MAPKs signaling pathway. In addition, AMR inhibited lipid accumulation and reduced the protein level such as CCAAT enhancer-binding protein alpha (CEBPα), peroxisome proliferator-activated receptor gamma (PPARγ), perilipin-1, adiponectin and fatty acid binding protein 4 (FABP4) associated with lipid accumulation in 3T3-L1 cells, indicating that AMR may have anti-obesity activity. Based on these results, AMR is expected to be used as a potential functional agent for immune enhancement and anti-obesity.
Seo, Min Jeong;Kang, Byoung Won;Park, Jeong Uck;Kim, Min Jeong;Lee, Hye Hyeon;Ryu, En Ju;Joo, Woo Hong;Kim, Kwang Hyuk;Jeong, Yong Kee
Journal of Life Science
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v.23
no.1
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pp.63-68
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2013
The effect of black garlic extract on the activation of spleen cells from a C57BL6 mouse was investigated to examine immune activities of of fermented black garlic containing a variety of bioactive substances. xtract obtained from the concentration of commercial Namhae black garlic was used for the analysis of immune activities. Treatment with the extract increased the expression of interleukin-2 (IL-2) cytokine. The simultaneous administration of the extract plus lipopolysaccharide (LPS) increased the expression of IL-2, tumor necrosis factor (TNF)-${\alpha}$, and interferon (IFN)-${\gamma}$ compared with that of a control group. This result suggests that cellular immunity can be induced by macrophages, resulting in the expression of T lymphocytes and T helper type 1 (Th1) cells. In addition, treatment with the extract increased the late response of IL-6 cytokines, and the extract plus LPS augmented the expression of IL-4 and IL-6 compared with that of an LPS-treated group. Meanwhile, the extract plus LPS decreased the late response of IL-10, suggesting that humoral immunity can be activated by stimulating B lymphocytes, suppressing cellular immunity, and effectively modulating the conversion into humoral immune responses. These findings demonstrate that the black garlic extract activates Th1 and Th2 cells by stimulating T lymphocytes in mouse spleen cells and leads to immunomodulation by activating cellular and humoral immune responses of the immune system.
이물질 침입에 대한 인식의 결과 NO, PGE$_2$, TNF-, IL-6와 같은 여러 신호전달물질의 분비가 개시되며 이들을 억제하는 물질을 항염증제라고 볼 수 있다. 본 연구에서는 회향(Foeniculum vulgare Mill.) 열매 추출물이 mouse macrophages RAW264.7 세포에서 lipopolysaccharide(LPS)로 유도한 NO(iNOS 산물), PGE$_2$(COX-2 산물) 및 cytokines (TNF-$\alpha$, IL-6) 생성 억제에 미치는 영향을 살펴보았다. 회향 열매의 methanol 추출물 및 분획물(chloroform, butanol, and aqueous fractions)은 4~100$\mu$g/mL 농도에서 LPS가 활성화된 대식 세포에서 NO 생성을 억제하였으며 독성을 나타내지 않았다. LPS가 유도한 PGE$_2$ 생성은 butanol 분획(100 $\mu$g/mL)에 의해서만 유의적으로 감소하였다(P<0.05). 회향 열매 추출물 및 분획물은 TNF-$\alpha$의 생성을 유의적으로 감소시켰으며 IL-6의 생성은 methanol extract(4~100 $\mu$g/mL), chloroform fraction(4 $\mu$g/mL), butanol fraction(4 and 100$\mu$g/mL) 및 aqueous fraction(4~100 $\mu$g/mL)에 의해 감소되었다(P<0.05). 이는 회향 열매 추출물은 염증 상태에서 유용할 것이며 COX-2와 iNOS를 억제하는 butanol 분획은 새로운 항염증제 개발에 사용될 수 있음을 시사하여 주었다.
Journal of the Korean Society of Food Science and Nutrition
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v.40
no.11
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pp.1507-1511
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2011
This study investigated the anti-inflammatory effect of Erigeron annuus L. flower (EAF) methanol extract. We examined the involvement of heme oxygenase-1 (HO-1) in the inhibitory activities of EAF methanol extract on nitric oxide (NO) production in lipopolysaccharide (LPS)-stimulated RAW264.7 macrophages. Cell viability and NO assays were performed. In addition, inducible nitric oxide synthase (iNOS) and HO-1 expressions were detected by Western blotting and blocking HO-1 activity on NO production. EAF methanol extract (25, 50, 100, 200 ${\mu}g$/mL) significantly inhibited LPS-stimulated NO production (p<0.05; 12.82, 9.61, 6.83, 2.52 ${\mu}m$) in a concentration-dependent manner. EAF methanol extract also reduced the expression of iNOS protein. The EAF methanol extract induced the expression of HO-1 in a dose-dependent manner. Blockage of HO-1 activity by zinc protoporphyrin suppressed EAF methanol extract-induced reductions in the production of NO. The present results suggest that EAF methanol extract has a potent anti-inflammatory effect in RAW264.7 macrophages through the induction of HO-1.
Journal of the Korean Society of Food Science and Nutrition
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v.41
no.7
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pp.888-894
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2012
Salvia plebeia R. Br. (Labiatae), distributed in many countries such as Korea, China, India, Iran, and Australia, is used as a folk remedy for a variety of inflammatory diseases including hepatitis, cough, diarrhea, gonorrhea, menorrhagia, tumors, and hemorrhoids. This study focused on determining the involvement of anti-inflammatory heme oxygenase-1 (HO-1) in the inhibitory activity of an extract of Salvia plebeia R. Br. leaves (SPL) on nitric oxide (NO) production and inducible nitric oxide synthase (iNOS) expression in lipopolysaccharide (LPS)-stimulated RAW264.7 macrophages. SPL extract at the highest concentration (500 ${\mu}g/mL$) significantly inhibited NO production by approximately 85% and suppressed iNOS protein expression by approximately 90% compared to LPS-stimulated cells. The SPL extract induced the expression of HO-1 in a dose-dependent manner, and blocking HO-1 activity abolished the inhibitory effects of the SPL extract on NO production. These results suggest that an SPL extract has potent anti-inflammatory activity through HO-1 induction in RAW264.7 macrophages.
For industrial application to manufacturing functional foods for health using browned oak mushroom, we examined its reducing power, inhibitory effect on intracellular reactive oxygen species, phenolic compounds and phytates contents, modulatory effects on NO radical and matrix metalloproteinase 9 (MMP9) generation by activated macrophages, and antimutagenicity in order to evaluate the functionality of browned oak mushroom for health. While overall ethanolic extracts have higher reducing power than aqueous extracts, browning reaction was found to increase reducing power by up to 28% at a 3.32 mg/ml sample concentration. Browning reaction also increased phenolic compound content by about 73% compared to raw mushroom. However, any significant change in phytate content could not be detected. At a concentration of $100\;{\mu}g/ml$, treatment of ethanolic extract of oak mushroom increased NO generation over 43% in LPS-stimulated macrophage. On the contrary, the aqueous extracts rather decreased it over 17% at the same sample dose. However, any solvent extract from browned oak mushroom seems not to cause any change in both NO production and MMP9 activity. In addition, browning reaction did not allow any significant change in suppressive effect on mitomycin C-induced mutagenesis as examined with SOS chromotest. These results suggest a possible use of browned oak mushroom with unmarketable quality as a material for development of a variety of processed functional foods for health.
Background : In acute lung injury, activated neutrophils play an important role in tissue damage. For neutrophils to participate in lung inflammation, chemotactic factors released from mononuclear phagocytes are needed to bring these cells to the local site of inflammation, with interleukin-8 (IL-8) being one of the most specific and important chemotactic factors for neutrophils. IL-8 also induces the expression of adhesion molecules and activates neutrophils to release various inflammatory mediators. Lipopolysaccharide(LPS) is one of the most important causes of adult respiratory distress syndrome and can cause release of many inflammatory cytokines including IL-8 leading to acute lung injury. But little is known about the regulatory mechanism of LPS-induced IL-8 gene expression in mononuclear phagocytes. Method : Human alveolar macrophages(HAM) and peripleral blood monocytes(PBMC) were isolated from healthy volunteers. Time and dose relationship of LPS-induced IL-8 mRNA expression was observed by Northern blot analysis. To evaluate the regulatory mechanism of LPS-induced IL-8 gene expression, pretreatment of actinomycin D(AD, $5{\mu}g/ml$) and cycloheximide(CHX, $5{\mu}g/ml$) was done and Northern blot analysis for IL-8 mRNA and ELISA for immunoreactive IL-8 protein in culture supernatant were performed. Results : 1) In HAM, dose and time dependent LPS-induced IL-8 mRNA expression was observed with peak mRNA level at 8 hours post-stimulation. 2) In PBMC, dose and time dependent LPS-induced IL-8 mRNA expression was also observed with peak mRNA level at 4 hours post-stimulation. 3) AD decreased expression of LPS-induced IL-8 gene expression at both mRNAand protein levels in both types of cells. 4) CHX decreased expression of LPS-induced IL-8 gene expression at protein level in both cell types but in HAM, superinduction of IL-8 mRNA was observed while decreased expression of IL-8 mRNA was observed in PBMC. Conclusion : Time and dose dependent LPS-induced IL-8 gene expression was observed in mononuclear phagocytes which is at least partly regulated pretranslationally. LPS-induced IL-8 mRNA expression in HAM needs no de novo protein synthesis and may be under the control of a labile repressor protein while de novo protein synthesis may be needed in PBMC.
Background: The immediate hoot response to LPS is the production of proinflammatory cytokines that act as intercellular mediators in inflammatory reactions, including acute lung injury. These "early response" cytokines transmit signals from recognition cells to target or effector cells. This host response is further amplified by the expression of leukocyte chemoattractants, growth factors, and adhesion molecules, resulting in an array of proinflammatory events. This experiment was performed to define the lung origin of proinflammatory cytokines, such as TNF-$\alpha$, IL 6 in early periods of endotoxin induced acute lung injury (ALI). Method: The healthy male Sprague-Dawley, weighted 150 - 250g, were divided into saline control (NC) and endotoxemia-induced ALI (ETX-), and leukopenic endotoxemia-induced ALI (CPA-ETX-Group) which was induced by cyclophosphamide, 70 mg/kg i.p. injection. Acute lung injury was evoked by LPS, 5 mg/kg, intravenously administered. Bronchoalveolar lavage was performed at 0, 3, 6 h after LPS-treated to estimate the influx of phagocytes and concentration of total protein, and cytokines as TNF-$\alpha$ and IL 6 by a bioassy using MIT method. We also examined the localization of TNF-$\alpha$ and IL 6 protein in endotoxemia-challenged lung tissue by immunohistochemical stain (IH). Results: The total cell, macrophage and PMN count in BALF were elavated in ETX group compared to NC(p<0.05). In CPA-ETX group, total cell and macrophage count in BALF were not changed compared to NC. but PMN count was markedly reduced and it took part in less than 0.1 % of total BAL cells (p<0.01). The protein concentration in BALF were significantly increased in ETX and CPA-ETX group Compared to NC (p<0.05), but there was significant difference between ETX- and CPA-ETX group only at 6 h (p<0.05). This observation suggested that even if PMNs are involved in the pathogenesis of acute lung injury, their role cannot be viewed as essential The concentration of TNF-$\alpha$ and IL 6 in BALF was significantly increased in the ETX- and CPA-ETX group compared to NC. There was no difference between ETX- and CPA-ETX group. In IH, anti-TNF-$\alpha$- and anti-IL 6 antibody was strongly localized at interstitial monocytes and alveolar macrophages in endotoxemia-challenged lung tissue. From above point of view, activated alveolar macrophage/monocyte considered as a prominent source of proinflammatory cytokines in endotoxemia-challenged lung injury. Conclusion: The prominent source of proinflammatory cytokines in early periods of endotoxemia-induced lung injury will be the activated resident macrophages like an alveolar macrophage and interstitial monocytes. The pulmonary macrophage/monocyte will impact the initiation and continuance of lung injury without PMNs's certain inflammatory role, particularly in endotoxemia-induced acute lung injury.
Kim, Yon-Suk;Lee, Seung-Jae;Hwang, Jin-Woo;Kim, Ee-Hwa;Park, Pyo-Jam;Jeong, Jae-Hyun
Journal of the Korean Society of Food Science and Nutrition
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v.41
no.9
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pp.1205-1210
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2012
This study investigated the anti-inflammatory effects of Ligustrum ovalifolium H. (LOH) leaf extracts on RAW264.7 macrophages. Cell toxicity was determined by MTT assay. We evaluated the anti-inflammatory effects of LOH extracts by measuring nitric oxide (NO), reactive oxygen species (ROS), inducible NOS (iNOS) production, and cyclooxygenase-2 (COX-2) expression by Western blotting. LOH ethanolic extracts (0.05, 0.1, and 0.2 mg/mL) significantly suppressed LPS-stimulated production of NO. The intracellular ROS level also significantly decreased. LOH ethanolic extracts reduced the expression of iNOS and COX-2 proteins. The present results show that LOH ethanol extract has potent anti-inflammatory effects on RAW264.7 macrophages. These results also suggest that the anti-inflammatory effects of LOH extracts may be related to the inhibition of LPS-stimulated ROS and NO production. Therefore, ethanolic extracts of LOH leaves may be utilized as a good source of functional foods for protection against inflammatory diseases.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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