이 보고서는 환경보존과 이에 따르는 이용기술 개발이라는 차원에서 현재 전세계적으로 진행되고 있는 냉동공조산업 관련 대체기술의 개발동향 및 전망에 대해서 기술하려 한다. 새로 개발되거나 사용이 고려되고 있는 CFC 대체 물질들과 가정용 냉장고, 에어콘, 건물용 chiller 등에 적용되는 신기술 등을 요약하려 하며 특히 에너지절감 방책들을 소개하려 한다.
We have successfully maintained Cyptospori, diam mons by cryopreservation. Oocysts were suspended in distilled water, stored at $-20^{\circ}C$ for 24 hrs, and then cryopreserved at $-70^{\circ}C$. Cryopreserved specimens were slowly thawed at $5^{\circ}C$. Oocysts, which had been cryopreserved for 1% months without cryoprotective agents. retained their infectivity by the mouse titration method. Oocysts stored at $5^{\circ}C$ in 2.5% potassium dichromate failed to retain their infectivity beyond 6.5 months.
The purpose of this study was to evaluate the viability of periodontal ligament cells in rat teeth using slow cryo-preservation method under pressure by means of MTT assay and WST-1 assay. Eighteen teeth of Sprague-Dawley white female rats of 4 week-old were used for each group. Both sides of the first and second maxillary molars were extracted as atraumatically as possible under Tiletamine anesthesia. The experimental groups were group 1 (Immediate control), group 2 (Cold preservation at $4^{\circ}C$for 1 week), group 3 (Slow freezing), group 4 (Slow freezing under pressure of 3 MPa). F-medium and 10% DMSO were used as preservation medium and cryo-protectant. For cryo-preservation groups, thawing was performed in $37^{\circ}C$water bath, then MTT assay and WST-1 assay were processed. One way ANOVA and Tukey method were performed at the 95% level of confidence. The values of optical density obtained by MTT assay and WST-1 were divided by the values of eosin staining for tissue volume standardization. In both MTT and WST-1 assay, group 4 showed significantly higher viability of periodontal ligament cells than group 2 and 3 (p < 0.05), but showed lower viability than immediate control group. By the results of this study, slow cryo-preservation method under pressure suggests the possibility for long term cryo-preservation of the teeth.
The effects of diluents composition on cold storage for Scapharca broughtonii (Schrenck) sperm were examined in the percentage of sperm activity and survival rate. Various diluents of glucose solutions (10 mM Hepes-pH 7.8), 600 mM NaCl, stein solution, Ringer's solution (230 mM NaCl, 8 mM KCl, 2 mM $CaCl_2$, 3.7 mM $MgCl_2$, 0.2 mM $NaHCO_3$, 10 mM Hepes-pH 7.8), 20%, 25% ASW (NaCl 2.7 g + KCl 0.07 g + $CaCl_2$ 0.12 g + $MgCl_2$ 0.46 g + $NaHCO_3$ 0.05 g + distilled water 100 ml) were used to store th sperm at $4^{\circ}C$. The storage effect was evaluated using sperm activity and survival rate. Ringer's solution was found to be better diluents which maintained high activity and survival rate of sperm for a storage period of 7 days. Optimal pH of diluents to store the sperm at $4^{\circ}C$ is 7.5.
The causes of degenerative changes in allograft cardiac valves are not well known to this day. Today's preserved allografts possess highly viable endothelial cells and degeneration of allografts can be facilitated by immune reaction which may be mediated by these viable cells. To test the antigenicity of endothelial cells, pieces from aortic wall were obtained from fresh and cryo-preserved rat allograft. Timings of sampling were prior to sterilization, after sterilization, after 1, 2, 7, 14 days of fresh preservation and cryopreservation. Endothelial cells were tested by immunohistochemical methods using monoclonal antibodies to MHC class I(MRC OX-18), class II(MRC OX-6) and ICAM-1 antigens. After transplantation of each group of aortic allograft at the subcutaneous layers of rats, population of CD4$^{+}$ T cell and CD8$^{+}$ T cell were analyzed with monoclonal antibodies after 1, 2, 3, 4, 6 and 8 weeks. MHC class I expression was 23.95% before preservation and increased to 35.53~48.08% after preservation(p=0.0183). MHC Class II expression was 9.72% before preservation and 10.13~13.39% after preservation(P=0.1599). ICAM-1 expression was 15.02% before preservation and increased to 19.85~35.33% after preservation(P=0.001). The proportion of CD4$^{+}$ T-cell was 42.13% before transplantation. And this was 49.23~36.8% after transplantation in No treat group (p=0.955), decreased to 29.56~32.80% in other group(p=0.0001~0.008). In all the groups, the proportion of CD8$^{+}$ T-cell increased from 25.57% before transplantation to 42.32~58.92% after transplantation(p=0.000l~0.0002). The CD4$^{+}$/CD8$^{+}$ ratio decreased from 1.22~2.28 at first week to 0.47~0.95 at eighth week(p=0.0001). The results revealed that the expression of MHC class I and ICAM-1 in aortic allograft endothelium were increased but that of MHC class II were not changed, despite the different method of preservation. During 8 weeks after transplantation of aortic allograft, the subpopulations of CD4$^{+}$ T cell were not changed or only slightly decreased but those of CD8$^{+}$ T cell were progressively increased.ely increased.
This study was performed to measure the mutagenicity of fish by cooking and storage. Mutagenicity of the fish extract was measured by Ames test(Salmonella typhimurium reversion assay with TA 100) in vitro and by micro-nucleus test in vivo. The fish samples screened in this study were white fish(Trichiurus, Croaker, Salted Croaker) and red fish(Saury pike, Mackerel, Yellowtail, Salmon). The number of revertants of red fish were significantly higher than that of white fish. And the mutagenicity of mackerel was higher than other red fish, so followed experiment was made by using the extract of mackerel. Mutagenicity of the samples cooked on microwave oven was the lowest, whereas there was no significant difference between the samples cooked on gas grill and the ones on electric grill. In the presence of S9 mixture, the methanol extract of mackerel showed 2∼4 times high values of mutagenicity in comparison with the extract without S9. The extract of mackerel cooked with various vegetable juices showed inhibitory effects on the mutagenicity in the order of green tea, ginger, and radish. Also, the number of revertants was increased in the stored samples. Mutagenicity of the samples stored in the refrigerator was higher than that of the freezer. In micronucleus test, the methanol extract treated with vegetable juice inhibited micro-nucleus formation in bone marrow by cyclophosphamide in the order of ginger, green tea, and radish. In TBA test, there was a tendency that TBA values were increased as the storage time increased. Also, the rancidity of sample were stored in the refrigerator was higher value than sample stored in the freezer. Samples cooked on microwave oven showed the highest value in rancidity. When the antioxidant effect of vegetable juice was measured by electron donating ability(EDA) of mackerel cooked with vegetable juice to DPPH, the samples treated with onion showed the highest value of EDA(%), and the samples treated with green tea, ginger and cabbage also showed the antioxidant effect.
Long term preservation experiment through refrigeration was conducted for 2 year on 300 lines of silkworm races preserved, as one method for the development of long term safe preservation technique. Experiment with 6 treatments was conducted for 680 days from July 1 st 2000 to May 1st 2002. Embryonic development was conducted to each treatment. There are no differences among treatments and races in 400 days preservation, the stage of whole embryonic development was Eul B and condition of eggs was good. In 650 days preservation experiment, differences were reveled among races and treatment, the level of whole embryonic development was Byeong A and condition of eggs was good. The order of embryonic development is European races >Tropical, Korean races >Japanese, Chinese races, thus European races showed fast embryonic development. Control(treatment A) and treatment C showed faster development than other treatments. And treatment D and F showed stable individual stage among all treatments. The test of shape characteristics and embryo which were conducted in hatching period showed 61% of high line succession possibility in average of 6 treatments. But treatment A and B showed no hatching, 3 lines of treatment C, 48 lines of treatment D, 1 line of treatment E, and 29 lines of treatment F showed slow development. And treatments D and F which showed stable embryo condition had highest possibility. The two treatments D and F showed good result among six treatments, and the preservation period of treatment D and F are 235 days and 310 days, and exposure period in $-2.5^{\circ}C$...was longer than other treatments. Numbers of hatched lines of treatment D and F are 48 and 29, and occupied 15.6% and 9.4% of all tested lines, respectively. Average hatching ratio of treatment D and F were 54.% and 71.6%, and average dead egg ratio were 12.6% and 2.4%, respectively. These results show that average ratio of hatching dead eggs in treatment D and F are higher than general line. Thus reconsideration of hatching condition on treatment D and F is needed.
Herbicides have been used to control weeds for decades. If detoxification upon exposure to herbicides requires considerable amounts of energy, it could affect the pattern of resource allocation to growth and reproduction of crops. We examined the effects of three levels of a herbicide (Control, Low, and High) on germination, growth and reproductive characters of Glycine max treated twice, i.e., before and after seed germination. Since flowering time of G. max was separated into two groups, flowering time was also considered as a variable in this study. The rate of seed germination tended to be higher at the low level of herbicide compared to other levels. Chlorosis and shape variation of leaves were apparent after the second herbicide treatment, but completely disappeared after six weeks of treatment. The herbicide effects on growth characters were somewhat different between early and late flowering plants, but plants treated with both low and high levels of herbicide reduced their growth compared to those in the control group regardless of flowering time. Plants at the high level of herbicide exhibited the highest growth rate later in the season, suggesting that plants compensated to some extent for reduced growth. However, growth reduction among plants at the high level of herbicide was persistent until the end of growing season. Among plants flowered late in the season, plants in the control level bore a higher number of nodules per plant than those in other levels; such a pattern did not exist among plants flowered early in the season. Plants treated with low and high levels of herbicide produced a lower number of flowers than those in the control. Thus, the herbicide examined affected not only the growth and reproductive characters of non-target crops but also the development and growth of root nodules.
Kefir is a traditional fermented milk in Caucasusian area and is made mainly of milk fermented with lactic acid bacteria and yeasts. Six typical kefir grains were selected from ten kefir grains collected from different locals in Korea. Kefir grains were gelatinous in texture and had various shapes of villi, grapes, leaves, hulled millets, and towels. To investigate predominant microflora of kefir grains, SPC, MRS, M17, Rogosa, and APT agar media were used for viable cell count MRS, SPC, and Rogosa media were most acceptable for bacterial cell counts of the selected kefir grains. From one or two of the SPC agar plates which contained around 25∼50 colonies, all grown colonies were isolated and identified. Most predominant bacteria was identified as Lactobacillus fermentum by API 50 CHL kit. The proportions of Lb. fermentum and Lb. brevis among the total identified bacteria were around 41~88% and M4%, respectively. To select the best preservation method for kefir grains, refrigeration, freezing, and freeze drying were compared. Freeze drying was found most suitable for the preservation of kefir grains, based upon their acid-producing activities and production of off-flavors.
A series of animal experiments has been carried out to investigate the potential antigenicity of the FCS (Fetal Calf Serum) which is commonly used to enhance viability of preserved aortic allograft. Aorti allografts were processed using nutrient media without FCS(control group) or with 10% FCS(study group). After 14 days of 4$^{\circ}C$ cold storage and cryopreservation, antigenic expression of allograft rondothelial cells were studied using immunohistochemical study. To determine antigenicity, level of Anti-MHC class I Antibody, anti-MHC class II antibody and anti-lCAM 1 antibody were measured. There were no stAtistically significant differences in all antigenic expression between control group and study group(p=0. 524 in MHC class I expression, p=0.897 In MHC class II expression, p=0.1305 in ICAM 1 expression). With this result, antigenicity provoking effect of FCS could not be proven. Thus, FCS may not be eliminated from the nutrient media for preservation of aortic allograft due to its proven benefit of cell viability enhancement.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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