This research was performed to investigate the morphological changes of folliculus ovary according to the radiation dose. The whole body radiation of 200 cGy, 400 cGy, and 600 cGy was given to the each groups of 5 months-aged female mouse. Various staining methods used in this research are: Hematosylin-Eosin method, and immunohistochemistrical methods using BrdU, TUNEL, p53, p21, PCNA and inhibin. The minute structural changes of folliculus ovary were observed through an electron microscope with high magnification. The morphological changes of growing folliculus ovary became distinct as the dose of X-rays increased. Especially, the nuclei of granular cells showed manifest condensation and the changes of the transparent zone were distinct. As a result of histochemical reaction according to Masson's trichrome method and reticular fiber method, the changed granular cells, the deformed basilar membrane of folliculus ovary and the abnormal arrangement of the reticular fiber were observed. In the reaction of BrdU, the granular cells of normal folliculus ovary with positive reaction rapidly decreased according to the increase of the dose of X-rays. In TUNEL study, granular cells showing positive reaction in retarded folliculus ovary were expanded to growing folliculus ovary and primordial folliculus ovary according to the increase of the dose of X-rays. In case of 600 cGy of X-rays, oocyte underwent apoptosis. In p53 immunohistochemistry, p53 manifested to be stronger as the dose of X-rays increased. p53 reactivity was manifested distinctively in all cells comprising folliculus ovary following irradiation of 600 cGy. p21 was manifested in granular cells of folliculus ovary and showed very positive reaction around follicular antrum according to the increase of the dose of X-rays. In PCNA, positive reaction was manifested in growing folliculus ovary, mature folliculus ovary and primordial folliculus ovary, but the extent of the reaction decreased as the dose of the X-rays decreased. The finding that the reaction of granular cells around folliculus ovary was stronger than that near follicular membrane indicates that what was damaged first by X-ray was the cells near folliculus ovary and follicular antrum. The reactivity of $inhibin-{\alpha}$ showed difference according to the growing stage of folliculus ovary: $inhibin-{\alpha}$ showed the most strong reaction in mature folliculus ovary with follicular antrum. There was strong reaction in granular cells around follicular membrane but $inhibin-{\alpha}$ did not occur at all in theca cells comprising follicular membrane. $Inhibin-{\alpha}$ in ovary tissue exposed to 400 cGy of X-rays was manifested more strongly than in ovary tissue exposed to 600 cGy of X-rays, which was related to the phenomenon that granular cells of mature folliculus ovary underwent necrosis or apoptosis increasingly due to X-rays. In an electron microscope with high magnification, nuclei and protoplasm of granular cells in growing folliculus ovary abruptly underwent minute structural changes according to the increase of dose of X-rays. Cell residue, by-product of cell decease, neutrophil and macrophage around follicular antrum were observed. The minute structural changes in granular cells showed typical characteristics of apoptosis: the increase of electronic density due to nuclear condensation, fragmentation of nuclei and atrophy of protoplasm. Necrosis of cells was identified but it was not so remarkable. Macrophage with apoptotic bodies was scattered. Proportional to the radiation dose, we found that the generation of heterogeneous substance of normal ovary texture's follicular fluid, the emergence of dyeing characteristic in the basilar membrane of folicle, the generation of apoptosis, and the transformation of macrophages, etc. From this results, we can infer the possible radiation hazard on the ovary of cervix cancer patient with radiation therapy.
In order to observe the bioactivity of ovariectomized rats, nonovariertoized (sham) group, ovariectomized (Ovx) group, ovariectomized ginseng total saponin (GTS)-treated (Ovx+ GTS) group and ovariectomized ginseng water extract (GW)-treated (Ovx+CW) group were made. We measured AST (L-aspartate aminotransferase) and ALT (L-alanin aminotransferase) in sera, and MDA (malondialdehyde:lipid peroxidation), SOD (superoxide dismutase), catalase, total-glutathione (GSH + GSSG) and GPx (glutathione peroxidase) in liver tissue total homogenates of rat. AST activity of serum in Ovx group was 2.11 times increased, but ALT activity was not changed compared to Sham group. In AST activity, they tend to decrease significantly in each substance such as GTS and GW administered group. Lipidperoxides of each fraction in Ovx group were highly increased compared to Sham group. Extracts of ginseng-treated group markedly inhibited lipid peroxidation by 62% ∼72%. And as the result of the measurements of SOD, catalase, total-glutathione and GPx which are antioxidant enzyme, antioxidant enzymes in Ovx group much lower than in Sham group. But they were significantly increased in each substance such as GTS and GW, administered group. Based on the results, it is supposed that more produced free radicals decreased antioxidant enzyme. And it is also thought that extracts of ginseng can inhibit aging by reducing antioxidant enzyme.
This research investigated morphological changes of ovarian follicle according to dose of irradiation when adult mice were exposed to X-rays from 6 MeV LINAC. At day 3 after irradiation of 200 cGy, 400 cGy and 600 cGy X-ray to the hole body of mice, the ovaries collected and stained with TUNEL. The normal follicles and atretic follicles were identified to apoptosis by the staining with TUNEL. In the atretic follicles of the normal ovary, the apoptotic bodies were well appeared and stained brown color. Almost of the follicles following irradiation are stained with TUNEL, but the sensitivity of reaction is weaker than that in irradiation of 400 cGy and 600 cGy X-ray. The granulosa cells of the radiated normal follicle by 400 cGV are shown brown color. In this stage, the nucleus of granulosa cells in the atrectic follicles are condensed and picknotic feature. The size of the radiated follicle by 600 cGy are decreased than the normal follicles. The atropic follicles are filled with apoptotic bodies which change of granulosa cells and theca cells by influence of X-ray. All of cell in the follicles are strongly positive stained with TUNEL by irradiation of 600 cGy.
The ovarian hormone-deficiency induced ovariectomy rat is widely used as an aging model due to its practicality, convenience, and cost effectiveness. The surgically ovariectomized rat induces reactive oxygen species (ROS) generation like aging phenomena. Free oxygen radicals have been proposed as important causative agents of aging. The purpose of this study was to investigate the effect of chondroitin sulfate (CS) to prevent ovariectomy (OVX)-induced oxidative stress. The OVX rats were given intraperitoneally CS at doses of 100 mg/kg and 200 mg/kg daily for fifteen weeks. Malondialdehyde (MDA) levels were determined as well as the activities of superoxide dismutase (SOD), catalase (CAT), reduced-glutathione (GSH), oxidized-glutathione (GSSG), glutathione peroxidase (GPx) in the liver. The liver antioxidative enzyme activity was elevated while MDA concentration decreased in all CS treated animals. The results demonstrated that CS reduced oxidative stress in a dose dependent manner. These results suggest that CS might be a useful candidate for antioxidative reagent.
돼지 난포의 폐쇄기 작을 규명하고 폐쇄난포의 판정기준을 보완, 확립하기 위하여 난포의 크기 및 상태 그리고 난소주기에 따라 Acid phosphatase(Acpase)의 활성부위와 활성도를 조사하였다. Acpase의 활성부위는 과립세포와 난포막내층이었고, 반응정도는 난포 :극 대난포와 중난포의 경우 정상군에 비해 폐쇄군에서 강한 반응을 보였다. 황체기난포의 과립세포에서는 중난포와 소난포 모두 반응이 미약하였고, 난포막층에서는 정상군과 폐쇄군 모두 강하게 나타났다. Acpase의 활성도는 난포기 난포의 과립세포에서 난포가 커짐에 따라 증가하였는데 난포막층의 활성도는 감소하였으며 , 폐쇄군이 높은 활성도를 보f:다. 황체기의 경우 반포기와는 달리 과립세포와 난포막층에서 난포가 커짐에 따라 활성도는 감소하였으나 폐쇄군은 역시 높았다. 이상의 결과에서 폐쇄난포의 Acpase의 활성부위와 활성도는 정상난포에 비하여 뚜렷하고 강하여서 이 방법은 폐쇄의 판정기준으로 이용 가능한 것으로 사료된다. 또한 난소주기에 따라 상이한 결과를 나타낸 것은 폐쇄기 작이 서로 다름을 시사하였다.
The objective of this study was to assess the complications of titanium clip application after ovariohysterectomy (OHE) and find the proper surgical technique to minimize the complications by comparing the ligation method of ovarian pedicle. Six female beagle dogs were used for this study and they were divided randomly into two groups by ligation techniques: ligation and non-ligation of the suspensory ligament of ovary including ovarian pedicle. To evaluate the difference between two techniques, the location and embedded pattern of applied clips in the abdominal cavity were identified through radiographic tests and autopsy. Hematology tests were also performed to check the existence of inflammation by applied clips and all tests were carried out monthly for 1 year. There were few changes in location of clips of both groups on X-ray views without any migration. Almost all values in hematology of two groups were within the normal range and there were no inflammatory symptoms. All of applied clips in two groups were found near the kidney, but the embedded forms of them showed slight differences. The clips ligating suspensory ligament and ovarian pedicle were located in deep place and thickly surrounded with thin layers of peritoneum. But the clips ligating only ovarian pedicle were found with ease on surface of layer and located in lower place compared with the clips ligating suspensory ligament. These results indicate that the suspensory ligament holds applied clips and minimizes the movement of them. Therefore, ligation of suspensory ligament would be the preferred technique in titanium clip application for OHE.
This study was investigated the improvement effects of Ledebouriella seseloides (LS) ethanol extracts on lipid parameters in an ovariectomized animal model. Sixty, nine-week old female Sprague Dawley rats were randomly assigned to four groups as follows: sham-operated rats (SHAM), ovariectomized rats (OVX-CON) and ovariectomized rats that were treated with LS ethanol extracts (50 mg/kg/day and 200 mg/kg/day, respectively). The diets were fed to the rats for six weeks after their operation. The total-cholesterol and triglyceride contents on serum increased in the OVX-CON group compared to the SHAM group, but supplementation with the LS extract caused these factors to decrease. Notably, the serum LDL-cholesterol concentration in the supplemented 200 mg/kg/day LS ethanol extract group was significantly more reduced than the OVX-CON group. In addition, the platelet aggregation ability was lower in groups treated with LS than in the OVX-CON group. The alkaline phosphatase (ALP) activity was lower in the LS extract group compared to the OVX-CON group. Collagen content, in bone and cartilage, were reduced by ovariectomy, but the supplemented LS extract groups exhibited higher concentrations in their bones. According to these results, the improvement effects of LS extract on serum lipid parameters and osteogenesis in ovariectomized rats were illuminated.
본 연구는 개의 불임해결과 체외수정란을 생산할 목적으로 난소의 보존 및 난구세포의 부착 여부가 신선 및 동결 개 정자를 이용한 투명대 반응에 미치는 영향을 조사하였다. 1. 적출한 난소를 4$^{\circ}C$ 와 salt에 각각 48시간 보존 후 회수한 난구세포 부착 난자와 나화난자의 정자침입율은 각각 62.5%, 37.5% 및 42.5% 및 22.4%로서 난소를 적출 후 곧 바로 회수한 난구세포 부착 및 나화난자 내 정자침입율인 93.3%와 56.7%에 비해 현저히 낮게 나타났다. 2. 적출한 난소를 4$^{\circ}C$ 에 각각 4시간, 14시간 및 48시간 보존 후 회수한 난구세포부착 난자의 정자침입율은 각각 92.5%, 90.0%, 85.0%로서 신선 난소 난자의 정자침입율 93.3%에 비해 유사하거나 약간 낮게 나타났다. 3. 적출한 난소를 salt에 각각 4시간, 14시간 및 48시간 보존 후 회수한 난구세포부착 난자의 정자침입율은 각각 85.0%, 77.5%, 72.5%로서 신선난소로부터 회수한 난자의 정자침입율 93.3%에 비해 낮게 나타났다. 4. 적출한 난소를 4$^{\circ}C$ 와 salt에 각각 24시간 보존 후 회수한 난구세포부착 난자의 체외수정율과 체외발생율은 각각 50.0%, 22.5% 및 40.0%, 15.0%로서 신선난소로부터 회수한 난구세포부착 난자의 체외수정율과 체외발생율 72.5%와 32.5%에 비해 낮게 나타났다.
This research investigated the morphological changes of folliculus ovary according to the dose of the X-rays when mice were exposed to X-rays, in terms of histochemical reaction. Dyeing methods such as Masson's trichrome method and reticular fiber method were used. The morphological changes of growing folliculus ovary got distinct as the dose of X-rays increased. Especially, the nuclei of granular cells showed manifest condensation and the changes of the transparent zone were distinct. As a result of histochemical reaction according to Masson's trichrome method and reticular fiber method, the changed granular cells, the deformed basilar membrane of folliculus ovary and the abnormal arrangement of the reticular fiber were observed.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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