As a part of agricultural utilization of charcoal and pyroligneous acid, the effect of wood carbonization products on the growth of red pepper and soil microorganisms was investigated. The treatment of charcoal and pyroligneous acid provided good growth conditions to microorganisms through neutralizing soil acidity and improving the physicochemical properties of soil. Therefore the density of useful microorganism in the soil has been increased. In the growth of red pepper, the length, diameter, and the fruit numbers of red pepper have been increased by treating with wood carbonization products. It was especially shown that yield has increased about 50% in the fruit number, by treating charcoal 1kg, 1000 time-diluted solution of pyroligneous acid and bacteria, compared with the control. It was estimated that increasing the length of seedling and the diameter of red pepper stem contributed to the resistance against the prerequisites of various environmental changes in open field. Therefore, the final yield would be increased. In the antagonism experiment of red pepper mold (Colletotrichum gloeosporioides), the mold became extinct in the 2- and 10-time diluted solution of pyroligneous acid, compared with the control. On the other hand, their growth speed was delayed in the 100- and 1000 time-diluted solution.
The aim of this study was to isolate a potential multifunctional biocontrol agent from bacteria for control of multiple plant diseases as an alternative to fungicides. A total of 201 strains were isolated from soil undamaged by repeated cultivation in Sunchang and their ability to produce antibiotics, siderophores and extracellular enzymes such as protease, cellulase and amylase was investigated. Selected strain SCS3 produced cellulose, protease and amylase. This strain also produced siderophores and showed excellent antifungal activity against various phytopathogens. SCS3 was identified as Bacillus subtilis using 16S rRNA sequencing, and named Bacillus subtilis SCS3. Finally, physiological and biochemical characteristics of B. subtilis SCS3 were examined. From the results, B. subtilis SCS3 was found to be a useful multifunctional biocontrol agent against various phytopathogens.
Park, Soo-Young;Yang, Sung-Hyun;Choi, Soo-Keun;Kim, Ji-Hyeon;Kim, Jong-Guk;Park, Seung-Hwan
Microbiology and Biotechnology Letters
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v.35
no.1
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pp.1-10
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2007
The 44 endophytic bacterial strains were isolated from surface-sterilized root of rice cultivated in seven different locations of Chungcheong province, Korea. Each isolate was introduced into rice seedlings grown gnotobiotically by inoculating scissor-cut first true leaf with cell suspensions, and the colonization capacity of each isolate in root tissue was analyzed at 7 days after inoculation. Sixteen out of 44 isolates were re-isolated from root successfully with the frequency of $10^{3-5}$ CFU/g tissue. Interestingly, seven out of 16 isolates were identified as Burkholderia species. The identity between inoculated strains and re-isolates was confirmed by genomic finger-printing and 16S rDNA sequence analysis. By a confocal laser scanning microscopic observation it was revealed that KJ001 strain, one of the sixteen isolates tagged with gfp colonized in root tissue especially around xylem. Six out of seven Burkholderia strains obtained in this study showed antagonizing activities against seven different fungal pathogens, contain nifH gene, and five of them enhanced growth of cucumber over 30%. The isolates showed no hypersensitive response on tobacco leaves and no pathogenecity in rice. From these results it was found that the endophytic Burkholderia strains will be useful in agriculture to develop a biocontrol agent or a bio-fertilizer.
An antagonistic bacterial isolate, that inhibits the growth of plant pathogens, was selected and identified from 5,000 isolates screened from the rhizosphere of various crop plants. An isolate Bacillus sp. N32, tested against Colletotrichum gloeosporioides causing anthracnose disease in hot pepper, produced both a heat resistant antifungal protein and a heat sensitive antifungal protein. The heat resistant protein was partially purified by Ammonium sulfate fractionation and gel filtration chromatography. The bioautography showed that the proteins possessed high antifungal activity. The biosynthetic gene cluster responsible for the heat resistant antifungal protein was cloned from cosmid library using DNA probe obtained from PCR product with the primers targeting the conserved nucleotide sequence of the synthetic genes reported earlier, Most of the clones obtained showed higher homology to fengycin antibiotic synthetic gene family reported earlier. On the other hand, the heat sensitive protein was isolated from SDS-PAGE and electroblotting to determine the N-terminal amino acid sequences. The heat sensitive antifungal protein gene was cloned from the ${\lambda}-ZAP$ libraries using a DNA probe based on the N-terminal amino acid sequences of the heat sensitive protein. We are contemplating to clone and sequence the whole gene cluster encoding the heat sensitive protein for further analysis.
As part of our search for less toxic antimicrobial agents from natural resources, the antimicrobial activity of Elfvingia applanata $(P_{ers.})\;K_{arst.}$ extract was examined alone and in combination with naringenin. EA, the aqueous extract from the carpophores of E. applanata, was lyophilized and a dark brownish powder was obtained. Antimicrobial activity of EA was tested in vitro against nineteen strains of bacteria and eleven strains of fungi by serial broth dilution method, and expressed by minimal inhibitory concentration (MIC). Among nineteen strains of bacteria tested, the antimicrobial activity of EA was the most potent against Proteus vulgaris showing MIC of 1.125 mg/ml. EA also inhibited the growth of the selected fungi at higher concentrations ranging from 7.5 mg/ml to 15.0 mg/ml. To investigate the effect of antimicrobial combinations of EA with naringenin, the fractional inhibitory concentration index (FICI) was determined by checkerboard assay for each strain. The antimicrobial combinations of EA with naringenin resulted in partial synergism against Staphylococcus aureus only, and showed additive effect in two strains including Klebsiella pneumoniae and Salmonella typhi. Antagonism was not found.
Ja-Yoon Kim;Se-Hyun Park;Seong-Joon Park;Ju-Hyeong Hwang Bo;Hee-Wan Kang
Journal of Mushroom
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v.21
no.3
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pp.140-144
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2023
The objective of this study was to achieve biological control of green mold disease in Pyogo mushrooms using antagonistic microorganisms. Bacillus subtilis BSM320 cells inhibited mycelial growth by 48-60% against three Trichodermaisolates including T. hazianumisolated from the substrates of Lentinula edodes, showing their antifungal activity.The bacteria were cultured to a high density of 4.2 × 109±113.7 cfu/mlin aqueous extract of composted spent mushroom substrates of L. edodes containing 1% glucose and showed a higher growth rate than that observed when using the commercial medium, Luria-Bertani broth. The bacterial culture showed a 75% protective effect without damaging the mushroom fruiting bodies. These results suggest that B. subtilis BSM320culture is suitable for biological control of green mold disease during mushroom cultivation.
Several antagonistic bacteria, SD-1, 4, 10, 11, 14, 15, and 16, which have strong CMCase and amylase activities, were isolated from the fermented mushroom media. Among them, SD-1, 10, 11, and 15 have strong antibacterial activities against the mushroom pathogenic bacteria Pseudomonas sp., and SD-1, 10, 11, 14, and 16 have strong antifungal activities against the mushroom pathogenic fungi, Trichoderma sp. SD-14, 15, and 16 did not inhibit the growth of mushroom Pleurotus eryngii ASI-2302, and Pleurotus ostreatus ASI-2042 and ASI-2180. When the culture broth mixture of the seven bacterial strains was applied to the mushroom media, the growths of pathogens, Pseudomonas sp. and Trichoderma sp., were inhibited.
Lee, Sang Yeob;Weon, Hang Yeon;Kim, Jeong Jun;Han, Ji Hee;Kim, Wan Gyu
The Korean Journal of Pesticide Science
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v.17
no.4
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pp.435-439
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2013
Bacillus amyloliquefaciens M27 was selected as a control agent for the biological control of cucumber powdery mildew. The new mixture of B.amyloliquefaciens M27 and plant (Eucalytus) extract was developed to improve the control activity of B.amyloliquefaciens M27 against cucumber powdery mildew. The mixed formulation showed the high preventive and curative control effect against cucumber powdery mildew when it was diluted at 500 times and foliar-sprayed. Its control effect was higher in preventive spraying than curative spraying. When 500-fold diluted solution of the formulation was sprayed preventively four times at five-day intervals, three times at seven-day intervals and twice at ten-day intervals, the diseased leaf area was shown to be 4.4%, 8.0%, 27.9%, respectively; Whereas the diseased leaf area in the control plot was 45.4%. When the 500-fold diluted formulation was sprayed curatively four times at five-day intervals, three times at seven-day intervals and twice at ten-day intervals after occurred cucumber powdery mildew, the diseases leaf area was 11.5%, 25.2%, 51.8%, respectively; whereas in the control plot, the diseases leaf area was 64.3%. When the 500-fold diluted formulation was treated four times at five-day intervals in the plastic house, its control effect was higher than that treated three times at seven-day intervals and twice at ten-day intervals. As the results, the mixed formulation of B.amyloliquefaciens M27 and plant extract could be a promising candidate of bio-fungicides for the environment-friendly control of powdery mildew of cucumber.
The separation of the bacteria inhibiting Trichoderma sp. mold, the strain causing blue mold disease that occurs frequently when cultivating mushroom while carrying out the efficient fermentation of mushroom medium, from the growth was done. In about 200 strains isolated primarily from fungus garden samples, 6 strains were secondly isolated, which had fast growth rates and a clear zone on the plate medium of SM, AM, and CM. Among the 6 strains isolated, the C-1 strain showed high enzymatic activity of cellulase, amylase, and protease, and strong antibacterial activity for the T. virens and T. harzianum, selected finally. The selected C-1 strain was identified as Paenibacillus polymyxaby the result of the identification by Bergey's Manual of Systematic Bacteriology and the analysis of the nucleotide sequence of 16S rRNA, and named as P. polymyxa CK-1. In reviewing the growth conditions of the P. polymyxa CK-1 strain, the optimum cultivation temperature was $45^{\circ}C$, and the optimum pH for growth was in the range of 6.0~7.0. Appropriate incubation time of P. polymyxa CK-1 for the growth inhibition of the fungus T. virens and T. harzianum was 22 to 36 hours. And the fungal growth was not observed, even when leaving two molds inoculated on each petri dishes, which were treated with 24 hour culture solution of P. polymyxa CK-1 strain for 10 days. As a result of studying the thermal stability of the antagonists produced by the P. polymyxa CK-1 strain, no mycelial growth of the two fungi was observed in the test group treated for 20 minutes at $60^{\circ}C$ and $100^{\circ}C$, but mycelial growth was slightly observed in the test group treated for 20 minutes at $121^{\circ}C$. As aresult of reviewing the impact of the P. polymyxa CK-1 culture medium on mushroom mycelial growth, it showed no effect on a variety of mushroom mycelial growth including enoki mushroom and shiitake mushroom.
Actinomycetes produce diverse secondary metabolites which have the primary importance in medicine, agriculture and food production, and key to this is their ability to interact with other organisms in natural habitats. In this study, we have investigated the taxonomical and functional diversity of actinomycetes in fecal sample of rhinoceros beetle larvae (Allomyrina dichotoma L.) by using culture-dependent and -independent approaches. For the culture-independent approach, the community DNA was extracted from the sample and 16S rRNA genes of actinomycetes were amplified using actinomycetes-specific PCR primers. Thirty-seven clones were classified into 15 genera and 24 species of actinomycetes. For the culture-dependent approach, 53 strains were isolated from larval feces, of which 27 isolates were selected based on morphological characteristics. The isolates were classified into 4 genera and 14 species, and 24 isolates (89%) were identified as the genus Streptomyces. Many of the representative isolates had antimicrobial activities against plant pathogenic fungi and Gram-positive bacteria. In addition, most of the isolates (78%) showed biochemical properties to hydrolyze cellulose and casein. The results demonstrated that diverse and valuable actinomycetes could be isolated from insect fecal samples, indicating that insect guts can be rich sources for novel bioactive compounds.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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