Several bacterial strains utilizing crude oil as their sole carbon and energy source were isolated from marine environment polluted by crude oil. Among them, the selected strain 4A3 showed strong degradation activity for crude oil. This strain was identified as a Provindencia rettgeri 4A3 based on the morphological, biochemical, and physiological characteristics. The optimum cultural conditions was as follows; 26$^{\circ}C$ for temperature and 7.0 for initial pH. Additionally, the optimal concentration of sodium chloride was 2.0%, indicating that this strain was derived from sea water. The emulsifying activity of 4A3 was the highest after 3 days of cultivation under the condition of 2.0% sodium chloride, pH 7.0 and 26$^{\circ}C$. This strain had one cryptic plasmid in 7.0kb size.
New strain needs to maintain desirable characteristics for long term when it was bred, but in lapse of time it degenerates into a bad condition. Therefore the influence of temperature on the viability and survival rates of Lentinula edodes strains were examined after cryopreservation. Also, liquid nitrogen preservation for L. edodes has been proved to be one of the most reliable method. However, a mechanical damage of strain is inevitable during cryopreservation of the fungus because the fungus is very sensitive to stress of cooling rate in the freezing process. So we tried to find out state change of L. edodes with a programmable freezer. L. edodes strains were preserved at $-20^{\circ}C$, $-80^{\circ}C$ and $-196^{\circ}C$ for 50 days. At $-20^{\circ}C$, its mycelial growth became extinct. When thawed, the growth of mycelia which were preserved at $-80^{\circ}C$ was fastest. Attempts were made to investigate viability of L. edodes strains after freezing at $-80^{\circ}C$ and $-196^{\circ}C$, respectively. As the result, more than 90% showed high survival rate of strains tested at $-80^{\circ}C$ and $-196^{\circ}C$. Mycelial growth between apical and basal parts of colony after freezing preservation for 50 days was compared. At apical and basal parts, the survival rates showed 100% at $-80^{\circ}C$, but 98% and 94% at $-196^{\circ}C$, respectively. We confirmed that the ice crystal formation temperatures of L. edodes strains were $-6.0^{\circ}C$ for Sanlim 1, $-5.5^{\circ}C$ for the Sanlim 2, $-4.0^{\circ}C$ for the Sanlim 3 and $-15.5^{\circ}C$ for the Sanzo 302. These results indicated that L. edodes strains showed completely different responses to the ice crystal formation. We knew the fact that even the same species, especially L. edodes, they displayed completely different responses to the same freezing condition. Also, this has nothing to do with the connection between temperature type and freezing point. And a protocol was tried to minimize state change of L. edodes strains using programmable freezer when they are frozen, but it was not effective on them.
Xun, Zhao;Peter L., Rogers;Kwon, Eilhann E.;Jeong, Sang Chul;Jeon, Young Jae
Journal of Life Science
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v.25
no.11
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pp.1290-1297
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2015
Studies of the inactivation of a gene encoding pyruvate decarboxylase, pdc, in an ethanol-producing bacterium, Zymomonas mobilis, identified a mutant strain with 50% reduced PDC activity. To evaluate the possibility of a carbon-flux shift from an ethanol pathway toward higher value fermentation products, including pyruvate, succinate, and lactate, fermentation studies were carried out. Despite attempts to silence pdc expression in the wild-type strain ZM4 using cat-inserted pdc and pdc-deleted homologs by electroporation, the strain isolated showed partial gene activation. Fermentation experiments with the PDC mutant strain showed that the reduced expression level of PDC activity resulted in decreased rates of substrate uptake and ethanol production, together with increased pyruvate accumulation of 2.5 g l-1 , although lactate and succinate concentrations were not significantly enhanced in these modified strains. Despite numerous attempts, no strains were isolated in which complete pdc inactivation occurred. This result indicates that the ethanol fermentation pathway of this bacterium is totally dependent on the activity of the PDC enzyme. To ensure a redox balance of intracellular NAD and NADH levels, other enzymes, such as lactate dehydrogenase for lactate, and enzymes involved in the production of succinic acid, such as pyruvate dehydrogenase (PDH) and malic enzymes, may be needed for their increased end-product production.
In order to study optimum culture condition of yeast medium added deep seawater, we examed samples with 9 yeast strains. The growth rate were measured for Saccharomyces cerevisiae 10, 11, 12, 901 and RCY and Saccharomyces kluyvery DJ97, Saccharomyces cerevisiae YJK, JK99, CMY-28 etc.. The growth of S. cerevisiae 12 was found most active in the deep seawater(hardness 500). The growth rate of S. cerevisiae 901 on medium containing deep seawater(hardness 1000) was faster than that of the yeast on medium without deep seawater. The use of deep seawater on the growth of Sacch.cerevisiae kluyvery DJ97 revealed maximum growth under the condition of hardness 200 of deep seawater and 10% of sugar concentration.
The Leuconostoc paramesenteroides dominated at refrigeration temperature range was isolated from kimchi, and improved its growth properties by mutation for competitive growth against Lactobacillus plantarum at lower pH. It was found that the minimal pH for the wild type Leuconostoc paramesenteroides Pw growth was pH 4.5 adjusted with HCI and pH 5.0 adjusted with organic-mixture (lactic acid:acetic acid=1:2), respectively. The mutant P-100 could grow in pH 4.0, 4.5, respectively, in MRS broth. Two strains Pw and P-100 were added into kimchi as starter and compared the quality characteristics of kimchi. The total acceptability of Pw and P-100 inoculated kimchi were evaluated better than that of control kimchi (no starter added) by sensory test and extended the optimal pH range of kimchi up to about 2.2, 2.5 times, respectively. In kimchi added P-100, the succinic acid was more abundant than others and the total number of Lactobacillus plantarum was down about 2.5 times in contrast to control kimchi.
Seventy two isolates of Cordyceps militaris collected from 11 sites in Korea, including two isolates from ATCC, were used to assess genetic variation within Cordyceps militaris. The anamorph stage and cultural characteristics of C. militaris were observed through microscope and investigated on PDA respectively. The anamorphs of C. militaris were identified to be Verticillium. Isolates of C. militaris showed different growth rates, morphology and color. Fifty six isolates of single ascospore and seventy two isolates of mass ascospore from C. militaris were analysed using by Random Amplified Polymorphic DNA (RAPD) for genetic relationship analysis. Fifty six single ascospore isolates fell into two groups by phenogram constructed from distance values using the UPGMA method in NTSYS-pc software: group A from artificial fruit body of C18 except for isolate 51; group B from artificial fruit body of C738. The average genetic distance value within group A is 0.150 and group B is 0.163. The average genetic distance value between the two groups is 0.221. The average genetic distance value within 56 single ascospores is 0.207 and 72 mass ascospores is 0.330. Genetic relationships were not found among 72 mass ascospore isolates obtained from eleven geographically distant populations.
In order to investigate the ability of log wood for oak mushroom production as a source of an alternative energy, both chemical and physical characteristics of log wood were investigated according to the cultivation periods. Also, both chemical and physical characteristics of material that treated by steam explosion were investigated to confirm the pretreatment effect by remaining enzyme as a control. The contents of ash, water-, alkali- and organic soluble extracts have been increased after the inoculation. It appeard that holocellulose contents substantially decreased and the contents of lignin as another main component of wood remained constant after the inoculation. However this result implied that indeed, a sufficient amount of lignin has been degraded paritially by enzymes of oak mushroom Lentinus edodes if we consider that the amount of holocelulose was substantially reduced. It also indicated that the degree of degradation gradually progressed but crystallinity decreased after the inoculation. The contents of water-, alkali- and organic soluble extracts have been increased by steam explosion. Holocellulose contents increased within narrow limits and lignin contents remained constant. However the contents of holocellulose and lignin have been decreased by steam explosion, considering that the amount of other extractives was relatively increased. The degree of crystallinity and lignin contents reduction by steam explosion was almost similar to the result obtained by increasing cultivation periods. According to the results, log woods for mushroom production have a potential as material for developing alternative energy.
To investigate the population dynamics and survival of Genus Vibrio, population densities of aerobic saprophytic bacteria and Vibrio groups were measured 4 times in the intertidal waters of the Yellow Sea near Kunsan from November, 1997 to June, 1998. The distribution of heterotrophic bacteria during the survey periods by plate count and direct count method ranged from 1.2$\pm$0.6$\times$10$^3$~2.0$\pm$1.5$\times$10$^4$CFU ml$^1$and from 6.0$\pm$4.0$\times$10$^{5}$ ~1.9$\pm$1.5$\times$10$^{7}$ cells ml$^1$, respectively. Vibrio groups were distributed in the range of 1$\times$10 and 6$\pm$2.2$\times$10$^2$CFU ml$^1$. The proportion of Vibrio groups to total heterotrophic bacteria was between 0.1 and 6% during the survey periods. A total of 51 isolates was obtained from TCBS agar plates and identified to species level by Biolog Identification System$^{TM}$. As a result, dominant genera were V, mediterranei, V aitguillarum, tr metschnikovii, and V. parahaemolyticus, and isolates were clustered into 26 groups based on the relatedness of average linkage clustering method at 70% level. As for the susceptibility of 51 isolates to 7 kinds of antibacterial agents (gentamicin, ampicillin, chlorarnphenicol, streptomycin, kanamycin, tetracycline, carbenicillin), 96% of isolates showed high resistance to more than one antibiotics and 65% of isolates contained a plasmid, of which size was observed greater than 12 kb, The number of cells of 3 tested strains (V. anguillarum, V. vulnificus, and V. metschnikovii) in filtered aged seawater decreased by approximately 1 to 5 orders of magnitude during 30-d incubation. In most cases, the numbers of cells decreased rapidly until day 3, then decreased slowly by day 30. The number of cells incubated at 15$^{\circ}C$ showed higher survival than those at 4$^{\circ}C$ and $25^{\circ}C$. These results may be considered for the basic supporting data in the risk assessment of vibriosis in summer.r.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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