• Title/Summary/Keyword: 귀세포

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귀전우(鬼箭羽)의 인간 자궁근종 세포에서 미토콘드리아 경로를 통한 산화제로서 apoptosis 유도작용에 관한 연구 (A study of apoptosis induction of Euonymus alatus (Thunb.) Sieb via mitochondrial pathway prooxidant in leiomyomal smooth muscle cells)

  • 권차남;이태균;김동일
    • 대한한방부인과학회지
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    • 제18권3호
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    • pp.67-76
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    • 2005
  • Purpose : 귀전우(Euonymus alatus, EA)는 현재까지 항종양활성을 나타낸다고 보고되었지만 그 작용 메커니즘에 대해서는 아직 밝혀지지 않은 채 남아 있다. 본 연구에서는, 자궁근종세포(ULSMC)에서 EA의 분자적 수준에서의 작용메커니즘을 연구${\cdot}$검토하고자 하였다. Methods : EA의 열수추출액이 자궁근종세포(ULSMC)와 caspase-3 pretense의 활성도에 미치는 영향을 측정하였다. Results : 우리는 자궁근종에서 EA 유도 세포독성의 메커니즘을 검토하였는바, 근종 세포들은 20-200g/ml 농도의 EA추출물에 6시간 배양될 때, caspase-3가 활성화되고, 그때 세포들은 apoptosis를 유발하게 되었다. EA에 의한 apoptosis의 유도가 진행되었으며, cytochrome- c의 세포질분획에서 양적증가가 caspase-3의 활성보다도 우세하였다. GSH합성의 저해제인 5mM buthionine용액에 전처리는 EA유도 apoptosis를 용이하게 하지만 pan-caspase inhibitor인 Z-VAD-fmk용액 전 처리는 부분적으로 apoptosis유도를 억제하였다. 한편, EA는 건강한 지원자들로 부터 채취한 말초혈액 단핵세포들에 있어서는 독성의 효과는 없었다. Conclusion : 이들 결과들은 EA가 prooxidant로 작용을 하고 그리고 caspase-3 activation과 mitochondrial pathway를 경유하는 apoptosis를 유발한다는 것을 나타낸다. EA의 탕제약제로서 열수추출액이 항산화활성뿐만 아니라, 종양세포에 대한 세포독성효과를 나타낸다고 보고된 바, 이에 향후 근종치료에 대한 임상연구가 필요할 것으로 보인다.

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한우의 귀세포와 태아섬유아세포의 융합 방법과 Passage 배양이 복제수정란의 발달에 미치는 영향 (Effect of Fusion Method and Passage Culture of Hanwoo (Korean Cattle) Ear Skin and Fetal Fibroblasts on the Development of Nuclear Transfer Embryos)

  • 양병철;임기순;이상기;김세웅;김동훈;성환후;양보석
    • Reproductive and Developmental Biology
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    • 제30권1호
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    • pp.53-58
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    • 2006
  • 본 연구는 한우 성체 유래 귀세포(Korean bovine ear skin fibroblasts, KbESF)와 태아 섬유아세포(Korean bovine fetal fibroblasts, KbFF)를 이용한 체세포 복제(SCNT) 시 세포종류, 배양기간 그리고 융합방법이 핵이식 수정란의 발달에 미치는 영향을 알아보기 위하여 실시하였다. 태아 섬유아세포는 임신 51일령의 한우태아에서 분리하였고, 귀세포는 28개월령의 성우의 귀에서 채취하였다. 세포는 15주 동안 체외에서 배양하며 체세포 핵이식(SCNT)에 공시하였다. 융합방법을 비교하기 위해 챔버방법과 전극 바늘을 이용한 방법으로 핵과 세포질을 융합하였다. 세포의 doubling time은 KbFF에서 17.3시간, KbESF에서 24.3시간으로 나타났다. 핵이식 후 융합과 분할율은 needle 방법에서 보다 유의적으로 높았으나(각 각 76.1과 81.2%, P<0.05), 배반포 발달율은 차이가 없었다. KbESF의 경우, 배반포 발달율은 passage $5{\sim}9$(39.4%)와 $13{\sim}15$(40.4%)에서 passage $1{\sim}4$에 비하여 유의적으로 높았다(P<0.05). KbFF의 경우, 융합율은 passage $5{\sim}8$$13{\sim}15$에서 각각 75.0 및 76.8%로 passage $1{\sim}4$(61.5%)보다 높았으나, 난분할율과 배반포 발달율은 차이가 없었다. 결론적으로, SCNT 수정란의 발달은 융합 방법에 의해 영향을 받을 수 있으나, 계대배양 15회까지 장기배양을 한 경우는 복제수정란의 발육에 영향을 주지 않는 것으로 판단된다.

미역귀에서 추출한 알긴산의 항산화 효과 및 항염증효과 (Antioxidant Activity and Anti-inflammatory Effect of Alginic Acid from Sea Mustard Sporophyll)

  • 고영우;진성우;김경제;임승빈;하늘이;정희경;제해신;반승언;정상욱;서경순
    • 한국자원식물학회:학술대회논문집
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    • 한국자원식물학회 2018년도 춘계학술발표회
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    • pp.78-78
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    • 2018
  • 미역은 갈조식물인 미역과에 속하는 1년생 바닷말로서 주로 어린 줄기와 잎부분을 식용으로 한다. 폐기부로 분류되는 미역귀 부분 또한 가식부 이상으로 풍부한 미네랄과 알긴산을 함유하고 있으며 이를 이용한 건강 친화적인 슬라이스 잼의 개발을 목적으로 연구를 수행하였다. 제품 개발의 소재화를 위한 연구의 일환으로 미역귀 알긴산 추출, 알긴산의 항산화활성(DPPH, ABTS, SOD 유사활성, total polyphenol, 세포 독성, NO생성 억제능을 수행한 바는 아래와 같다. 미역귀 알긴산 추출물을 각각 10, 50, 100, $500{\mu}g/mL$의 농도로 처리한 시험구들의 전자공여능을 확인한 결과 각각 2.8, 27.5, 35.9, 43.4%로 나타났으며, ABTS 라디칼 소거능은 각각 4.2, 21.6, 33.4, 67.4%로 나타났다. 동일한 농도로 처리하였을 때 SOD 유사활성은 각각 9.2, 12.4, 23.2, 30.8%로 나타났다. 미역귀 알긴산 추출물의 total polyphenol은 $19.16{\pm}0.08mg%$로 확인되었다. 세포생존율은 10, 50, 100, $500{\mu}g/mL$의 농도로 처리하였을 때 118.8%, 120.7%, 121.1%, 124.9%로 나타났다. NO생성 억제능을 동일한 농도에서 확인한 결과 각각 3.1, 5.1, 7.9, 9.6%로 확인되었다. 본 연구결과 미역귀 알긴산 추출물은 항산화능이 탁월하게 나타나 건강 친화적인 기능성 소재로 활용도가 높을 것으로 기대된다.

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전통한우(칡소)의 귀세포를 이용한 핵이식에서 전기융합 조건이 핵이식 수정란의 발달에 미치는 영향

  • 최은주;이호준;김기수;윤종택
    • 한국동물번식학회:학술대회논문집
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    • 한국동물번식학회 2001년도 춘계학술발표대회
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    • pp.67-67
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    • 2001
  • 전기자극은 핵이식 시 수핵난자와 공여핵의 융합을 위해 보편적으로 사용되는 방법이다(Robl, 1999). 그러나 부적절한 전기자극은 수핵난자 세포질에 해를 입히고, 이후의 배발달에 좋지 않은 영향을 준다. 본 실험은 체세포 핵이식을 \circled1 1.9㎸/cm, 20$\mu\textrm{s}$ 2회, \circled22.0㎸/cm, 20$\mu\textrm{s}$ 2회, \circled32.2㎸/cm, 10$\mu\textrm{s}$ 2회, 및 \circled41.9㎸/cm, 30$\mu\textrm{s}$ 2회의 전기자극으로 융합을 실시하여 각 자극 별 융합율과 난자의 lysis율을 비교하고, 배양 후 배반포 발생율을 조사하였다. 공여핵은 칡소의 귀 세포를 10% FBS가 첨가된 DMEM에서 39$^{\circ}C$, 5%$CO_2$의 incubator에서 배양하여 monolayer confluent형성 후 0.5% FBS가 첨가된 DMEM에서 3-4일간 배양 후 trypsin처리하여 제핵된 체외성숙 난자에 핵이식하였다. \circled1,\circled2,\circled3,\circled4의 핵이식 조건을 이용하여 공여핵의 체세포와 수핵란 세포질간의 융합을 유도한 결과, 융합율은 각각 50.7%, 48.1%, 65.5%, 및 33.3%였으며, 수핵난자의 세포질 lysis율은 39.%1, 41.7%, 22.6%,및 52.7%으로 \circled32.2㎸/cm, 10$\mu\textrm{s}$ 2회의 조건에서 융합율이 유의적으로 높았고, 수핵난자의 세포질 lysis율에 있어서도 다른 군에 비하여 낮았다 각각의 핵이식 조건별로 융합한 후 난할율 및 배반포 발생율은 각각 65.7%, 73.5%, 77.2%, 및 53.3%과 47.8%, 52.0%, 49.7%, 및 21.8%로 나타나 난할율 및 배반포 발생율에 있어서 융합조건에 따라 큰 차이는 없었으나 1.9㎸/cm, 30$\mu\textrm{s}$ 2회의 조건이 다른 조건들에 비하여 유의적으로 낮았다. 따라서, 체세포와 수핵란 세포질간의 융합율과 배반포 발생에 미치는 영향은 전압보다는 시간에 더 크게 받음을 알 수 있었으며, 이와 같은 결과에서 융합시 시간을 오래 주는 것보다 전압을 높이는 것이 수핵난자의 세포질에 상해를 줄이고 이후 배반포 발생에 유리할 것으로 사료되었다.

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천연 식물 추출물에서 Matrix Metalloproteinase-9 활성 억제제의 분리 및 특성화에 관한 연구 (A study on separation and characterization of matrix metalloproteinase-9 inhibitors from natural plants)

  • 허용철;박성우;김태진
    • 분석과학
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    • 제18권3호
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    • pp.188-193
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    • 2005
  • 천연 식물 추출물로 처리한 matrix metalloproteinase (MMP)의 저해능 실험에서 귀전우 (Euonymus alatus)의 methanol 가용성 분획이 matrix metalloproteinase (MMP-9) 활성에 저해능이 있는 것으로 나타났다. Silica gel column에서 ethyl acetate와 hexane의 혼합비를 달리하는 방법으로 다섯 개의 부분으로 분획하였고 그 중에서 세 개의 분획이 MMP-9 활성에 저해능이 있는 것으로 나타났다. 인체 간암 세포인 Hep3B 세포주와 인체 정상 세포인 Chang 세포주를 같은 조건으로 키운 후 형태학적 변화를 관찰한 결과, 귀전우의 메탄올 추출물로 처리한 세포에서만 핵의 주위에 검은 반점이 넓게 분포되어 있는 것이 관찰되었다. 인체 정상 세포주에 대한 독성 확인 실험에서 대부분의 메탄올 가용성 분획은 독성을 나타내지 않는 것으로 나타났다.

Baicalein의 BALB/c Mice에서의 접촉성 피부알레르기 예방효과 (Effects of Baicalein on Picryl Chloride-induced Contact Dermatitis in BALB/c Mice)

  • 김수현;김형진;정지윤
    • 한국식품영양과학회지
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    • 제38권2호
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    • pp.160-165
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    • 2009
  • 본 연구는 황금추출물인 baicalein의 피부알레르기 예방 효과를 알아본 연구로서 baicalein을 투여할 농도에 따라 0 mg/kg(대조군), 50 mg/kg(저용량군), 100 mg/kg(고용량군) 3개의 그룹으로 나누고, ear swelling을 측정하는 1군과 IgE 농도와 histamine 농도의 측정 및 조직병리학적 관찰을 위한 2군으로 나눠 실험을 하였다. Baicalein을 8일에 걸쳐 8회 경구투여를 실시한 후 접촉성 피부알레르기 유발 물질인 PCL을 귀에 감작시켜 알레르기를 유발시키고, 1군에서 ear swelling 변화를 확인하고 2군에서는 1군의 ear swelling의 결과에서 귀의 두께가 최고치를 이루는 시간대에 부검을 실시하여 적출한 조직으로는 HE염색과 TB염색을 실시하여 병변의 유무와 비만세포를 확인하였다. 채취한 혈청으로는 IgE 농도와 histamine 농도를 측정하였다. Ear swelling의 경우 0 mg/kg 농도의 baicalein을 투여한 대조군에 비해 50 mg/kg, 100 mg/kg 농도의 baicalein을 투여한 저용량군과 고용량군 그룹의 귀의 두께 증가폭이 낮게 나타났고, 저용량군보다 고용량군에서 그 증가폭이 낮게 나타났다. IgE 농도와 histamine 농도 측정결과에서도 0 mg/kg 농도의 baicalein을 투여한 대조군에 비해 50 mg/kg, 100 mg/kg 농도의 baicalein을 투여한 저용량군과 고용량군에서 낮은 수치가 나왔다. 조직병리학적 검사결과에서는 육안적으로 모든 그룹의 간과 신장에서는 별다른 병변은 관찰되지 않았고, HE염색을 한 귀 조직에서는 대조군에서 고용량군에 비해 귀의 두께가 두껍게 관찰되었고, TB염색을 한 귀 조직에서는 대조군에 비해 고용량군에서 적은 수의 비만세포들이 관찰되었다. 즉, ear swelling, IgE 농도, histamine 농도 및 조직병리학적 결과를 종합해봤을 때 황금추출물인 baicalein이 접촉성 피부알레르기 예방효과가 있다고 판단되어지고, 향후 baicalein은 항알레르기 치료제로 사용되는 생약제의 주요 성분으로 유용할 것이라 사료된다.

고능력 한우의 체세포를 이용한 핵이식 수정란 생산 및 이식

  • 양병철;임기순;성환후;임석기;이상기;이명식;장원경;정일정;김경남
    • 한국동물번식학회:학술대회논문집
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    • 한국동물번식학회 2002년도 춘계학술발표대회 발표논문초록집
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    • pp.35-35
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    • 2002
  • 본 연구는 핵이식 기법을 이용하여 고능력 한우의 대량 생산기술을 개발하기 위하여 수행하였다. Donor cell 은 축산기술연구소 남원지소에서 사육, 검정하고 있는 축군에서 육량 육질 국내 100위 이내의 암소에서 귀세포를 채취하여 동결 및 계대배양하여 사용하였다. 도축장에서 채취한 난소에서 난자를 채취하여 22시간 성숙 배양한 후 난구세포를 제거하고, 극체가 존재하는 난자를 선별하여 recipient cytoplasm으로 사용하였다. (중략)

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칡소의 귀세포를 이용한 핵이식에서 전기융합조건이 융합 및 배발달에 미치는 영향 (Effect of Electric Purse Conditions on the Fusion and Development Embryos Produced by Ear Cell Nuclear Transfer in Brindle Coated Hanwoo (Korean Cattle))

  • 최은주;이호준;민관식;김창근;정영채;윤종택
    • 한국가축번식학회지
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    • 제27권1호
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    • pp.87-93
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    • 2003
  • 칡소의 귀세포를 이용한 핵이식 시에 전기 융합조건이 핵이식란의 발생에 미치는 영향을 알아보고, 칡소의 귀세포와 한우의 태아섬유아세포를 이용한 핵이식란을 이식하여 수태율을 비교하였다. 전기자극 조건에 따른 핵이식 후 융합율은 51∼68%의 범위로 차이는 없었으나, lysis 율은 1.9kv/cm의 10us, 20us에서 각각 0.0과 38.7%, 2.0kv/cm의 10us, 20us에서 각각 2.9와 37.5%, 2.1kv/cm의 10us, 20us에서 각각 21.2와 51.8%을 보였다. 난할율은 1.9kv/cm의 10us, 20us에서 각각 75.8과 69.8%, 2.0kv/cm의 10us, 20us에서 각각 76.9와 68.8%, 2.1kv/cm의 10us, 20us에서 각각 70.5와 68.5로 큰 차이가 없었다. 그러나 배반포 발생율은 1.9kv/cm의 10us, 20us 각각 19.5와 48.6%, 2.0kv/cm의 10us, 20us에서 각각 20.0과 40.9%, 2.1kv/cm의 10us, 20us에서 각각 44.2와 27.0%로 각 조건에서 시간에 따른 차이를 보였다. 핵이식에서 공여세포와 세포질간의 융합율과 lysis율은 전압과 통전시간에 영향을 받으며 전압을 높이는 것이 통전시간을 길게 하는 경우보다 수핵난자의 세포질에 상해를 줄이고 배반포 발생에 유리 하였다. 한우의 태아섬유아세포의 핵이식후 생산된 배반포를 5마리의 수란우에 이식한 결과 두 마리가 임신되었고(40.0%), 칡소의 귀 세포를 핵이식한 후 생산된 배반포를 19마리에 이식한 결과 3마리가 임신되었다(15.8%).

귀전우(鬼箭羽) 물 추출물에 의한 유방암 세포주 증식억제에 관한 연구 (A study of antiproliferative effect by Euonymus alatus (Thunb.) Sieb water-extract on SKBR3 human breast cancer cell line)

  • 김종섭;이태균;김동일
    • 대한한방부인과학회지
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    • 제18권4호
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    • pp.1-9
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    • 2005
  • Purpose : 이 연구는 SKBR3 인간 유방암 세포주에 대한 Euonymus alatus (Thunb.) Sieb 추출물 (CWE) 의 증식억제, 항산화 작용 및 세포사 유발 효과를 검토하기 위해 이루어 졌다. Methods : SKBR3 세포주는 48시간 동안 다양한 농도 ($0-40\;{\mu}g/ml$)의 CWE를 첨가하면서 배양되었고, 세포의 생존 비율은 MTT 배양을 통해서 평가하였다. 또한 CWE의 증식억제 효과는 유방암 세포주의 세포사와 관련되어 있음을 형태학적인 변화와 올리고뉴클레오솜 DNA 분절을 통해 확인하였다. Results : CWE의 50%에서 효과를 나타내게 하는 약물농도인 $ED_{50}$ (effective dose 50%)은 $9.3+2.2{\mu}g/ml$이며, 약물의 농도에 의존하여 세포의 증식을 억제시켰다. 아울러, 다양한 농도와 배양시간에서 CWE가 ROS 생산을 억제하는 것을 밝힐 수 있었다. 따라서 이러한 작용과 항암예방효과는 농도와 노출 시간에 의존하였다. Conclusion : 이러한 관찰을 통해 Euonymus alatus (Thunb.) Sieb의 열수 추출물은 SKBR3 인간 유방암 세포주에 대해 강한 증식억제 효과와 강력한 항산화효과 및 세포사의 유발 효과를 가지는 것으로 인식할 수 있다.

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