• Title/Summary/Keyword: 귀세포

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A study of apoptosis induction of Euonymus alatus (Thunb.) Sieb via mitochondrial pathway prooxidant in leiomyomal smooth muscle cells (귀전우(鬼箭羽)의 인간 자궁근종 세포에서 미토콘드리아 경로를 통한 산화제로서 apoptosis 유도작용에 관한 연구)

  • Kwon, Cha-Nam;Lee, Tae-Kyun;Kim, Dong-Il
    • The Journal of Korean Obstetrics and Gynecology
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    • v.18 no.3
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    • pp.67-76
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    • 2005
  • Purpose : 귀전우(Euonymus alatus, EA)는 현재까지 항종양활성을 나타낸다고 보고되었지만 그 작용 메커니즘에 대해서는 아직 밝혀지지 않은 채 남아 있다. 본 연구에서는, 자궁근종세포(ULSMC)에서 EA의 분자적 수준에서의 작용메커니즘을 연구${\cdot}$검토하고자 하였다. Methods : EA의 열수추출액이 자궁근종세포(ULSMC)와 caspase-3 pretense의 활성도에 미치는 영향을 측정하였다. Results : 우리는 자궁근종에서 EA 유도 세포독성의 메커니즘을 검토하였는바, 근종 세포들은 20-200g/ml 농도의 EA추출물에 6시간 배양될 때, caspase-3가 활성화되고, 그때 세포들은 apoptosis를 유발하게 되었다. EA에 의한 apoptosis의 유도가 진행되었으며, cytochrome- c의 세포질분획에서 양적증가가 caspase-3의 활성보다도 우세하였다. GSH합성의 저해제인 5mM buthionine용액에 전처리는 EA유도 apoptosis를 용이하게 하지만 pan-caspase inhibitor인 Z-VAD-fmk용액 전 처리는 부분적으로 apoptosis유도를 억제하였다. 한편, EA는 건강한 지원자들로 부터 채취한 말초혈액 단핵세포들에 있어서는 독성의 효과는 없었다. Conclusion : 이들 결과들은 EA가 prooxidant로 작용을 하고 그리고 caspase-3 activation과 mitochondrial pathway를 경유하는 apoptosis를 유발한다는 것을 나타낸다. EA의 탕제약제로서 열수추출액이 항산화활성뿐만 아니라, 종양세포에 대한 세포독성효과를 나타낸다고 보고된 바, 이에 향후 근종치료에 대한 임상연구가 필요할 것으로 보인다.

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Effect of Fusion Method and Passage Culture of Hanwoo (Korean Cattle) Ear Skin and Fetal Fibroblasts on the Development of Nuclear Transfer Embryos (한우의 귀세포와 태아섬유아세포의 융합 방법과 Passage 배양이 복제수정란의 발달에 미치는 영향)

  • Yang Byoung-Chul;Im Gi-Sun;Lee Sang-Ki;Kim Se-Woong;Kim Dong-Hoon;Seong Hwan-Hoo;Yang Boh-Suk
    • Reproductive and Developmental Biology
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    • v.30 no.1
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    • pp.53-58
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    • 2006
  • The study was conducted to evaluate the effects of culture period and fusion method on the development of somatic cell nuclear transfer (SCNT) embryos reconstituted with Korean bovine fetal fibroblast cells (KbFF) and Korean bovine adult ear skin fibroblast cells (KbESF). KbFF were isolated from a day 51 Korean cattle (Hanwoo) fetus, and KbESF were isolated from a 28 month old Hanwoo calf. The cells were cultured up to 15 weeks (passage 15) in vitro for SCNT. Chamber and electrode needles were used for comparing fusion of reconstituted eggs. The doubling times of KbFF and KbESF were 17.3 hr and 24.3 hr, respectively. The fusion and cleavage rates were significantly higher in needle group (76.1 and 81.2% respectively, P<0.05) than those in chamber group. However, the blastocyst development rate was not different between both groups. Fusion and cleavage rates of NT eggs reconstituted with KbESF did not affected by passage number, however, blastocyst rates were lower in passage $1{\sim}4$ group (21.3%) than passage $5{\sim}8$ (39.4%) and $13{\sim}15$ groups (40.4%, P<0.05). Whereas, fusion rate was lower in passage $1{\sim}4$ group (61.5%) than those of passage $5{\sim}8$(75.0%) and $13{\sim}15$ (76.8%) groups, but cleavage and blastocyst rates were similar regardless of passage number in the KbFF. The results suggest that fusion method can affect the development of SCNT embryos, whereas the long term culture up to 15 passages may not affect the development of SCNT embryos.

Antioxidant Activity and Anti-inflammatory Effect of Alginic Acid from Sea Mustard Sporophyll (미역귀에서 추출한 알긴산의 항산화 효과 및 항염증효과)

  • Jin, Seong-Woo;Kim, Kyung-Je;Koh, Young-Woo;Im, Seung-Bin;Ha, Neul-I;Jeong, Hee-Gyeong;Je, Hae-Shin;Ban, Seung-Eon;Jeong, Sang-Wook;Seo, Kyoung-Sun
    • Proceedings of the Plant Resources Society of Korea Conference
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    • 2018.04a
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    • pp.78-78
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    • 2018
  • 미역은 갈조식물인 미역과에 속하는 1년생 바닷말로서 주로 어린 줄기와 잎부분을 식용으로 한다. 폐기부로 분류되는 미역귀 부분 또한 가식부 이상으로 풍부한 미네랄과 알긴산을 함유하고 있으며 이를 이용한 건강 친화적인 슬라이스 잼의 개발을 목적으로 연구를 수행하였다. 제품 개발의 소재화를 위한 연구의 일환으로 미역귀 알긴산 추출, 알긴산의 항산화활성(DPPH, ABTS, SOD 유사활성, total polyphenol, 세포 독성, NO생성 억제능을 수행한 바는 아래와 같다. 미역귀 알긴산 추출물을 각각 10, 50, 100, $500{\mu}g/mL$의 농도로 처리한 시험구들의 전자공여능을 확인한 결과 각각 2.8, 27.5, 35.9, 43.4%로 나타났으며, ABTS 라디칼 소거능은 각각 4.2, 21.6, 33.4, 67.4%로 나타났다. 동일한 농도로 처리하였을 때 SOD 유사활성은 각각 9.2, 12.4, 23.2, 30.8%로 나타났다. 미역귀 알긴산 추출물의 total polyphenol은 $19.16{\pm}0.08mg%$로 확인되었다. 세포생존율은 10, 50, 100, $500{\mu}g/mL$의 농도로 처리하였을 때 118.8%, 120.7%, 121.1%, 124.9%로 나타났다. NO생성 억제능을 동일한 농도에서 확인한 결과 각각 3.1, 5.1, 7.9, 9.6%로 확인되었다. 본 연구결과 미역귀 알긴산 추출물은 항산화능이 탁월하게 나타나 건강 친화적인 기능성 소재로 활용도가 높을 것으로 기대된다.

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전통한우(칡소)의 귀세포를 이용한 핵이식에서 전기융합 조건이 핵이식 수정란의 발달에 미치는 영향

  • 최은주;이호준;김기수;윤종택
    • Proceedings of the KSAR Conference
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    • 2001.03a
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    • pp.67-67
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    • 2001
  • 전기자극은 핵이식 시 수핵난자와 공여핵의 융합을 위해 보편적으로 사용되는 방법이다(Robl, 1999). 그러나 부적절한 전기자극은 수핵난자 세포질에 해를 입히고, 이후의 배발달에 좋지 않은 영향을 준다. 본 실험은 체세포 핵이식을 \circled1 1.9㎸/cm, 20$\mu\textrm{s}$ 2회, \circled22.0㎸/cm, 20$\mu\textrm{s}$ 2회, \circled32.2㎸/cm, 10$\mu\textrm{s}$ 2회, 및 \circled41.9㎸/cm, 30$\mu\textrm{s}$ 2회의 전기자극으로 융합을 실시하여 각 자극 별 융합율과 난자의 lysis율을 비교하고, 배양 후 배반포 발생율을 조사하였다. 공여핵은 칡소의 귀 세포를 10% FBS가 첨가된 DMEM에서 39$^{\circ}C$, 5%$CO_2$의 incubator에서 배양하여 monolayer confluent형성 후 0.5% FBS가 첨가된 DMEM에서 3-4일간 배양 후 trypsin처리하여 제핵된 체외성숙 난자에 핵이식하였다. \circled1,\circled2,\circled3,\circled4의 핵이식 조건을 이용하여 공여핵의 체세포와 수핵란 세포질간의 융합을 유도한 결과, 융합율은 각각 50.7%, 48.1%, 65.5%, 및 33.3%였으며, 수핵난자의 세포질 lysis율은 39.%1, 41.7%, 22.6%,및 52.7%으로 \circled32.2㎸/cm, 10$\mu\textrm{s}$ 2회의 조건에서 융합율이 유의적으로 높았고, 수핵난자의 세포질 lysis율에 있어서도 다른 군에 비하여 낮았다 각각의 핵이식 조건별로 융합한 후 난할율 및 배반포 발생율은 각각 65.7%, 73.5%, 77.2%, 및 53.3%과 47.8%, 52.0%, 49.7%, 및 21.8%로 나타나 난할율 및 배반포 발생율에 있어서 융합조건에 따라 큰 차이는 없었으나 1.9㎸/cm, 30$\mu\textrm{s}$ 2회의 조건이 다른 조건들에 비하여 유의적으로 낮았다. 따라서, 체세포와 수핵란 세포질간의 융합율과 배반포 발생에 미치는 영향은 전압보다는 시간에 더 크게 받음을 알 수 있었으며, 이와 같은 결과에서 융합시 시간을 오래 주는 것보다 전압을 높이는 것이 수핵난자의 세포질에 상해를 줄이고 이후 배반포 발생에 유리할 것으로 사료되었다.

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A study on separation and characterization of matrix metalloproteinase-9 inhibitors from natural plants (천연 식물 추출물에서 Matrix Metalloproteinase-9 활성 억제제의 분리 및 특성화에 관한 연구)

  • Hur, Yong-Chul;Park, Sung-Woo;Kim, Tai-Jin
    • Analytical Science and Technology
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    • v.18 no.3
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    • pp.188-193
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    • 2005
  • Three different oriental natural plants (Angelicae Dahuricae Radix, Sanguisorba Officinalis L, Euonymus alatus) were extracted with 70% methanol under refluxing for 4 hr in order to investigate their inhibitory effect on Matrix Metalloproteinase-9 (MMP-9) by a modified gelatin zymography, where only euonymus alatus showed the inhibitory effect on the activity of Matrix MMP-9. The fraction was collected by using the mixture of ethyl acetate and hexane on silica gel column. Seven portions were obtained and three fractions of them (first, third and forth) showed inhibitory effect on the zymography. To verify the effect of these substances on cells, human hepatoma, Hep3B cells as a cancer model, and Chang liver cells as a normal model were selected. In order to examine the cell viability, $1{\mu}g/mL$ of each extract was treated on cells. Most of the methanol soluble fractions showed negligible toxicity on human liver cell line.

Effects of Baicalein on Picryl Chloride-induced Contact Dermatitis in BALB/c Mice (Baicalein의 BALB/c Mice에서의 접촉성 피부알레르기 예방효과)

  • Kim, Soo-Hyun;Kim, Hyeong-Jin;Jung, Ji-Youn
    • Journal of the Korean Society of Food Science and Nutrition
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    • v.38 no.2
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    • pp.160-165
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    • 2009
  • Contact dermatitis is induced by allergy response from a lot of chemical substances brought on by environmental contamination. In this study, we investigated allergy prevention effect of baicalein which is Scutellaria radix extract. Scutellaria radix is the dried roots of Scutellaria baicalensis Georgi (Labiatae). It has been used in oriental traditional medicine for treatment of fever, diarrhea and inflammation. We have induced allergy by PCL after oral administration of 0 mg/kg, 50 mg/kg or 100 mg/kg baicalein dose for 8 times during 8 days in BALB/c mice and measured ear thickness, IgE level, histamine level, mast cell number and histopathological changes. The ear thickness of the 100 mg/kg baicalein group was thinner than that of the 0 mg/kg baicalein group. IgE level and histamine level of the 100 mg/kg baicalein group were lower than those of 0 mg/kg baicalein group. The number of mast cells of 0 mg/kg baicalein group more than that of 100 mg/kg baicalein group in the ear tissue. In addition, intradermal edema with prominent inflammatory cell infiltration was observed at 0 mg/kg baicalein group more than 100 mg/kg baicalein group in the ear tissue. These results suggest that baicalein has allergy prevention effect in BALB/c mice.

고능력 한우의 체세포를 이용한 핵이식 수정란 생산 및 이식

  • 양병철;임기순;성환후;임석기;이상기;이명식;장원경;정일정;김경남
    • Proceedings of the KSAR Conference
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    • 2002.06a
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    • pp.35-35
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    • 2002
  • 본 연구는 핵이식 기법을 이용하여 고능력 한우의 대량 생산기술을 개발하기 위하여 수행하였다. Donor cell 은 축산기술연구소 남원지소에서 사육, 검정하고 있는 축군에서 육량 육질 국내 100위 이내의 암소에서 귀세포를 채취하여 동결 및 계대배양하여 사용하였다. 도축장에서 채취한 난소에서 난자를 채취하여 22시간 성숙 배양한 후 난구세포를 제거하고, 극체가 존재하는 난자를 선별하여 recipient cytoplasm으로 사용하였다. (중략)

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Effect of Electric Purse Conditions on the Fusion and Development Embryos Produced by Ear Cell Nuclear Transfer in Brindle Coated Hanwoo (Korean Cattle) (칡소의 귀세포를 이용한 핵이식에서 전기융합조건이 융합 및 배발달에 미치는 영향)

  • 최은주;이호준;민관식;김창근;정영채;윤종택
    • Korean Journal of Animal Reproduction
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    • v.27 no.1
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    • pp.87-93
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    • 2003
  • This study was conducted to investigate the effects of embryo development by fusion condition on the nuclear transfer with brindle coated cow's ear cells. Ear cells were transferred into an enucleated oocyte and fused with cytoplasm in the fusion condition with 1.9kv/cm, 2.0kv/cm, 2.1kv/cm each 10 and 20ug duration Nuclear transfer embryo were activeted with a combination of 5ug/ml and 1.9mM 6-DMAP (4min, 4h). Fusion rate was 51∼68% range among fusion condition (1.9, 2.0, 2.1kv/cm; 10, 20us). But, cytoplasm lysis rate was increased by higher electric condition (0∼51.8% range). Each parameter's cleavage and blastocyst formation rate were 1.9kv/cm for 10us (75.8 and 19.5%), 20us (69.8 and 48.6%), 2.0kv/cm for 10us (76.9 and 20.0%), 20 us (68.5 and 40.9%), 2.1kv/cm for 10us (70.5 and 44.2%), 20 us (68.5 and 27.0%). We compared the effectiveness of cloning for between brindle coated cow's ear cells and Hanwoo fetal fibroblast cells. There was no significant differences in the fusion rate and developmental rate to the blastocyst stage. After transfer of blastocysts derived from nuclear transfer embryos, pregnancy rates of the Hanwoo fetal fibroblast cells and brindle coated cow's ear cells were checked pregnant on day 60 as assessed by ultrasonography, 40% (2/5) and 15.8% (3/19), respectively. This studies conclude that brindle coated cow's ear cells have the developmental potentiality to term by nuclear transfer. These results demonstrate that the increased the field strength was to be profitable for development of blastocyst or reduce of cytoplasm's damage than increasing the pulse duration.

A study of antiproliferative effect by Euonymus alatus (Thunb.) Sieb water-extract on SKBR3 human breast cancer cell line (귀전우(鬼箭羽) 물 추출물에 의한 유방암 세포주 증식억제에 관한 연구)

  • Kim, Jong-Seob;Lee, Tae-Kyun;Kim, Dong-Il
    • The Journal of Korean Obstetrics and Gynecology
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    • v.18 no.4
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    • pp.1-9
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    • 2005
  • Purpose : 이 연구는 SKBR3 인간 유방암 세포주에 대한 Euonymus alatus (Thunb.) Sieb 추출물 (CWE) 의 증식억제, 항산화 작용 및 세포사 유발 효과를 검토하기 위해 이루어 졌다. Methods : SKBR3 세포주는 48시간 동안 다양한 농도 ($0-40\;{\mu}g/ml$)의 CWE를 첨가하면서 배양되었고, 세포의 생존 비율은 MTT 배양을 통해서 평가하였다. 또한 CWE의 증식억제 효과는 유방암 세포주의 세포사와 관련되어 있음을 형태학적인 변화와 올리고뉴클레오솜 DNA 분절을 통해 확인하였다. Results : CWE의 50%에서 효과를 나타내게 하는 약물농도인 $ED_{50}$ (effective dose 50%)은 $9.3+2.2{\mu}g/ml$이며, 약물의 농도에 의존하여 세포의 증식을 억제시켰다. 아울러, 다양한 농도와 배양시간에서 CWE가 ROS 생산을 억제하는 것을 밝힐 수 있었다. 따라서 이러한 작용과 항암예방효과는 농도와 노출 시간에 의존하였다. Conclusion : 이러한 관찰을 통해 Euonymus alatus (Thunb.) Sieb의 열수 추출물은 SKBR3 인간 유방암 세포주에 대해 강한 증식억제 효과와 강력한 항산화효과 및 세포사의 유발 효과를 가지는 것으로 인식할 수 있다.

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