Barley plants growing in the wet paddy field easily encounter suboptimal oxygen concentration in the rhizosphere that causes molecular oxygen deficiency in root cells. The capacity of root cells to utilize energy sources is known to be positively related to resistance to hypoxia stress. This study was conducted to investigate effects of hypoxia on enzymes involved in the starch and sucrose metabolism. Barley seedlings at the third leaf stage were subjected to hypoxia (1 ppm dissolved oxygen) by purging the culture solution with nitrogen gas for up to seven days. The protein content was slightly decreased by hypoxia for 7 days. $\alpha-Amylase$ activities increased significantly in the root but not in the shoot after 3 to 7 days of hypoxia. $\beta-Amylase$ activities were not affected significantly in both tissues. Additionally, sucrose synthase activities were affected little in both tissues by 7 days of hypoxia. The results indicate that root cells activate breakdown of polysaccharide reserves in response to an acute hypoxia to supply energy sources for fermentative glycolysis and cell wall fortification.
Journal of Korean Society of Environmental Engineers
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v.32
no.12
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pp.1141-1146
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2010
Isolated the heterotrophic aerobic bacteria in sandfiltered water on NA and TSBA solid medium, selected 8 dominant species and identified by Sherlock System. Each samples are irradiated 0, 5, 16, 40 and $60\;mJ/cm^2$ using on CBD (Collimated Beam Device) Medium Pressure UV lamp after these identified bacterium did liquid culture how to make $10^6{\sim}10^7\;cells/mL$ suspended in dilution water. Then cultured bacteria are estimated inactivation rate on plate media. Identified Gram positive group are Bacillus Subtilus, Bacillus megaterium, Rhodococcus erythropolis and Microbacterium laevaniformans; Gram negative group are Pseudomonas vesicularis, Pseudomonas pseudoflava, Alcaligenes paradoxus and Zooglea ramigera. These isolation of bacterium are more stronger reference strain and high resistance of MP UV irradiation, Besides Gram negative bacterium are more sensitive Gram positive bacterium on MP UV dose. Now we are estimating to $60{\sim}100\;mJ/cm^2$ MP UV dose for efficient disinfection in water treatment plant.
In this study, an automated culture media replacement system was developed to analyze changes in the contraction characteristics of cardiomyocytes according to the state of the culture media. For the long-term storage of culture media, a Peltier refrigerator with a temperature of 5 to 8℃ was provided and a pH of 7.4 was maintained. The cell culture media of the cardiomyocytes was continuously replaced using interlocking pumps at a flow rate of 0.83 μl/h. The cardiomyocytes in which the culture media was replaced automatically demonstrated lower heartbeats per minute compared to samples in which there was no replacement. However, these cardiomyocytes moved more uniformly and produced greater displacement in one heartbeat cycle. It was observed that the sarcomere length of the cardiomyocytes increased due to the automated culture media replacement system. These cardiomyocytes were found to demonstrate better maturation compared to the control group. The maturation of cardiomyocytes was verified through staining images. The proposed automated culture media replacement system generates a uniform heart rate and improvements in contraction force. Based on the study, patient-specific drug toxicity assessments can be conducted using differentiated cardiomyocytes in induced pluripotent stem cells.
Kim, Dong-Ho;Kim, Byung-Hyuk;Choi, Jong-Eun;Kang, Zion;Kim, Hee-Sik
Korean Journal of Microbiology
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v.50
no.4
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pp.313-318
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2014
The world is in need of sustainable and eco-friendly energy sources such as microalgal biodiesel due to global warming and fossil fuel shortages. In this study, we compared the effectiveness of liquid fertilizer produced from swine manure and agriculture grade solid fertilizers as nutrient sources for microalgal biomass production. Mixed culture (Chlorella spp., Scenedesmus spp., Stigeoclonium spp.; CSS) was cultivated for 28 days in Small Scale Raceway Pond (SSRP) using various nutrient sources (swine manure liquid fertilizer, agricultural solid fertilizer, and mixture of these two fertilizers). Biomass and lipid productivity of fertilizer mixture were the highest at 0.8 g/L and 5.8 mg/L/day, respectively. These results indicate that the fertilizer mixture can provide microalgae necessary nutrient sources for stable biodiesel production and biomass growth. In addition, overall cost of microalgal cultivation and subsequently biodiesel production would be significantly reduced.
To remove phosphate accumulated in the soil and water, Acinetobacter lwoffi PO8 possessing a high ability to accumulate phosphate was isolated from a active sludge. Bacterium was cultured in the liquid medium containing $150\;{\mu}g/mL$ of phosphate at $30^{\circ}C$ in different culture conditions to examine intracellular phosphate uptake. The initial pH in the range of $7.5{\sim}8.5$ was effective on the growth and phosphate uptake of the strain. Glycerol and arabinose used as a carbon sources showed 93 and 91% the phsphate uptake, respectively. Among the nitrogen sources, ammonium salt such as $NH_4NO_3$ and $(NH_4)_2SO_4$ was effectively utilized on the phosphate uptake compared with amino compounds. The rate of phosphate uptake of $NH_4NO_3$, and $(NH_4)_2SO_4$, was 95 and 96%, respectively The growth and Phosphate uptake ability in the strain were significantly promoted when metal ions were added in the medium; $Co^{2+}$, however, was not utilized by the strain. The capacity of phosphate uptake was enhanced to $10{\sim}20%$ when arginine, methionine, or lysine was added. Using $^{32}P$ to examine the uptake Pattern of intracellular phosphate, experiment result showed that polyphosphate was largely found in the fraction of intracellular inorganic phosphate of Acinetobacter lwoffi PO8.
연구목적: 본 연구는 생쥐 preantral follicles의 체외 배양 조건을 확립하고 이를 기초로 높은 체외 발달률 그리고 산자 생산률을 얻고자 하였다. 연구재료 및 방법 : Preantral follicles의 oocyte-granulosa cell complexes (OGCs)는 생후 12일된 FI ($C57BL{\times}CBA$)으로부터 난소를 적출하여 효소를 이용한 방법을 통해 획득하였다. 회수된 complexes는 10일 또는 12일 동안 체외 성장을 위해 Transwell-COL membrane insert로 옮겨졌고 5% FBS, 100 mIU/ml FSH, 100 mIU/ml hMC가 첨가된 ${\alpha}MEM$에서 배양되었다. 체외 성숙을 위해 1.5 IU/ml hCG가 첨가된 ${\alpha}MEM$에서 18 hrs 배양을 실시하였다. 그 후 M16에서 수정능력이 획득된 정자와 수정을 하여 4 hrs, 7 hts, 9 hrs 후에 10% FBS가 첨가된 modified M16 배양액에서 4일간 배양하거나 또는 bovine cumulus cell과 co-culture를 실시하였다. 그리고 형태적으로 정상적인 22개의 상실배와 포배를 2마리의 위임신 대리모 (ICR)의 자궁에 이식하여 산자 생산을 유도하였다. 결과: 1) OGCs 크기가 mouse preantral follicles의 핵 및 세포질 성숙에 미치는 영향을 조사하였을 때 $120{\sim}150{\mu}m$의 preantral follicles (MII: 33.0%, 난할률: 36.7%, 상실배 이상; 20.9%)은 핵 및 세포질 성숙에 있어서 $70{\sim}110{\mu}m$ (MII: 12.2%, 난할률: 10.2%, 상실배 이상: 4.8%)보다 더 높았다(p<0.001). 2)체외 성장기간의 연장이 mouse preantral follicles의 핵 및 세포질 성숙에 미치는 영향을 조사하였을 때 10일 (난할률: 38.2%)은 12일 (난할률: 20.0%)보다 난할률에서만 더 높았다 (p<0.01). 3) 체외 수정 시간의 연장이 mouse preantral follicle의 세포질 성숙에 미치는 영향을 조사하였을 때 9 hrs (난할룰 31.5%, 상실배 이상: 14.3%)은 4 hrs (난할률: 17.5%, 상실배 이상: 4.8%), 7 hrs (난할률: 20.4%, 상실배 이상: 6.1%) 보다 세포질성숙에 있어서 유의하게 높은 발달률을 나타냈다 (p<0.01). 4) 공배양이 mouse preantral follicle의 세포질성숙에 미치는 영향을 조사하였을 때 공배양 (상실배 이상: 17.4%)을 실시했을 때와 M16 (상실배 이상17.4%)에서 배양되었을 때는 차이가 없었다. 5)preantral follicle의 크기 ($120{\sim}150{\mu}m$), 체외 성장기간 (10일), 체외 수정 기간 (9시간), 배양 환경 (단지 medium만 존재)의 적절한 결과들을 종합하여 수행하였을 때 MII 성숙률, 난할률, 상실배 이상의 발달률은 30.2%, 39.3%, 22.5%이었고 총 22개의 상실배 및 포배를 2마리의 대리모에 이식했을 때 1마리가 임신했고 1마리의 산자를 생산했다. 결론: 따라서, 본 실험은 preantral follicle을 이용한 체외 배양 시스템이 생쥐 oocyte를 공급하는 또 다른 방법으로 효과적으로 이용될 수 있다는 것을 시사한다.
For the economically feasible production of ethanol, utilization of SFW (saccharified food wastes) as substrate for synchronous saccharification and fermentation (SSF) process was developed in this study. When 200 g of food wastes and 40 mL of enzyme ($amylase activity,\;3.0\;U/m{\ell}$) were reacted, production rate of reducing sugar was $5.84\;g/{\ell}{\cdot}h$, and consumption rate was $-3.88\;g/{\ell}{\cdot}h\;at\;35^{\circ}C$ So suitable condition of SSF was concluded at temperature of $35^{\circ}C$. Also, optimal enzyme concentration of SSF was concluded in $2.0\;U/m{\ell}$, at this condition, the production rate of reducing sugar was $4.80\;g/{\ell}{\cdot}h$ At SSF process, when 50 g of food wastes was supplied in 12 h interval, $64\;g/{\ell}$ of ethanol and 0.45 g-ethanol/g-reducing sugar in yield were obtained in 120 h fermentation. Thus, the technology of high yield of ethanol production using food wastes was confirmed. And semi-continuos SSF system for cutting off cost of enzymatic saccharification was developed in this study.
Waste nutrient solution (WNS) that was the drained nutrient solution of Horticultural Research Institute of Japan for culture tomato in perlite hydroponics showed $1.9-2.4dS{\cdot}m^{-1}$ of EC and 5.7-7.1 pH from April to July. Although ${NH_4}^+-N$ concentration of WNS decreased remarkably, the other nutrients did not change significantly, as compared with supplied solution. There were no significant differences in plant height, stem diameter, and the other growth characteristics of tomato plants grown by 2 fertigation nutrient solutions; BHF (Bountiful Harvest Fertilizer, 10% of N, 13% of $PO_4$, 13% of K, 0.05% of B, 0.05% of Zn, and 0.0023% of Cu that made in Korea) and Megasol (11% of N, 8% of $PO_4$, 34% of K, 0.032% of Mn, 0.002% of B, 0.048% of Fe, 0.0122% of Zn, and 0.0023% of Cu that made in Belgium.); however, the chlorophyll content of tomato leaf was highest in WNS. The fresh and dry weight of tomato plants were higher in 3 fertigation treatments than irrigation of tap water, while there were no significant differences in fresh and dry weight among the 3 fertigation treatments. The mineral content of tomato leaf also did not show any differences among the 3 fertigation treatments and any regular tendency in all minerals. Total yield, fruit weight and fruit numbers of tomato were higher in WNS, followed by Megasol, BHF and control, although there were not any difference among the 3 fertigation nutrient solution treatments. BER(blossom-end rot)of tomato fruits decreased in fertigation treatments, especially, fruits grown in WNS and BHF showed lower BER. However, the transpiration rate of leaf was higher in control, followed by BHF, WNS and Megasol, The fruit size and soluble solids content was higher in 3 fertigation nutrient treatments than control. These results suggest that WNS can be used for fertigation solution in tomato because yield and quality of tomato fruit grown in WNS fertigation treatment were similar to those in 2 fertigation nutrient solutions treatments(BHF, Megasol).
Raw cow manure was treated by a 4-step integrated system with phase separation anaerobic digestion and algal culture. When the first methane fermentation was performed by the effluent from the acid fermenter with retention time of 4 days, the elrerage blogas production rate was 977m1/1 culture/day Gas productivity compared to conventional single-stage anaerobic digestion increased up to 31.4%. As the 2nd methane fermenter was fed by the effluent from the first methane fermenter with 4 days of retention time, average amount of 428m1/1 culture/day of biogas was produced. The reduction rate of COD in the effluent from the acid fermenter, the 1st and the 2nd methane fermenter were 71.8%, 42.6% and 24.0% respectively. Finally, we examined algal treatment process for the effluent from the 2nd methane fermenter. A semi-continuous culture of Chlorella sp. PSH3 was conducted by feeding the effluent with retention time of 10days. In this process, the production rate of algal biomass and COD reduction rate were averaged 1.8g/1 culture/day(2.8$\times$106 cells/ml) and 73%, respectively. Through the 4-setp treatments, the total chemical oxygen demand was reduced from 51,300ppm to 85ppm. Therefore, the reduction rate of total chemical oxygen demand reached about 99.8%. The results indicate that the integrated system could be applicable for treatment of organic wastes, concurrently producing biogas and algal biomass.
Objective: Human embryonic stem cells (hESCs) have the capacity to differentiate into all of the cell types and therefore hold promise for cell therapeutic applications. In order to utilize this important potential of hESCs, enhancement of currently used technologies for handling and manipulating the cells is required. The cryopreservation of hESC colonies was successfully performed using the vitrification and slow freezing-rapid thawing method. However, most of the hESC colonies were showed extremely spontaneous differentiation after freezing and thawing. In this study, we were performed to rapidly collect of early passage hESCs, which was thawed and had high rate of spontaneously differentiation of SNUhES11 cell line. Methods: Four days after plating, partially spontaneously differentiated parts of hESC colony were cut off using finely drawn-out dissecting pipette, which is mechanical separation method. Results: After separating of spontaneously differentiated cells, we observed that removed parts were recovered by undifferentiated cells. Furthermore, mechanical separation method was more efficient for hESCs expansion after thawing when we repeated this method. The recovery rate after removing differentiated parts of hESC colonies were 55.0%, 74.5%, and 71.1% when we have applied this method to three passages. Conclusion: Mechanical separation method is highly effective for rapidly collecting and large volumes of undifferentiated cells after thawing of cryopreserved early passage hESCs.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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