Abdominal skin tissues of ICR mouse painted with Dinitrochlorobenzene (DNCB) were observed to investigate the delayed type hypersensitivity of skin by chemical allergen as hapten. The abdominal skin tissues were obtained at hour 48 after secondary DNCB sensitization that were stained by Luna's method for mast cell, and immunohistochemical stain method for IL-2 receptor. The superficial perivascular lymphocytic aggregation were shown in basement membrane after DNCB secondary painting and the large size capillaries in dermis were appeared. The infiltration of lymphocyte to epithelium, the vacuolation of epithelial cell and intercellular space were increased. The number of mast cell in dermis was increased and these shape is degranulation type. The number of IL-2 receptor positive cell was increased in dermis. As results indicated that the hypersensitivy of immune system were induced by DNCB, subsequently to damage evoke inflammation in skin.
Objectives: Gagamyanggyeoksan (G-YGS) has been used to suppress allergic reaction, however, the cellular target of G-YGS and its mode of action remain unclear. The present study was designed to investigate the effect of extracted G-YGS on the PMA and lonomycin (PI)-induced activation of RBL-2H3. Methods: For this investigation, We examined IL-4, IL-13 mRNA expression by Real-Time PCR, IL-4, IL-13 production by ELISA analysis and manifestations of GATA-1, GATA-2, NF-AT1, NF-AT2, AP-1 and NF-${\kappa}B$ p65 transcription factors by western blotting, OVA-specific IgE, IL-4, IL-13 by mouse be sensitive to OVA. Results: Here we showed that treatment of RBL-2H3 mast cells with G-YGS, suppressed PI-induced production of Th2 cytokines including IL-4 and IL-13 in a dose dependent manner. The mRNA expression of IL-4 were completely abolished by G-YGS at the concentration of $100{\mu}g/ml$. Data from a stable cell lines consistently expressing IL-4. And the mRNA expression of IL-13 were abolished by G-YGS at the $200{\mu}g/ml$. But there is no difference between the $50{\mu}g/ml$, the $100{\mu}g/ml$ and the comparison. Results from the western blot analysis of transcription factors involving IL-4 and IL-13 expression indicated that it prominently decreased the expression of mast cell specific transcricption factors including GATA-1, GATA-2, NF-AT2, c-Jun, NF-${\kappa}B$ p65 but not c-Fos. And G-YGS suppressed IgE, IL-4, IL-13 in mouse be sensitive to OVA. Conclusions We suggested the anti-allergic activities of G-YGS might be mediated by down-regulation of Th2 cytokines such as IL-4 and IL-13 through the regulation of transcription factors as GATA-1, GATA-2, NF-AT2, c-Jun, NF-${\kappa}B$ p65.
본 논문은 피부미백에 관한 실험적 연구로서, 봉선화(Impatiens balsamina Linne)의 성분 중에서 하이드록시-나프타-퀴논(hydroxynaphthoquinone)이 멜라닌 생성억제 효능, 색소침착 저해 효과 등의 미백 활성이 있는 것으로 밝혀졌다. 피부흑화(melanogenesis)는 멜라닌 색소생성세포(melanocyte)에서 자외선 등의 자극에 대한 방어기작으로 멜라닌 생성 활동이 증가되고 이로 말미암아 만들어진 다량의 멜라닌이 각질형성세포(keratinocyte)로 전이되어 피부 표피층에 축척된 결과이다. 비록 멜라닌이 피부에 보호작용을 하나 피부의 과색소 침착은 기미, 주근깨, 피부염증 후의 피부흑화, 노인성 색소반점 등을 일으키며 이로 인해 피부미용 상의 불편뿐만 아니라 정신적으로 부정적인 영향을 미쳐 사회활동에 불편을 초래하기도 한다. 멜라닌 생성 과정은 아미노산의 일종인 티로신(tyrosine)에 티로시나제(tyrosinase)라는 효소가 작용하여 도파(DOPA), 도파퀴논(dopaquinone)으로 바뀐 후 비효소적인 산화 반응을 거쳐 만들어 지며, 이것이 피부 내에 이상 침착하여 기미, 검버섯 등이 생기는 것이라고 알려져 있다. 이와 같은 색소침착, 기미, 반점 등의 완화, 예방 및 치료에는 멜라닌 생성을 억제하는 물질, 예를 들면 하이드로퀴논(hydroquinone), 알부틴, 비타민 C 및 그 유도체 등이 개발되어 사용되고 있으나 이 중, 하이드로퀴논은 일단 효과가 인정되고 있지만 감작성이 있기 때문에 일반적으로 사용이 제한되고 있다. 아스콜빈산은 쉽게 산화되어, 이를 배합한 제품에는 변색, 변취가 되는 문제를 야기하고, 식물추출물 유래의 물질들은 식물의 산지에 따라 효능의 차이가 심하여 제품의 균질성이 유지되기 어렵다. 이러한 이유로 많은 멜라닌 생성을 억제하는 물질을 개발하기 위한 연구들이 계속 진행하고 있다. 2-히드록시-[1,4]나프토퀴논 유도체는 다음과 같은 구조를 나타낸다. 상기 구조에서 R은 포화 혹은 불포화된 직쇄 또는 분지쇄의 알킬로서, 바람직하게는 C1 내지 C10의 포화 혹은 불포화된 직쇄 또는 분지쇄의 알킬이고, 보다 바람직하게는 C1 내지 C5의 포화 혹은 불포화된 직쇄 또는 분지쇄의 알킬이다. 실험에 활용된 화합물은 다음과 같은 반응식으로 얻어졌다. 2-히드록시-[1,4]나프토퀴논과 포타슘카보네이트(K2CO3)를 아세토니트릴에 용해한 후, 저온수조로 냉각하고 알킬할라이드를 적당한 당량비로 천천히 적하하여 히드록시기와 에테르(ether) 반응을 통하여 얻어질 수 있다. 상기 반응식에서 R은 C1~10의 포화 또는 불포화된 알킬기로서 직쇄형 또는 분지쇄형 모두 가능하다. 상기 화합물인 2-히드록시-[1,4]나프토퀴논(2-hydroxynaphthoquinone)은 배양된 쥐의 멜라노마 세포에 대하여 하이드로퀴논과 대등한 멜라닌 생성 억제효과를 보였다. 하이드로퀴논은 저농도에서 강력한 멜라닌 생성 억제효과를 보이지만 상기 화합물들은 보다 낮은 농도에서도 세포독성을 나타내지 않으며 하이드로퀴논보다 높은 멜라닌 생성 억제 효과를 보였다.
Song, Ji Hyun;Lee, Jin Hwa;Kim, Eun Jin;Kim, Yun Hee
The Journal of Pediatrics of Korean Medicine
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v.32
no.3
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pp.1-15
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2018
Objectives Alismatis Rhizoma has been known to suppress inflammation and allergic reaction. However, the cellular target of Alismatis Rhizoma and its mechanism of action remain unclear. This study was designed to examine the effect of Alismatis Rhizoma extract (ALC) on the RBL-2H3 mast cells in vitro and on the OVA/alum sensitized mice ex vivo. Methods In the study, RBL-2H3 mast cells were cultured in minimal essential medium (MEM) for 24 hours, and treated separately with cyclosporin A and varying doses of ALC, and then stimulated with Phorbol 12-myristate 13-acetate (PMA) (50 ng/ml) and Ionomycin ($0.5{\mu}M$). The levels of IL-13, IL-4 were measured by ELISA analysis. The mRNA levels of IL-4, IL-5, IL-6, IL-13, GM-CSF, $TNF-{\alpha}$ were analyzed with Real-time PCR. Also, manifestations of MAPKs transcription factors and $NF-{\kappa}B$ p65 translocation were analyzed by western blotting in vitro. Subsequently, for ex vivo experiment, we induced allergic inflammation on Balb/c mice by OVA/alum and administered ALC orally. And we measured serum OVA-specific IgE level and IL-4, IL-13 in the splenocyte culture supernatant by ELISA analysis. Results ALC was shown to suppress mRNA expression of IL-4, IL-5, IL-6, IL-13, GM-CSF, $TNF-{\alpha}$, and to inhibit the IL-13, IL-4 production. Also ALC reduced an activation of mast cells specific signal MAPKs transcription factors and $NF-{\kappa}B$ p65 from the western blot analysis in in vitro experiment. In ex vivo, ALC oral adminstration decreased the level of OVA-specific IgE in serum, and IL-4, IL-13 in the splenocyte culture supernatant. Conclusions ALC is shown to reduce inflammation and allergic response by suppressing Th2 cytokines through the regulation of transcription factors MAPKs and $NF-{\kappa}B$ p65 in mast cells. Administration of ALC suppressed OVA-specific IgE in ovalbumin allergy model through the inhibition of Th2 cytokine. In conclusion, ALC can be considered as an effective treatment for allergic diseases such as atopic dermatitis.
Journal of Korean Society for Atmospheric Environment
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v.7
no.3
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pp.180-188
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1991
기후변화를 나타내는 연구 결과들은 기온이나 강수량을 대상으로 하여 두 기간 평균치의 비교, 5년 이동평균치의 圖示, 회귀분석 등의 방법들을 사용하여 발표되지만 대부분의 경우 밑바탕이 되는 모집단의 통계적 특성을 엄격히 검토하지 않는 정성적인 분석인 경우가 많다. 서울, 부산, 인천, 목포 등 4개 지점의 80년 동안의 연강수량과 연평균기온자료를 분석한 결과 기온은 정규분포를 나타내므로 전통적인 t-검정과 회귀분석을 적용할 수 있다. t-검정 결과 두 기간(1920 $sim$ 1949, 1961 ~ 1990)은 연평균기온에서 0.3$^{\circ}$C에서 $0.8^{\circ}$C의 의의있는 차이를 보였다. 최근 30년의 연평균기온자료를 회귀분석한 결과 1년에 $0.02^{\circ}$C의 증가경향을 나타내었다. 연강수량은 정적인 왜곡도를 보이므로 정규분포를 가정하는 母數的 통계분석을 적용해서는 안되며 비모수적 통계분석법을 적용해야 한다. 연강수량의 분석에는 t-검정에 상응하는 Mann-Whitney 검정을 적용해 본 결과 두 기간(1920 ~ 1949, 1961 ~ 1990)의 평균은 통계적으로 의의있는 차이가 없었다. 회귀분석에 상응하는 Mann's 검정과 이 연구에서 새로이 제안된 Median Slope Change Estimator를 적용해 본 결과 역시 통계적으로 의의있는 변화가 없었다. Median Slope Change Estimator는 비모수적 통계치로서 회귀분석의 기울기에 해당하는 연변화를 나타낼 수 있는데 분석하려는 자료의 정규분포성을 요구하지 않으며 異常點(outlier) 영향에 덜 민감하다는 장점이 있으므로 주목하여 연구할 만한 가치가 있다.^{\circ}$~40$^{\circ}$ 구간에서는 ${\sigma}_c$와 I$_{sa}$, 40$^{\circ}$~90$^{\circ}$ 구간에서는 ${\sigma}_c$와 I$_{sd}$가 각각 양호한 상관관계를 보여준다. 또한 상관비(K=${\sigma}_c$/I$_s$)는 약 13정도로서 일반적으로 적용되는 비, 24와 상당한 차이가 있다. 이러한 현상은 호상편마암의 구조적 및 역학적 이방성 특성으로 인한 결과라고 판단된다. 한편 맥암류에서 K가 약 23정도로서 일반적인 비 24에 상당히 접근한다. 따라서, 이방성 구조가 뚜렷한 암석에서 상관비 24는 항상 적용할 수는 없으며 일축압축강도시험과 병행 실시하여 적용하는 것이 바람직하다.다. 한편, 감작감염후 77일과 도전감염후 7일의 시점에 있어서 sRBC에 대한 면역능에 미치는 영향은 전자의 양상과 비슷하였는데 대조에 비하여 지연형 과민반응과 로제트 형성능이 현저하게 저하되었다. 이 시점에 있어서의 유충회수율은 대조가 10.5% 이었는데 비하여 8.3%이었다.e also compared for the cases of Kim et al, which again gives promising agreement.면적 306~453$\textrm{cm}^2$, 유색계의 경우 수당면적 340~453$\textrm{cm}^2$ 일 때 경제능력을 제대로 발휘할 수 있고 경제성이 있는 것으로 나타났다. 첨가구가 높은 경향이 있었다8.4%. 79.7% 그리고 80.2%였다.
Journal of the Korean Society of Food Science and Nutrition
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v.35
no.5
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pp.543-548
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2006
After allergic contact dermatitis (ACD) elicited by application of 1 mL of 2.5% 1-chloro-2,4-dinitrochloro-benzene (DNCB) onto dorsal skin, Sprague Dawley male rats fed Scutellaria baicalensis water extract were observed to investigate the mitigative effect of Scutellaria baicalensis water extract on ACD. The Scutellaria baicalensis water extract (100 mg/kg/day) was daily administered to rats suffered from ACD. Concentrations of TBARS in plasma and liver were increased in rats with ACD. The concentrations of TBARS in liver were significantly decreased in Scutellaria baicalensis-fed group (SBFG) compared to control group (CG), but not in plasma. Liver SOD activity was significantly increased in SBFG compared to that of normal group and CG. Serum Ig E level was significantly increased in CG compared to normal group, while that of SBFG was significantly decreased. The epidermal thickness of CG was significantly increased compared to that of normal group, while that of SBFG was significantly decreased compared to that of CG. These results indicated that the Scutellaria baicalensis water extract administration was effective for antioxidative activity in liver, serum Ig E level and epidermal thickness of rats with ACD.
By affinity chromatography using a monoclonal antibody as ligand, Kim et at. (1986) purified a protein fraction in cystic fluid of Taenia solium metacestodes (CF) In this study, the biochemical properties of the purified protein were characterized. Discontinuous-polyacrylamide gel electrophoresis (disc-PAGE) of the protein at 4.5∼10% separating gel concentration showed its molecular weight (MW) to be 150 kilodalton (kDa) in non·denatured state, while denaturing sodium dodecyl suifate-polyacrylamide gel electrophoresis (SDS-PAGE) revealed that it was composed of 3 different subunits with respective fnw of 15, 10 and 7 kDa. Subunit of 7 kDa was shown to be linked to other subunits by disulade bonds. Isoelectric point of the protein was pH 6.8. The protein was relatively heat-stable for immunologic analysis. These properties indicated that the protein, comprising about 70% of total content in CF, had similar biochemical characters with antigen B of Oriol et at.(1971) in hydatid cyst quid (HF).
Park, Seong-kuk;Jun, Moo-hyung;Lee, Hun-jun;Min, Won-gi;Yoon, Yong-dhuk
Korean Journal of Veterinary Research
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v.29
no.3
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pp.283-289
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1989
In order to measure in vitro cell mediated immunity in the guinea pigs sensitized with the killed bacilli of Mycobacterium bovis ($AN_5$), M avium (serotype 2), M tuberculosis and M intracellulare (serotype 8), leukocyte adherence inhibition (LAI) test was established using the antigens of purified protein derivatives (PPD) tuberculin. By using LAI test, specificity of cell-mediated immune responses of the guinea pigs inoculated with various Mycobacterium spp was investigated, and comparison between values of LAI and skin test was also made to evaluate the specificity of the newly designed test. The results obtained throughout the experiments were summarized as follows; 1. The optimal concentration of PPD antigens for LAI test was 1 to 2mg per ml of medium. 2. When the leukocytes of guinea pigs sensitized with both M bovis($AN_5$) and M avium (serotype 2) for 2 to 8 weeks were incubated with homologous or heterologous PPD antigens, mean values of LAI test were $61.2{\pm}11.2$ and $65.6{\pm}5.1%$ in homologous PPD antigens respectively, while $30.0{\pm}3.7$ and $32.8{\pm}5.7%$ in heteNlogous PPD antigens, showing the prominently high value of LAI in the homologous syst,em (p<0.01). 3. When the leukocytes of guinea pigs sensitized with both M tuberculosis and M intracellulare (serotype 8) for 2 to 8 weeks were incubated with homologous and heterologous PPD antigens, mean values of LAI test were $67.9{\pm}2.9$ and $66.9{\pm}5.0%$ in homologous PPD antigens, while $27.4{\pm}7.4$ and $24.4{\pm}7.1%$ in heterologous PPD antigens, showing the prominently high value of LAI in the homologous system (p<0.01). 4. Comparing with the specificity of LAI and skin tests on the basis of the value obtained from the homologous system, deviation of reaction was revealed to be 49.5 to 100.2 in LAI test, and -15.9 to 52.0 in skin test.
Journal of the Korean Society of Food Science and Nutrition
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v.38
no.2
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pp.160-165
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2009
Contact dermatitis is induced by allergy response from a lot of chemical substances brought on by environmental contamination. In this study, we investigated allergy prevention effect of baicalein which is Scutellaria radix extract. Scutellaria radix is the dried roots of Scutellaria baicalensis Georgi (Labiatae). It has been used in oriental traditional medicine for treatment of fever, diarrhea and inflammation. We have induced allergy by PCL after oral administration of 0 mg/kg, 50 mg/kg or 100 mg/kg baicalein dose for 8 times during 8 days in BALB/c mice and measured ear thickness, IgE level, histamine level, mast cell number and histopathological changes. The ear thickness of the 100 mg/kg baicalein group was thinner than that of the 0 mg/kg baicalein group. IgE level and histamine level of the 100 mg/kg baicalein group were lower than those of 0 mg/kg baicalein group. The number of mast cells of 0 mg/kg baicalein group more than that of 100 mg/kg baicalein group in the ear tissue. In addition, intradermal edema with prominent inflammatory cell infiltration was observed at 0 mg/kg baicalein group more than 100 mg/kg baicalein group in the ear tissue. These results suggest that baicalein has allergy prevention effect in BALB/c mice.
The C-reactive protein(CRP) from ascitic and pleural fluid was purified using calcium dependent affinity chromatography of CNBr activated Sepharose-4B covalently coupled to p-diazonium phenylphosphorylcholine(DPPC) and hydroxylapitite chromatography. Polyclonal antibody was prepared from rabbit by immunizing the purified CRP. Specific immunoglobulin G was isolated using affinity chromatography and coupled to microparticles. A sensitive microparticle-based immunoassay was developed to measure CRP within 3 mins. The detection range was between 0.5mg/dl) and 20mg/dl in serum, showing strong response in the range of 0.7~2.9 mg/dl, weak response in 5.0~13.2 mg/dl and zone phenomenon over 28mg/dl. The average value of CRP in 74 samples was 3.8mg/dl and most of the values were lower than 10mg/dl .The CRP values of serum samples were determined by our microparticle-based immunoassay, and were compared with those obtained using the other commercial products(B Co., France and I Co., Japan). Good correlations were shown between the values obtained by our developed microparticle-based immunoassay system and those by other commercial products. All performance characteristics evaluated make our developed microparticles-based immunoassay suitable for a simple, rapid, and reliable screening of CRP in serum.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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