• Applied Biological Chemistry
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• 제8권
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• pp.11-20
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• 1967

증자대두(蒸煮大豆)에 납두균(納豆菌)(Bacillus subtilis Natto 492-2)을 접종(接種)하고 $38^{\circ}C$에서 발효(醱酵)시키면서 매(每) 10 시간(時間)마다 시료(試料)를 채취(採取) 처리(處理)하여 납두(納豆) 제조과정중(製造過程中)에 일어나는 단백질(蛋白質)의 변화(變化)와 peptide 및 amino acid의 생성양상(生成樣相)에 관(關)하여 다음과 같이 결과(結果)를 얻었다. 1. 증자대두(蒸煮大豆)의 불용성(不溶性) 단백태(蛋白態) 질소(窒素)가 84%에서 발효(醱酵) 50 시간(時間)에 44%로 감소(減少)하였고, 수용성(水溶性) 단백태(蛋白態) 질소(窒素)는 약간(若干)의 증가(增加)를 했지만, peptide, amino acid 및 ammonia 태(態) 질소(窒素)가 8%에서 45%로 증가(增加)하여 단백질(蛋白質)의 가수분해(加水分解)가 현저(顯著)하였다. 2. 납두균(納豆菌)에서 분비(分泌)된 효소(酵素)에 의(依)해 분해(分解)된 peptide 및 amino acid으로 분자사별(分子篩別)한 결과(結果), 대체(大體)로 A.P.L.이 작은 저급(低級) peptide가 많이 생성(生成)됨을 알 수 있으며 발효(醱酵) 30 시간(時間) 이후(以後)에는 이전(以前)보다 단백질(蛋白質) 분해(分解)가 미약(微弱)하게 일어나면서 비교적(比較的) 큰 분자(分子)의 peptide 분해(分解)가 주(主)로 일어나 저급(低級) peptide 및 amino acid 생성(生成)이 많았다. 3. 분자사별(分子篩別)한 X-16 fraction을 시료(試料)로하며 paper chromatography에 의(依)한 amino acid 및 peptide를 동정(同定)한 결과(結果), 16종(種)의 amino acid와 그종(種)의 unknown amino acid가 동정(同定)되었는데, 이들 중(中) phenylalanine은 발효(醱酵) 10 시간(時間) 이후(以後), methionine은 20 시간(時間), proline은 30 시간(時間) 이후(以後)부터 각각(各各) 출현(出現)하였고, 또 Rf치(値)가 다른 3점(點)의 peptide 중(中) 1개(個)는 처음부터 나타나서 발효(醱酵) 20시간이후(時間以後) 소실(消失)하였고, 다른 그점(點)은 20 시간(時間), 40 시간이후(時間以後)부터 각각(各各) 계속(繼續)하여 출현(出現)하였다.

• 한국식품과학회지
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• 제4권1호
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• pp.36-43
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• 1972

여름철 즐겨먹는 토마토, 수박, 참외, 복숭아, 자두중(中)의 유리(遊離) amino 산(酸) 및 당(糖)을 Amino acid Autoanalyzer와 thin layer chromatography에 의해 분석(分析) 조사(調査)한 결과(結果)는 다음과 같다. 1) 과즙중(果汁中)에서 동정(同定)된 amino산(酸) 종류(種類)로는 aspartic acid, glutamic acid, alanine, serine, asparagine, lysine, valine, glycine, methionine, histidine, thereonine, leucine, isoleucine, proline, arginine의 15개(個)였고 그밖에 1개(個)의 unknown이 발견 되었다. 2) 토마토, 복숭아, 자두 중(中)에는 10개(個)의 amino산(酸)이 수박과 참외(가식부(可食部))중(中)에는 13개(個)의 amino산(酸)이, 그리고 참외(과피부(果皮部))에는 11개(個)의 amino산(酸)이 함유(含有)되었다. 3) 일반적(一般的)으로 이러한 amino산(酸)들은 소량이지만 골고루 함유(含有) 되었다. 4) 토마토에는 glutamic acid와 aspartic acid가 가장 많이 함유(含有)되었고, 수박에는 asparagine과 lysine이, 참외에는 alanine, serine, aspartic acid가 그리고 복숭아와 자두에는 aspartic acid와 serine이 가장 많이 함유(含有)되었다. 5) 과즙중(果汁中) 유리당(遊離糖)은 다같이 glucose, fructose, sucrose, maltose의 4개(個)가 함유(含有)되었고 그중(中) glucose와 fructose는 다량(多量)이고 sucrose, maltose는 소량(少量)이었다.

• 한국산림과학회지
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• 제43권1호
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• pp.31-34
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• 1979

Trichoderma viride SANK 16374호(號) Cellulase에 의(依)한 표고재배폐재(栽培廢材)의 당화(糖化)에 관(關)한 연구(硏究)로서 효소생산(酵素生產)은 액체진탕(液體振盪) 배양법(培養法)에 의(依)하였다. 이와같이 하여 생산(生產)된 조효소액(粗酵素液)을 취(取)하여 유안포화도(硫安飽和度)에 의(依)한 염석효소액(鹽析酵素液)을 공시용(供試用) 효소액(酵素液)으로 사용(使用)하였다. 그리고 환원당(還元糖) 정량(定量)은 DNS법(法)에 의(依)하였다. 1. 표고재배폐재(栽培廢材)의 일반적(一般的) 조성(組成)은 조단백질(粗蛋白質)이 2.26%, 조지방(粗脂肪)이 2.57%, 조섬유(粗纖維)가 44.6%, 회분(灰分)이 5.58%, 리그닌이 13.62%, 가용무질소물(可溶無窒素物)이 23.21%였다. 그리고 아미노산(酸)의 조성분(組成分)과 비타민의 성분(成分)은 (Table 1)과 같다. 2. 표고재배폐재(栽培廢材)를 $190{\pm}5^{\circ}C$에서 45분간(分間) 열처리(熱處理)한 기질(基質)은 Cellulase에 의(依)한 반응(反應)이 48시간(時間)이면 환원당(還元糖) 생성량(生成量)이 최대치(最大値)에 달(達)하였다. 3. 표고재배폐재(栽培廢材)를 $190{\pm}5^{\circ}C$에서 45분간(分間) 열처리(熱處理)한 후(後) 분쇄(粉碎)하여 사용(使用)한 기질(基質)은 환원당(還元糖) 생성량(生成量)이 11.5%이었다. 4. 열처리(熱處理)하지 않은 표고재배폐재(栽培廢材)의 기질(基質)은 cellulase 반응시간(反應時間)이 72시간(時間)에 환원당(還元糖) 생성물(生成物)이 최대치(最大値)에 달(達)하였으며 그 양(量)은 10.1%였다. 5. 각처리별(各處理別) 환원당(還元糖) 생성량(生成量)은 폐재(廢材)를 열처리후(熱處理後) 분쇄(粉碎)한 기질(基質)(11.5%)> 열처리(熱處理)하지 않은 기질(基質)(10.1%)> 분쇄후(粉碎後) 열처리(熱處理)한 기질(基質)(6.9%) 순(順)으로 나타났다. 6. 표고재배폐재(栽培廢材)의 당화(糖化)는 기질(基質)을 열처리후(熱處理後) 분쇄(粉碎)함으로서 더욱 가능(可能)하였다. 그리고 당생성량(糖生成量)이 증대(增大)될 수 있어 당질원료(糖質原料)로 가능(可能)할 것으로 본다.

• 한국식품과학회지
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• 제32권4호
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• pp.902-907
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• 2000

폐기되는 연어 정자로부터 프로타민을 제조하여 프로타민이 가지는 항균성 및 항산화성을 시험하였다. 그 결과 제조시 전처리 방법에 따라 추출 수율이 차이가 있었는데, 초음파와 균질기 전처리에 의한 추출 방법은 수율에 큰 차이를 보이지 않았지만, $80^{\circ}C$로 가열되는 마이크로파 전처리는 다른 전처리 시료에 비해 5%이상 수율이 낮았다. 각 조건별로 제조된 프로타민 시료들의 아미노산 분석 결과, 시판 프로타민의 경우 arginine 함량이 전체 61.1% 정도를 차지하였고, proline 함량은 11% 정도였다. $H_{2}SO_{4}$ 용액으로 균질화하여 추출한 M의 경우 arginine 함량이 19.3% 정도였고, 반면 methionine과 proline이 각각 34.3%, 28.1% 정도를 차지하였으며, 균질화시킨 다음 $H_{2}SO_{4}$ 용액으로 추출한 MC도 시판 프로타민과 유사한 조성을 나타내었다. 마이크로파 전처리 P60 및 초음파 전처리 UU6는 arginine이 각각 60.8%, 52.4%를 차지하였고, P60은 proline 함량이, UU6는 tryptophan 함량이 다소 많은 것이 차이였다. 제조된 프로타민은 곰팡이 이외에 그람양성 및 음성 세균에 대해 항균활성이 있었고, UU6나 P60이 다른 시료에 비해 활성이 높았고, 일부 세균에 대해서는 농도 의존성이 있으며, 시판 제품보다 높은 항균활성을 나타내었다. 프로타민의 항산화성은 전처리 방법에 관계없이 모든 시료에서 확인되었으며, 전처리 방법에 따라 어느정도 차이를 보였다. $EDA_{50}$을 측정한 결과, P60이 $101\;{\mu}g/mL$, UU6가 $410\;{\mu}g/mL$, M이 $520\;{\mu}g/mL$, MC가 $490\;{\mu}g/mL$였으며, 시판 프로타민은 $470\;{\mu}g/mL$였다.

• Asian-Australasian Journal of Animal Sciences
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• 제15권12호
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• pp.1708-1713
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• 2002

Endometrial explants obtained from does between days 13 and 21 of pregnancy were cultured in a modified minimum essential medium in the presence of [$^35S$]methionine and [$^3H$]-leucine. Proteins synthesized and secreted into medium were analyzed by fluorography of two-dimensional polyacrylamide gel electrophoresis and fluorography. No marked qualitative changes in patterns of protein production by caprine endometrium between days 13-21 of pregnancy. At least 11 proteins showed consistently a clear spot or a grouping of spots with characteristic location on two-dimensional gels. A major low molecular weight protein consisted of two major isoforms (pI 5.3-6.0) of similar molecular mass (21 kDa). Limited N-terminal sequence analysis of these two isoforms showed that the protein had complete homology with bovine placental and plasma retinol-binding protein (RBP) over the first 20 amino acids. Through use of the antiserum raised against bovine placental RBP, immunoreactive RBP was detected in cultures conditioned by uterine explants prepared at days 13, 15 and 21 of pregnancy. In the present study, proteins synthesized and secreted by caprine endometrium during periattachment period of early pregnancy were characterized. The pregnant endometrium secreted a number of neutral-to-acidic proteins which constituted, in part, the histotroph. A vitamin A-transport protein, RBP, was identified in cultures conditioned by endometrium of days 13-21 of pregnancy. The uterine endometrium is the only source of retinol for embryonic tissues. The uterine RBP appears to transport retinol locally toward embryonic tissues. Secretion of RBP by caprine endometrium of days 13, 15 and 21 of pregnancy suggested that retinol played an important role in conceptus development during periattachment period of early pregnancy.

• 미생물학회지
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• 제29권1호
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• pp.16-24
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• 1991

The yeast gene THR1 encodes the homoserine kinase (EC 2.7.1.39: HKase) which catalyses the first step of the threonine specific arm at the end of the common pathway for methionine and threonine biosynthesis. A recombinant plasmid pMC3 (12.6 kilobase pairs, vector YCp50) has been cloned into E. coli HB101 from a yeast genomic library through its complementing activity of a thr1 mutation in a yeast recipient strain M39-1D. When subcloned into pMC32 (8.6kbp, vector YRp7) and pMC35 (8.3 kbp, vector YIp5), the HindIII fragment (2.7 kbp) of pMC3 insery was positive in the thrI complementing activity in both yeast and E. coli auxotrophic strains. The linearized pMC35 was introduced into the original recipient yeast strain and the mitotically stable chromosomal integrant was identified among the transformants. Through the tetrad analysis, the integration site of the pMC35 was localized to the region of THR1 structural gene at an expected genetic distance of approximately 11.1 cM from the ARG4 locus on the right arm of the yeast chromosome VIII. When episomically introduced into the auxotrophic cells and cultured in Thr omission liquid medium, the cloned gene overexpressed the HKase in the order of thirteen to fifteenfold, as compared with a wildtype. HKase levels are repressed by addition of threonine at the amount of 300 mg/l and 1, 190 mg/l for pMC32 and pMC3, respectively. Data from genetic analysis and HKase response thus support that the cloned HindIII yeast DNA fragment contains the yeast thr1 structural gene, along with necessary regulatory components for control of its proper expression.

• Journal of Microbiology and Biotechnology
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• 제30권12호
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• pp.1905-1911
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• 2020

Homoserine dehydrogenase (HSD) catalyzes the reversible conversion of ʟ-aspartate-4-semialdehyde to ʟ-homoserine in the aspartate pathway for the biosynthesis of lysine, methionine, threonine, and isoleucine. HSD has attracted great attention for medical and industrial purposes due to its recognized application in the development of pesticides and is being utilized in the large scale production of ʟ-lysine. In this study, HSD from Bacillus subtilis (BsHSD) was overexpressed in Escherichia coli and purified to homogeneity for biochemical characterization. We examined the enzymatic activity of BsHSD for ʟ-homoserine oxidation and found that BsHSD exclusively prefers NADP+ to NAD+ and that its activity was maximal at pH 9.0 and in the presence of 0.4 M NaCl. By kinetic analysis, Km values for ʟ-homoserine and NADP+ were found to be 35.08 ± 2.91 mM and 0.39 ± 0.05 mM, respectively, and the Vmax values were 2.72 ± 0.06 μmol/min-1 mg-1 and 2.79 ± 0.11 μmol/min-1 mg-1, respectively. The apparent molecular mass determined with size-exclusion chromatography indicated that BsHSD forms a tetramer, in contrast to the previously reported dimeric HSDs from other organisms. This novel oligomeric assembly can be attributed to the additional C-terminal ACT domain of BsHSD. Thermal denaturation monitoring by circular dichroism spectroscopy was used to determine its melting temperature, which was 54.8℃. The molecular and biochemical features of BsHSD revealed in this study may lay the foundation for future studies on amino acid metabolism and its application for industrial and medical purposes.

• KSBB Journal
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• 제14권5호
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• pp.578-584
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• 1999

겨우살이가 가지고 있는 lectin의 약리작용의 가능성에 대한 연구의 일환으로, lectin을 분리 . 정제하였으며, 분자량, subunit수, 탄수화물의 조성, 단백질의 아미노산 조성, 적혈구 응집력, 탄수화물 특이성, pH 및 열 안정성등의 생화학적 특성을 연구하였다. Lectin의 분리는 0.15 M NaCl에 의한 추출, $(NH_4)_2SO_4$ 침전, sepharose 4B affinity chromatography 및 sephadex G-150 gel filtration에 의해 11.64배 정제에 0.14%의 수율을 획득하였으며, HPLC와 전기영동을 이용하여 순도를 검정하였다. Gel filtration에 의해 분석된 lectin의 분자량은 124,000 Da이였고, SDS-PAGE에 의해 분자량이 30,000과 32,000 Da인 2개의 band로 나타나서 각각 2개의 subunit를 갖는 tetramer로 확인되었다. 겨우살이 lectin의 탄수화물은 glucose, fructose, arabinose 및 xylose를 함유하고 있다. 또한 phenlylalanine, lysine, tyrosine, aspartic acid가 비교적 풍부하였고 methionine, alanine, arginine은 비교적 적었다. Lectin은 적혈구에 종 특이성을 나타내는데 겨우살이의 혈구응집반응에서는 사람혈액형간의 차이는 없었으며, 쥐에서 가장 높았고 소에서 가장 낮았으므로 동물 종간에 대한 특이성은 뚜렸하였다. Lectin은 당 특이성을 가지는데, D-galactose, D-mannose, D-lactose 및 D-raffinose에 대해 특이성을 나타내었다. 겨우살이 lectin은 pH4~7에서 안정하였으며, 5$0^{\circ}C$까지는 10~30분 열처리해도 활성이 유지되는 열 안정성 단백질이었다.

• 한국수산과학회지
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• 제35권3호
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• pp.247-252
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• 2002

어육 단백질로부터 가식성 필름을 제조하기 위하여 명태와 고등어로부터 최적 단백질 추출조건을 구명하고, 필름 제조용 용액의 단백질 농도, pH 및 온도가 필름의 물성에 미치는 영향을 조사하였다. 명태의 일반성분 함량은 수분 $79.62\%$, 조단백질 $18.2\%$, 조지방 $0.6\%$, 회분 $1.3\%$였으며, 고등어는 수분 $69.1\%$, 조단백질 $20.1\%$, 조지방 $9.5\%$, 회분 $1.3\%$로서 명태가 고등어에 비하여 수분함량은 높고 조단백질과 조지방 함량은 낮았다. 또한, 황함유 아미노산인 cysteine과 methionine 함량은 명태 771mg/100 g, 고등어 746mg/ 100 g 으로서 이들 아미노산의 비율은 그다지 높지 않았다 명태와 고등어로부터 가용성 단백질의 추출률은 pH 12에서 가장 높았으며. 다음으로 pH 2, 11의 순이었고, 중성부근에서는 추출률이 낮았다. 한편 추출된 가용성 단백질을 등전점 분리시켰을 때, 단백질의 회수율은 명태는 pH 4.8 ($79.8\%$)에서, 고등어는 pH 5.0 ($64.1\%$)에서 가장 높았다. 어육 단백질 필름은 증류수 100mL에 단백질 4g (glycerol 1.6g) 을 첨가하여 pH 10.0로 조정한 다음 $90^{\circ}C$로 가열하여 제조하는 것이 물리적 특성면에서 가장 우수하였다.

• 한국유기농업학회지
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• 제11권1호
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• pp.67-77
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• 2003

본 연구는 계란을 이용한 눈꽃 동충하초 재배방법을 확립하기 위해서 실시되었다. 계란에서의 눈꽃 동충하초의 자실체는 22～26$^{\circ}C$에서 성장하였다. 접종 후 60일째의 배양기간중 계란 한개에서 건물기준으로 5.1g(평균길이 7.2cm, 199.6개 자실체)의 인공 눈꽃 동충하초 자실체가 생산되었다. 생산된 눈꽃 동충하초 자실체내의 영양소 함량 비교를 위해서 시판용 누에 동충하초도 동시에 이용되었다. 계란과 누에에서 생산된 각각의 눈꽃 동충하초의 자실체중의 코디세핀(Cordycepin)의 함량은 유의한 차이는 인정되지 않았다. 계란에서 생산된 눈꽃 동충하초의 자실체중에는 조지방의 함량이 누에에서 생산된 것보다 유의하게 많았다(P<0.05). 눈꽃 동충하초 자실체중의 Mn 과 Cu 함량은 누에에서 생산된 눈꽃 동충하초에서 높았지만(P<0.05), Na, Mg, Fe 및 Zn 함량은 계란에서 생산된 눈꽃 동충하초에서 많았다(P<0.05). Glycine, Arginine 및 Proline 함량은 누에에서 생산된 눈꽃 동충하초 자실체에서 높은 경향이, Serine, Cysten, Menthionine, isoleucine 및 Phenylalanin의 함량은 계란에서 생산된 눈꽃 동충하초에서 높아지는 경향이 인정되었다. 본 연구는 계란에서 인공적으로 눈꽃 동충하초의 대량생산을 가능하게 하였다.