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Role of p38 MAPK in the Regulation of Apoptosis Signaling Induced by TNF-α in Differentiated PC12 Cells

  • Park, Jung-Gyu;Yuk, Youn-Jung;Rhim, Hye-When;Yi, Seh-Yoon;Yoo, Young-Sook
    • BMB Reports
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    • 제35권3호
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    • pp.267-272
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    • 2002
  • TNF-$\alpha$ elicits various responses including apoptosis, proliferation, and differentiation according to cell type. In neuronal PC12 cells, TNF-$\alpha$ induces moderate apoptosis while lipopolysarccaharide or trophic factor deprivation can potentiate apoptosis that is induced by TNF-$\alpha$. TNF-$\alpha$ initiates various signal transduction pathways leading to the activation of the caspase family, NF-${\kappa}B$, Jun N-terminal kinase, and p38 MAPK via the death domain that contains the TNF-$\alpha$ receptor. Inhibition of translation using cycloheximide greatly enhanced the apoptotic effect of TNF-$\alpha$. This implies that the induction of anti-apoptotic genes for survival by TNF-$\alpha$ may be able to protect PC12 cells from apoptosis. Accordingly, Bcl-2, an anti-apoptotic genes for survival by TNF-$\alpha$ may be able to protect PC12 cells from apoptosis. Accordingly, Bcl-2, an anti-apoptotic Bcl-2 family member, was highly expressed in response to TNF-$\alpha$. In this study, we examined the anti-apoptotic role of p38 MAPK that is activated by TNF-$\alpha$ in neuronal PC12 cells. The phosphorylation of p38 MAPK in response to TNF-$\alpha$ slowly increased and lasted several hours in the PC12 cell and DRG neuron. This specific inhibitor of p38 MAPK, SB202190, significantly enhanced the apoptosis that was induced by TNF-$\alpha$ in PC12 cells. This indicates that the activation of p38 MAPK could protect PC12 cells from apoptosis since there is no known role of p38 MAPK in resoonse to TNF-$\alpha$ in neuron. This discovery could be evidence for the neuroprotective role of the p38 MAPK.

전분을 기질로 한 이상계에서 Amylase의 당전이반응에 의한 배당체의 합성 (Synthesis of Glycosides by Transglycosylation of $\alpha$-Amylase from Soluble Starch in Water-Organic Two Phase System)

  • 박종이;이재동;이태호;장경립
    • 미생물학회지
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    • 제35권1호
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    • pp.1-6
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    • 1999
  • $\alpha$-Amylase 의 당전이반응에 의해 가용성전분으로부터 benzylalcohol-$\alpha$-glucoside(BG)를 합성하였다. 이 때 glycosyl 기의 공여체인 가용성전분 1%, glycosyl 기의 수용체인 benzylalcohol 90%, pH 5.0의 0.1M citrate 완충액 10%, Aspergillus oryzae 유래의 $\alpha$-amylase 10 unit를 함유하는 이상계(water-organic two phase )에서 당전이반응이 가장 효율적으로 일어났으며, $40^{\circ}C$, 80시간 정도의 반응에서 전문 10mg 으로부터 약 4mg 의 BG가 합성되었다. 합성초기에는 benzylalcohol-$\alpha$-maltoside(BM) 가 주로 생산되었다가 반응시간이 경과함에 따라 이는 가수분해되고 최종적으로는 BG 만이 생성되었다. 합성물질은 모두 환원력이 없고 $\alpha$-glucosidase 에 의해 가수분해되었드며 ESI-Mass 에 의해 분자량이 각각 270, 432로 측정되어 그 구조가 BG, BM 임을 확인하였다.

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백출추출물이 TNF-α 유도 지방세포염증과 인슐린저항성 회복에 미치는 영향 (Ameliorating Effects of Atractylodes macrocephala Koidzumi on TNF-α-induced 3T3-L1 Adipocyte Dysfunction)

  • 빈창현;송춘호
    • Korean Journal of Acupuncture
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    • 제32권3호
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    • pp.116-123
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    • 2015
  • Objectives : The present study was designed to investigate effects and molecular mechanisms of Atractylodes macrocephala Koidzumi extracts(AMK) on the improvement of adipocyte dysfunction induced by TNF-${\alpha}$ in 3T3-L1 adipocytes. We examined whether AMK could directly influence the inflammation and insulin resistance in 3T3-L1 adipocytes. Methods : Potential roles of AMK in the lipolysis, production of inflammatory adipokines and ROS, expression and phosphorylation of ERK, JNK, and $I{\kappa}B{\alpha}$ protein, and expression of $PPAR{\gamma}$ and C/EBP${\alpha}$ were investigated in this study. Results : Our data demonstrated that TNF-${\alpha}$ significantly increased lipolysis, levels of MCP-1, IL-6, and ROS and phosphorylation of ERK, JNK, and $I{\kappa}B{\alpha}$ protein, while TNF-${\alpha}$ reduced the expression of $PPAR{\gamma}$ and C/EBP${\alpha}$ in adipocytes, suggesting that TNF-${\alpha}$ induced a condition with the occurrence of inflammation and insulin resistance. Those alterations induced by TNF-${\alpha}$ were prevented by the treatment of AMK. AMK down-regulated the phosphorylation of ERK, JNK, and $I{\kappa}B{\alpha}$ protein and up-regulated the expression of $PPAR{\gamma}$ and C/EBP${\alpha}$ on TNF-${\alpha}$-induced inflammation and insulin resistance. Conclusions : Thus, our results indicate that AMK can be used to prevent from the TNF-${\alpha}$-induced adipocyte dysfunction through MAPK, $NF{\kappa}B$ and $PPAR{\gamma}$ pathways.

김천규석으로부터 제조한 부분안정화 $\alpha$-Sialon의 기계적 물성 (Mechanical Properties of Partially Stabilized $\alpha$-Sialon Synthesized from Kimcheon Quartzite)

  • 서원선;조덕호;이홍림
    • 한국세라믹학회지
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    • 제25권2호
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    • pp.143-153
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    • 1988
  • 김천규석으로부터 합성한 질화규소와 시약급의 AIN과 $Y_2O_3$를 출발원료로 하여 $Si_3N_4-0.1Y_2O_3-0.9AIN$의 tie line에서 X=0.6, 0.4(금속고용량)인 조성으로부터 AIN 의 양을 감소시킨 조성과 $Y_2O_3$를 증가시키는 조성으로 1750~1800도에서 소결시켜 부분 안정화 $\alpha$-Sialon을 제조하였다. $\alpha$-Sialon 생성에는 $Y_2O_3$ 첨가량보다 AIN 첨가량에 밀접하게 관련되며 AIN은 $\beta$단위격자 보다 $\alpha$ 단위격자로 우선적으로 고용되었으며 $Y_2O_3$가 과잉으로 첨가된 조성에서는 melillite 형성과 입자 조대화 및 $\alpha$-Sialon의 분배로 인하여 yttrium silicide 와 금속 Si를 형성하였으며 기계적 물성은 저하하였다. 본 실험에서 얻은 기계적 물성의 최고 값은 모두 1780도에서 얻어졌으며 그 값은 꺽임강도 723MPa, 파괴 인성 4.5MN/m^3/2, 경도 19.3GPa이었다.

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Differential Coupling of G$\alpha$q Family of G-protein to Muscarinic $M_1$ Receptor and Neurokinin-2-Receptor

  • Lee, Chang-Ho;Shin, In-Chul;Kang, Ju-Seop;Koh, Hyun-Chul;Ha, Ji-Hee;Min, Chul-Ki
    • Archives of Pharmacal Research
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    • 제21권4호
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    • pp.423-428
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    • 1998
  • The ligand binding signals to a wide variety of seven transmembrane cell surface receptors are transduced into intracellular signals through heterotrimeric G-proteins. Recently, there have been reports which show diverse coupling patterns of ligand-activated receptors to the members of Gq family $\alpha$ subunits. In order to shed some light on these complex signal processing networks, interactions between G$\alpha$q family of G protein and neurokinin-2 receptor as well as muscarinic M$_{1}$ receptor, which are considered to be new thearpeutic targets in asthma, were studied. Using washed membranes from Cos-7 cells co-transfected with different G.alpha.q and receptor cDNAs, the receptors were stimulated with various concentrations of carbachol and neurokinin A and the agonist-dependent release of [$^3H$]inositol phosphates through phospholipase C beta-1 activation was measured. Differential coupling of Gaq family of G-protein to muscarinic M$_{1}$ receptor and neurokinin-2 receptor was observed. The neurokinin-2 receptor shows a ligand-mediated response in membranes co-transfected with G$\alpha$q, G$\alpha$11 and G$\alpha$14 but not G$\alpha$16 and the ability of the muscarinic $M_1$ receptor to activate phospholipase C through G$\alpha$/11 but not G$\alpha$14 and G$\alpha$16 was demonstrated. Clearly G$\alpha$/11 can couple $\M_1$ and neurokinin-2 receptor to activate phospholipase C. But, there are differences in the relative coupling of the G$\alpha$14 and G$\alpha$16 subunits to these receptors.

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싸리버섯 메탄올 추출물이 벤조피렌을 투여한 마우스의 항산화 효소 활성에 미치는 영향 (Effect of Ramaria botrytis Methanol Extract on Antioxidant Enzyme Activities in $Benzo({\alpha})Pyrene-treated$ Mice)

  • 김현정;이갑랑
    • 한국식품과학회지
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    • 제35권2호
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    • pp.286-290
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    • 2003
  • 싸리버섯 메탄올 추출물의 항산화 효능을 DPPH법에 의한 free radical 소거작용능 및 $B({\alpha})P$로 간 독성이 유발된 마우스에서 항산화 효소, 글루타치온 및 과산화지질 함량 변화에 미치는 영향을 살펴보았다. 먼저 싸리버섯 메탄올 추출물의 항산화능을 DPPH radical 소거 작용법으로 시험한 결과 싸리버섯 추출물은 강한 자유라디칼 소거 효과를 나타내었다. 또한 $B({\alpha})P$투여로 인한 간 조직중의 SOD, catalase 그리고 GSH-Px의 활성은 유의적으로 증가되었다가, 싸리버섯 메탄올 추출물의 전 처리로 이들 활성이 유의적으로 감소하였다. 반면, GST 활성과 간 조직중의 글루타치온 함량은 $B({\alpha})P$ 단독군에서는 감소되었다가 싸리버섯 메탄올 추출물 투여시 유의적인 증가를 보였다. 그러나 지질과산화물 함량은 $B({\alpha})P$ 투여시 증가되었다가 싸리버섯 메탄올 추출물의 투여시 유의적으로 감소되었다. 이상의 결과로 싸리버섯 메탄올 추출물은 항산화계 효소의 활성 증가로 인한 $B({\alpha})P$에 의한 간 손상에 대한 보호효과를 가지는 것으로 사료된다.

산사(Crataegi Fructus) 추출물로부터 ${\alpha}-amylase$${\alpha}-glucosidase$ 저해 물질 분리 및 동정 (Isolation and Identification of Inhibitory Compound from Crataegi Fructus on ${\alpha}-amylase$ and ${\alpha}-glucosidase$)

  • 김명욱;조영제;김정환
    • Applied Biological Chemistry
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    • 제50권3호
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    • pp.204-209
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    • 2007
  • 산사 추출물로부터 ${\alpha}-amylase$, ${\alpha}-glucosidase$ 저해활성을 탐색하고 Sephadex LH-20($5{\times}45$ cm)와 MCI-gel CHP-20를 이용하여 저해활성 물질을 정제하고 구조분석을 하였다. 산사 추출물의 페놀화합물의 함량은 물 추출물에서 22.5 mg/g, 60% ethanol 추출물에서 19.2 mg/g으로 나타났으며, 산사 물 추출물 (200 ${\mu}g/ml$)에서 ${\alpha}-amylase$, ${\alpha}-glucosidase$ 저해활성이 각각 100%와 82.6%로 나타났으나, 60% ethanol 추출물(200 ${\mu}g/ml$)에서는 ${\alpha}-glucosidase$ 저해활성이 12%로 낮은 저해활성을 나타내어 산사 물 추출물을 Sephadex LH-20를 이용하여 분획한 결과 I, II, III, IV의 4가지 분획물을 획득하고 다시 Sephadex LH-20과 MCI-gel을 이용하여 nomal phase type인 $EtOH{\rightarrow}H_2O$와 reverse phase type인 $H_2O{\rightarrow}MeOH$로 유기용매의 농도를 증가 시키며 용출하여 A, B, C, D의 compounds를 얻었다. 4가지 compound 중 compound C(200 ${\mu}g/ml$)가 ${\alpha}$-amylase, ${\alpha}$-glucosidase 저해활성이 각각 97.6%, 97.7%로 가장 높게 나타났으며, FAB-MS, NMR과 IR spectrum을 분석한 결과 chlorogenic acid로 동정되었다.

백혈병세포에서 종양괴사인자에 의한 PTEN 발현증가 (Tumor Necrosis Factor-Alpha $(TNF-{\alpha})$ Induces PTEN Expression in HL-60 Cells)

  • 이성호;박철홍;김병수
    • 한국식품위생안전성학회지
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    • 제21권3호
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    • pp.181-188
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    • 2006
  • Tumor necrosis ftctor-alpha$(TNF-{\alpha})$는 세포의 고사, 염증 및 면역 등의 다양한 생물학적 기능에 대한 역할을 한다. PTEN 역시 세포의 성장과 증식 그리고 세포의 유주와 분화 등의 세포학적인 다양한 기능을 갖는다 그러므로 이들 두 분자들 사이의 상호관계가 있을 것으로 제안되고 있으며, $TNF-{\alpha}$는 사람의 대장세포 주인 HT-29에서 nuclear factor-kappa $B(NF-{\kappa}B)$ 경로를 통해 PTEN downregulate 기능이 있는 것으로 알려져 왔다. 그러나 저자 등은 본 연구에서 HL-60 cells에서 $TNF-{\alpha}$$NF-{\kappa}B$를 통해 PTEN를 upregulates하는 기존의 반대 현상을 확인하였다. $TNF-{\alpha}$는 HL-60 cells에서 time과 dose의존성 방법으로 PTEN 발현을 증가시켰지만 반응은 p65 anisense oligonucleotide 또는 pyrrolidine dithiocarbamate(PDTC)으로 $NF-{\kappa}B$를 분해함으로 파괴되었다. 따라서 저자 등은 $TNF-{\alpha}$$NF-{\kappa}B$경로를 활성화시킴을 확인하였고, $TNF-{\alpha}$를 처리 할 경우 핵에 대하여 p65 전위에 의해 $TNF-{\alpha}$가 활성화됨을 증명하였다. 결국 HL-60세포에서 $NF-{\kappa}B$의 활성화에 따라 PTEN 발현의 upregulation이 유도되는 것으로 결론지었다.

Changes of the Structural and Biomechanical Properties of the Bovine Pericardium after the Removal of ${\alpha}$-Gal Epitopes by Decellularization and ${\alpha}$-Galactosidase Treatment

  • Nam, Jinhae;Choi, Sun-Young;Sung, Si-Chan;Lim, Hong-Gook;Park, Seong-Sik;Kim, Soo-Hwan;Kim, Yong Jin
    • Journal of Chest Surgery
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    • 제45권6호
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    • pp.380-389
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    • 2012
  • Background: Bovine pericardium is one of the most widely used materials in bioprosthetic heart valves. Immunologic responses have been implicated as potential causes of limited durability of xenogenic valves. This study aimed to determine the effectiveness of decellularization and ${\alpha}$-galactosidase (${\alpha}$-gal) to remove major xenoreactive antigens from xenogenic tissues. Materials and Methods: Recombinant Bacteroides thetaiotaomicron (B. thetaiotaomicron) ${\alpha}$-gal or decellularization, or both were used to remove ${\alpha}$-gal from bovine pericardium. It was confirmed by ${\alpha}$-gal-bovine serum albumin-based enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA), high-performance anion exchange chromatography, flow cytometry, 3,3'-diaminobenzidine-staining, and lectin-based ELISA. The mechanical properties of bovine pericardium after decellularization or ${\alpha}$-gal treatment were investigated by tests of tensile-strength, permeability, and compliance. Collagen fiber rearrangement was also evaluated by a 20,000${\times}$ transmission electron microscope (TEM). Results: Recombinant B. thetaiotaomicron ${\alpha}$-gal could effectively remove ${\alpha}$-gal from bovine pericardium B. thetaiotaomicron (0.1 U/mL, pH 7.2) while recombinant human ${\alpha}$-gal removed it recombinant human ${\alpha}$-gal (10 U/mL, pH 5.0). There was no difference in the mechanical properties of fresh and recombinant ${\alpha}$-gal-treated bovine pericardium. Furthermore, the TEM findings demonstrated that recombinant ${\alpha}$-gal made no difference in the arrangement of collagen fiber bundles with decellularization. Conclusion: Recombinant B. thetaiotaomicron ${\alpha}$-gal effectively removed ${\alpha}$-gal from bovine pericardium with a small amount under physiological conditions compared to human recombinant ${\alpha}$-gal, which may alleviate the harmful xenoreactive immunologic responses of ${\alpha}$-gal. Recombinant ${\alpha}$-gal treatment had no adverse effects on the mechanical properties of bovine pericardium.

대전기영동법(帶電氣泳動法)에 의한 유청단백질(乳淸蛋白質)에 관(關)한 연구(硏究) (Studies on Milk Protein by Zone Electrophoresis)

  • 조덕봉;남현근
    • 한국식품영양과학회지
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    • 제5권1호
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    • pp.25-30
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    • 1976
  • 본연구(本硏究)에서는 한우유(韓牛乳)와 Holstein cow milk의 단백질(蛋白質)을 Zone electrophoresis에 의하여 분석(分析)하여 그 결과(結果)를 다음과 같이 얻었다. (1) 한우유(韓牛乳)와 Holstein cow milk의 이화학적(理化學的) 성질(性質)이 Table 1, Table 2에 나타나 있다. (2) 한우유(韓牛乳)의 유청단백질(乳淸蛋白質)의 단백질(蛋白質) 분포(分布)는 Lactoalbumin 1.74mg %, Alpha-1 globulin 1.19mg%, Alpha-2 globulin 0.68mg %, Beta globulin 2.57mg %, Gamma globulin 0.93mg %이었다. (3) Holstein cow milk protein의 단백질(蛋白質) 분포(分布)는 Lactoalbumin 1.23mg %, Alpha-1 globulin 1.93mg %, Alpha-2 globulin 0.86mg %, Beta globulin 2.56mg %, Gamma globulin 1.74mg %를 얻었다. (4) 한우(韓牛)(female)와 Holstein cow(male)와의 교잡종인 F-1인 유청단백질(乳淸蛋白質) 분포(分布)는 Lactoalbumin 1.30mg %, Alpha-1 globulin 1.58mg %, Alpha-2 globulin 2.46mg %, Beta globulin 1.39mg %이었고 F-2의 그것은 Lactoalbumin 1.57mg %, Alpha-1 globulin 1.74mg %, Alpha-2 globulin 2.19mg %, Beta globulin 1.17mg %, F-4에서는 Lactoalbumin 2.46mg %, Alpha-1 globulin 1.24mg %, Alpha-2 globulin 1.57mg %, Beta globulin 1.74mg %를 각각(各各) 얻었다.

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