• 제목/요약/키워드: $V_{max}$

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유전자 재조합 기술에 의하여 제조된 인간 ${\beta}-carotene$ 15,15'-dioxygenase의 반응특성 (Characterization of Human ${\beta}-Carotene$ 15,15-dioxygenase Isolated from Recombinant Escherichia coli)

  • 신원필;장판식
    • 한국식품과학회지
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    • 제36권3호
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    • pp.440-447
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    • 2004
  • 본 연구에서는 유전자 재조합 기술에 의해 제조된 ${\beta}-carotene$ 15,15'-dioxygenase의 반응특성 및 효소 kinetics를 규명하였다. ${\beta}-carotene$ 15,15'-dioxygenase 효소반응을 위한 최적 온도 및 pH를 측정한 결과, 최적 온도는 $40^{\circ}C$로 판명되었으며 최적 pH 는 9.0이었다. 저장 pH 6.0-9.0 범위에서 안정하였으며, pH 11에서도 80% 이상의 활성을 보이는 호알칼리성 효소임을 확인하였다. 온도 저장성을 확인한 결과, $35^{\circ}C$에서의 효소활성 반감기가 40분으로서 열에 민감한 것으로 판단되었다. 한편, ferrous ion-chelating agent와 sulfhydryl-binding agent를 사용하여 ${\beta}-carotene$ 15,15'-dioxygenase에 미치는 영향을 살펴 보았다. Ferrousion-chelating agent인 ${\alpha},{\alpha}'-dipyridyl$과 1,10-phenanthroline은 $1{\times}10^{-4}$ M에서 최소 저해농도를 형성하였으며, sulfhydryl-binding agent인 iodoacetamide와 PCMB는 $1{\times}10^{-3}$ M에서 N-ethylmaleimide은 $1{\times}10^{-4}$} M에서 최소저해농도를 형성함을 확인할 수 있었다. 본 연구에서의 효소반응은 Michaelis-Menten 곡선을 따름을 확인하였으며, Hanes-Woolf 작도법에 따른 결과, ${\beta}-carotene$ 15,15'-dioxygenase 효소의 $K_{m}$$V_{max}$ 값은 각각 $3.39{\times}10^{-6}$ 및 1.2 pmol/mg protein/min인 것으로 산출되었다.

벼 HMG-CoA 환원효소의 특성연구 (Characterization and Purification of a Microsomal 3-Hydroxy-3-Methylglutaryl-CoA Reductase in Rice Seedling)

  • 김제현;백융기;김종범;김종국;황영수;하선화
    • Applied Biological Chemistry
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    • 제41권1호
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    • pp.47-52
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    • 1998
  • 3-Hydroxy-3-methylglutaryl-coenzyme A (HMG-CoA) 환원효소는 식물의 병원균 방어물질 (phytoalexin), 광합성 색소 (the phytol of chlorophyll), 성장 호르몬 (abscisic acid와 gibberellin 등) 및 스테롤 (phytosterol) 등의 생합성에 관여하는 주효소이다. 암조건 하에서 발아 후 4일째의 벼 유묘 microsome을 재료로 비이온성 detergent 인 Brij W-1 (final 0.4%)을 사용하여 가용화 시킨 후, DEAE-Sephadex A-50 크로마토그래피 칼럼과 hexaneagarose를 matrix로 기질인 HMG-CoA를 결합시켜 제조한 친화성 크로마토그래피 칼럼을 이용하여 세포막 결합효소인 HMG-CoA 환원효소를 정제하였다. 정제된 HMG-CoA 환원효소의 최종 회수율은 7.14% 였고, 분자량은 10% SDS-PAGE에서 55 kDa이였다 HMG-CoA 환원효소의 최적 반응 온도는 $37^{\circ}C$, 최적 반응 pH는 6.9였고, 기질인 HMG- CoA에 대한 HMG-CoA 환원효소의 $K_m$$V_{max}$ 값은 $180\;{\mu}M$과 107 pmol/mg, 수소공여체인 NADPH에 대한 $K_m$$V_{max}$값은 $810\;{\mu}M$과 32.1 pmol/min/mg이였다.

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조류에 의한 유기인산염분해효소의 Kinetic Parameters에 관한 연구 (A Study on the Kinetic Parameters of Alkaline Phosphatase by Algae)

  • 김범철;최광순
    • 생태와환경
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    • 제33권4호통권92호
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    • pp.380-386
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    • 2000
  • 순수배양한 조류와 자연군집의 식물플랑크톤을 대상으로 유기인삼염해분해효소의 kinectic parameter를 비교하였고, 용존무기인의 농도와 각 parameter와의 관계를 알아보았다. 기질과의 친화력을 나타내는 AP$_{ase}$의 K$_{m}$은 조류의 종마다 매우 상이한 값을 보였다. Chlorella sp.를 제외한 녹조류가 다른 종에 비해 큰 K$_{m}$을 보였고, 규조류와 Chlorella sp.에서 작은 K$_{m}$을 보였다. 순수배양한 남조류 Anabaena flos-aquae에서 extracelluar free enzyme 의 K$_{m}$이 cell-bound enzyme의 K$_{m}$보다 작았다. 자연군집인 소양호에서는 남조류 Anabaena sp. 가 우점하였던 여름의 식물플랑크톤의 K$_{m}$이 규조류가 우점하였던 봄의 군집보다 컸다. AP$_{ase}$ 활성도의 V$_{max}$는 수중의 DIP 농도보다는 식물플랑크톤의 세포내 인의 함량에 직접적인 영향을 받는 것으로 나타났다. 소양호에서 가을부터 봄까지 extracelluar free enzyme의 활성도가 총 AP$_{ase}$ 활성도의 36${\sim}$97%의 기여를 하였는데, 이는 이 시기에 extracelluar free enzyme이 호수의 인순환에서 매우 중요한 요인으로 작용한다는 것을 시사한다. 그리고 extracelluar free enzyme과 총 AP$_{ase}$의 K$_{m}$이 거의 비슷하였는데, 이는 extracelluar free enzyme이 조류로부터 기인되었기 때문으로 사료된다.

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Kinetics of a Cloned Special Ginsenosidase Hydrolyzing 3-O-Glucoside of Multi-Protopanaxadiol-Type Ginsenosides, Named Ginsenosidase Type III

  • Jin, Xue-Feng;Yu, Hong-Shan;Wang, Dong-Ming;Liu, Ting-Qiang;Liu, Chun-Ying;An, Dong-Shan;Im, Wan-Taek;Kim, Song-Gun;Jin, Feng-Xie
    • Journal of Microbiology and Biotechnology
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    • 제22권3호
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    • pp.343-351
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    • 2012
  • In this paper, the kinetics of a cloned special glucosidase, named ginsenosidase type III hydrolyzing 3-O-glucoside of multi-protopanaxadiol (PPD)-type ginsenosides, were investigated. The gene (bgpA) encoding this enzyme was cloned from a Terrabacter ginsenosidimutans strain and then expressed in E. coli cells. Ginsenosidase type III was able to hydrolyze 3-O-glucoside of multi-PPD-type ginsenosides. For instance, it was able to hydrolyze the 3-O-${\beta}$-D-(1${\rightarrow}$2)-glucopyranosyl of Rb1 to gypenoside XVII, and then to further hydrolyze the 3-O-${\beta}$-D-glucopyranosyl of gypenoside XVII to gypenoside LXXV. Similarly, the enzyme could hydrolyze the glucopyranosyls linked to the 3-O-position of Rb2, Rc, Rd, Rb3, and Rg3. With a larger enzyme reaction $K_m$ value, there was a slower enzyme reaction speed; and the larger the enzyme reaction $V_{max}$ value, the faster the enzyme reaction speed was. The $K_m$ values from small to large were 3.85 mM for Rc, 4.08 mM for Rb1, 8.85 mM for Rb3, 9.09 mM for Rb2, 9.70 mM for Rg3(S), 11.4 mM for Rd and 12.9 mM for F2; and $V_{max}$ value from large to small was 23.2 mM/h for Rc, 16.6 mM/h for Rb1, 14.6 mM/h for Rb3, 14.3 mM/h for Rb2, 1.81mM/h for Rg3(S), 1.40 mM/h for Rd, and 0.41 mM/h for F2. According to the $V_{max}$ and $K_m$ values of the ginsenosidase type III, the hydrolysis speed of these substrates by the enzyme was Rc>Rb1>Rb3>Rb2>Rg3(S)>Rd>F2 in order.

Biomass Partitioning during Early Growth Stage of Soybean in Response to Planting Time

  • Seong, Rak-Chun
    • 한국작물학회지
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    • 제47권4호
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    • pp.286-291
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    • 2002
  • Seedling establishment of soybean [Glycine max (L.) Merr.] is a critical factor in production system and cultural practices. The objective of this study was to identify the components of soybean seedling developments encompassing planting dates and cultivars that respond to emergence, early growth stage and dry matter accumulation. Three soybean cultivars, Hwangkeumkong, Shinpaldalkong 2, and Pungsannamulkong, were planted at Baegsan silty loam soil. Planting date was May 13, June 3, and June 24 in 2001. Sprinkler irrigation was accompanied with 30mm after seeding for three planting dates. Soybean seedlings were sampled at the growth stages from VE to V5. Days to emergence of soybean seedlings were taken 8 at May 13 and 5 at June 24 plantings. Emergence percentage was over 90 at three planting dates. May 13 planting took 33 days and June 24 planting was 25 days for reaching V5 growth stage. Cotyledon number was decreased after V2. Significant cultivar difference was found in cotyledon dry weight until V2 which differed in seed dry weights at the planting times. Leaf and total dry weights of soybean seedlings were not differed from V1 to V3 among planting dates and cultivars. Leaf water contents were generally ranged 78 to 85%. Branch was appeared from V4. Leaf/stem ratio among cultivars was similar at five growth stages and gradually increased from 2.1 at V1 to 2.8 at V5. The results based on this experiment indicated that seedling establishment of soybean was continued from VE to V3 growth stages affecting mainly by planting date and soil moisture.

콩과식물 종실 추출물의 살균활성 (Fungicidal activities of leguminous seed extracts toward phytopathogenic fungi)

  • 이회선;김병섭;김흥태;조광연;안용준
    • 농약과학회지
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    • 제2권3호
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    • pp.21-27
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    • 1998
  • 25종 콩과식물 종자의 메탄올 추출물을 대상으로 기주식물상의 온실실험조건에서 6종의 주요 식물병원균에 대해 방제효과를 조사한 그 효과는 콩과식물의 종류에 따라 커다란 차이를 보였다. 25종의 공시종자를 5 mg/pot 농도로 처리하였을 때 결명자 (C. obtusifolia), 소리테(G. max var. solitae), 약콩(G. max var. yagkong), 흑태(G. max var. hooktae), (P. multiflorusf), (P. radiatus var. aurea)과 (V. sinensis) 추출물들은 오이잿빛곰팡이병, 밀붉은녹병 및 보리횐가루병에 대하여 80% 이상의 방제효과를 나타내었을 뿐 아니라, 잿빛곰팡이병의 살균제 저항성 균주에 대해서도 높은 활성을 보였다. 그러나, 공시종자 모두 벼도열병, 벼잎집무늬마름병 및 Phytophthora infestans병에 대해서는 거의 활성이 없거나 활성이 낮았다. 이상의 결과로부터 잿빛곰팡이병, 밀녹병 및 보리흰가루병 등에 높은 방제효과를 보인 상기 종자추출물들은 식물병 방제제로서 사용 가능성이 예상되었으며, 특히 살균제 저항성 잿곰팡이병에 높은 활성을 보여 시설원예재배에서 문제시되고 있는 잿빛곰팡이병의 방제에도 크게 이용할 수 있을 것으로 기대되었다.

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표피로 부터 buildup 영역까지 흡수되는 암치료용 방사선의 선량분석 (Analysis of dose from surface to near the buildup region in the therapeutic X-ray beam)

  • Vahc, Young-Woo
    • 한국의학물리학회지:의학물리
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    • 제6권2호
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    • pp.41-50
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    • 1995
  • 암치료용 방사선 (15 MV의 에너지를 갖는 광자선) 속에 있는 흡수선량과 불순전자 또는 산란 광자에 관한 분포를 광자선 면적 크기에 따른 변화와 광자선 면적을 반만 차폐시킨 선속에 대하여 연구 조사하였다. 광자선의 에너지를 15MV로 주어질때 광자선 최대 흡수깊이 $d^{max}$ 값은 광자선의 면적을 증가시키면 시킬수록(5$\times$5 에서 30$\times$30$\textrm{cm}^2$)d$_{max}$ 값은 감소된다. 이는 광자선 즉 방사선을 발생시키는 가속기 기계 속에 있는 여러 부품 (flattening filter, collimator jaws, tray holder,……)과 상호작용하여 형성된 불순전자로 인하여 d$_{max}$ 값이 표피쪽으로 이동되어 buildup 영역에 높은 선량흡수를 갖게 된다. 최대 흡수깊이 값을 계산할 때 이러한 현상을 고려하지 않으면 그릇된 data 값을 갖는다. 대부분의 불순 전자는 광자선 중심에 주로 분포하며 그 진행거리는 30.0mm 이하의 짧은 거리를 갖는다. 이 불순전자가 30.0mm이내(즉 buidup 영역)에 전부 흡수되므로 buidup 영역은 높은 선량흡수를 갖게되어 해를 주게된다. 그러므로 이러한 불순전자를 제거시키므로서 buidup 영역에 낮은 선량 흡수를 갖을 뿐 아니라 d$_{max}$ 값도 역시 깊은 곳까지 이동시켜 치료에 효과적인 방법 이 창출된다.

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Pharmacokinetics of SD-0542, a Novel Histone Deacetylase Inhibitor, in Rats

  • Shin, Beom-Soo;Yoo, Sun-Dong
    • Journal of Pharmaceutical Investigation
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    • 제35권5호
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    • pp.349-353
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    • 2005
  • This study reports the pharmacokinetics of a novel histone deacetylase inhibitor, SD-0542, in rats after i..v. and oral administration. SD-0542 was injected intravenously at doses of 10, 20, and 40 mg/kg. The terminal elimination half-life $(t_{1/2})$, systemic clearance (Cl), and steady-state volume of distribution $(V_{ss})$ remained unaltered as a function of dose, with their values ranging from 2.0-2.5 hr, 157.2-214.1 ml/min/kg, and 11.1-17.5 L/kg, respectively, whereas, the initial serum concentration $(C_0)$ and AUC increased linearly as the dose was increased. Renal excretion of SD-0542 was minimal. Oral pharmacokinetic studies were conducted in rats at a dose of 20 mg/kg. The $T_{max}$, Cl/F, $V_{z}/F$, and $t_{1/2}$ were 2.0 hr, 92864 ml/min/kg, 16331 L/kg, and 2.0 hr, respectively. Taken together, SD-0542 showed linear pharmacokinetics over the i.v. bolus dose range studied. SD-0542 was poorly absorbed, with the absolute oral bioavailability of 0.9%.

40keV 저에너지 전자빔을 이용한 단결정 Si 태양전지의 변환 효율에 관한 연구 (Study about Conversion Efficiency of c-Si Solar Cells Using Low energy(40keV) Electron Beam)

  • 윤정필;강병복;박세준;윤필현;차인수
    • 전력전자학회:학술대회논문집
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    • 전력전자학회 2003년도 춘계전력전자학술대회 논문집(2)
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    • pp.942-948
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    • 2003
  • This paper about the small electron beam irradiator for solar cell's efficiency. Many things are studied by method to increase conversion efficiency of solar cell. We selected electron beam by method for conversion efficiency of solar cell. Energy bands of this electron beam irradiator is 80keV(max.). And, solar cells that apply in this paper are crystal Si. Average efficiency of solar cell that applies in this experiment is 10$\%$. This system manufactured low energy electron beam irradiator. And, electron beam irradiation to solar cell in vacuum chamber of this irradiator. Irradiation area is 20*20 [mm2] by 40[keV].

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Development of Radiopharmaceutical DW-166HC for Anticancer drug

  • Man, Ryu-Jei
    • 한국응용약물학회:학술대회논문집
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    • 한국응용약물학회 1999년도 춘계학술대회
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    • pp.53-61
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    • 1999
  • Radiation therapy has been used for the cancer treatment and radiation synovectomy$\^$1-3)/. There are two kinds of radiation therapy; the external radiation therapy and the internal radiation therapy. Hitherto, the external radiation therapy has been widely used, but for the lack of its selectivity it requires strong radiation dose and causes the irritation and damage of the normal tissue or organ. Therefore many researchers give their interests to the internal radiation therapy in which the radioactive materials are injected directly into the target organ or tissue. Many ${\beta}$-emitting radionuclides have been studied for the application of the internal radiation theraily. Among them, Holmium-166 has the many beneficial physical characteristics for the internal radiation therapy such as appropriate half life (26.8hr), high ${\beta}$ energy (max. 1.85 MeV(51%), 1.77 MeV (48%), mean 0.67MeV), and low ${\gamma}$ energy (0.081MeV) easily detected by ${\gamma}$-camera. In the internal radiation therapy, the administered radioactive materials should be retained in the target long enough to increase the therapeutic effects and avoid the damage in the normal tissue or organ. For this purpose, radionuclides are used as complex form with carriers. Carriers should have a high affinity with radionuclides in vivo and in vitro, so the complex can be evenly distributed in the lesion but can not be leaked out from the lesion.

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