• 제목/요약/키워드: $NH_2$ column

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머캅탄류 검출을 위한 Thiobacillus thioparus가 생산하는 메칠머캅탄 산화효소의 분리 및 정제

  • 김상준;신현재;양지원
    • 한국생물공학회:학술대회논문집
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    • 한국생물공학회 2000년도 춘계학술발표대회
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    • pp.485-488
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    • 2000
  • Thiobacillus thioparus TK-m에서 메칠머캅탄(MM) 가스를 기질로 메칠머캅탄 산화효소(MMO)를 유도할 수 있었으며 DEAE-Sephacel과 Superose 12 컬럼 크로마토그래피를 이용하여 정제하였다. 이때 얻어진 각 효소의 비활성은 각각 374과 1240.8 units/mg-protein이었으며 효소의 최적 온도는 $55\;^{circ}C$였다. 상기 정제된 효소액은 SDS-PAGE상에서 66.1 kDa의 분자량을 가지며 20 mM $(NH_4)_2SO_4$ 혹은 200 mM NaCl의 첨가에 대해 최대 활성을 보였다. 글리세린, 에탄올, 아세톤의 첨가에 대해 효소활성은 부분적으로 불활성화되었으며 메탄올에 대해서는 저해받지 않았다. Purpald 발색법을 이용한 흡광도의 변화는 구강내 존재하는 MM 가스로부터 생성될 수 있는 수 십 nmol의 범위의 포름알데하이드에 대해 눈으로 인지가능한 발색시스템에 사용할 수 있음을 확인하였다.

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Ion Chromatography에 의한 혈액중에서 양ion의 분석에 관한 연구 (Studies on the Analysis of Cations by Ion Chromatography)

  • 박성우;김은호;유재훈;김을환
    • 한국환경보건학회지
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    • 제16권2호
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    • pp.113-119
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    • 1990
  • Many studies on the analysis of cations in blood have been reported. However, no suitable method for the pretreatment of blood for the determination of cations by Ion Chromotography. As a result, pretreatment method that the membrane filtration of plasma a diluted 1 to 100 fold acidified pH 3.5 was found to be the most suitable. The recoveris of monovalent cations in blood were yield 101%(Na$^{+}$). 102%(NH$^{+}_{4}$) and 101%(K$^{+}$) Determinations of divalent cations(Mg and Ca ions) in blood by Ion chromatography were summarized as followed conditions Separator Column : CS$_{3}$. Suppressor Column : CMMS. Eluent conen : 25m M-HCl/2mM-Histidine. Regenerant conen: 40mM-Ba(OH)$_{2}$.

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암모니아 및 아질산성 질소 산화균주의 분리 및 특성 (Isolation and Characterization of Ammonia and Nitrite Nitrogen Oxidizing Strains)

  • 남범식;류원률;이영호;김정목;조무환
    • KSBB Journal
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    • 제14권1호
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    • pp.76-81
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    • 1999
  • Wmogradsky column을 이용하여 자연계 및 폐수처리장 등 10 개소로부터 순수 분리한 균주에 대하여 암모니아성 질소와 아질산성 질소 산화능 및 특성을 조사하였다. 암모니아성 질소의 경우 가장 성능이 우수한 균주는 K회사 폐수처리장에서 분리된 Nitrosomonas KBI이었고 배양 4일 후 91%의 산화력을 보여주었다. 아질산성 질소의 산화능이 가장 우수한 균주는 K회사 폐수처리장에서 분리된 Nitrobacten KB2이었고, 배양 4일후 91%의 산화력을 보여주었다 Nitrobacten KB1의 최적 성장 온도는 $28^{\circ}C$,pH는 7이었다. 초기 배지의 암모니아성 질소의 농도를 조절해 산화 속도를 비교해 본 결과 100mg/L미만일 경우에는 6.7mg/day까지 상승하다가 100mg/L 이상에서는 $28^{\circ}C$,pH는 7이었다. Nitrobacten KB2의 최적 성장 온도는 $28^{\circ}C$,pH는 7이었다. Nitrobacten KB2 균주를 대상으로 초기 아질산성 질소의 농도를 변화시켜 산화 속도를 비교해 본 결과 아질산성 질소의 농도가 증가할수록 산화속도가 증가하였으며, 20mg/L 이상에서는 약 4.2mg/day로 산화속도를 유지되었다.

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가막만 소호해역에서 태풍 전후 수질 변동특성 (The Water Quality in the Soho Coastal Seawaters of Gamak Bay Before and After a Typhoon)

  • 이영식;문성용
    • 한국해양학회지:바다
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    • 제11권3호
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    • pp.117-123
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    • 2006
  • 유기물 증가원인의 파악과 근본적인 대책에 대한 연구의 일환으로 부영양화된 연안해역에 대하여 태풍 발생 전후의 수질변동에 대하여 조사하였다. 용존산소 포화도는 수온과 염분 약층이 형성된 시기에 저층에서 54%이하로 관측되었다. 태풍이 지나간 직후에는 표층과 저층에서 거의 비슷한 용존산소 포화도$(78\sim88%)$가 조사되었다. 그리고, 태풍이 지나간 3일 후 식물플랑크톤이 대량으로 증식한 표층에서 용존산소 포화도가 234%로 아주 높은 값이 관측되었고, 저층(5m)에서도 90%가 조사되었다. 염분이 가장 낮았던 시기에 표층에서 $NH_4-N,\;NO_3-N,\;SiO_2-Si$의 최고 농도가 각각 18.22, 38.90, $52.10{\mu}M$로 조사되었으며, $NH_4-N,\;PO_4-P,\;SiO_2-Si$는 용존산소가 낮은 저층에서도 높게 나타났다. 클로로필은 최고 $311.0{\mu}g^{-1}$가 태풍 후에 관측되었으며, 그 원인 생물은 Scrippsiella trochoidea(42,000 cells $ml^{-1}$)였다. 조류성장잠재능력은 태풍발생 후에 아주 높게 조사되었으며, 항상 질소가 부족한 것으로 조사되었다. 화학적 산소요구량은 최고 $10.55mg\;l^{-1}$였으며, 태풍으로 저층 퇴적물로부터 부유되는 유기 오탁 물질이 화학적 산소요구량 증가에 미치는 기여도는 크지 않은 것으로 보이며, 화학적 산소요구량 증가의 대부분이 식물플랑크톤의 증식에 기인한 것($r^2=0.612$, p=0.000)으로 조사되었다.

해양 패류 렉틴성분 연구 (V) - 반지락조개의 렉틴성분 분리정제에 관한 연구 (Studies on Lectins From Marine Shells (V) - Isolation and Purification of Letin from Tapes philippinarum.)

  • 정시련;김장환;전경희
    • 약학회지
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    • 제31권2호
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    • pp.52-59
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    • 1987
  • The result of the screening of lectins on 28 species of marine shell fishes(mollusks) showed that 10 species (Tapes philippinarum, Cyclosunetta menstrualis, Neptunea arthritica cumingii, Omphalius pfeifferi carpenteri, Chlorostoma argyrostoma turbinatum, Chiorostoma argyrostoma lischkei, Semisulcosira corea, Neptunea polycosta, Babylonica japonica, Noverita didyma) were present hemagglutinating properties to human A, B, and O group, and animal blood erythrocytes. A new lectin from Tapes philippinarum. was isolated and partially characterized. The lectin was purified by (NH$_4$)$_2$SO$_4$ precipitation and ion exchange chromatography on DE 53 column. Six fractions were obtained from DE 53 column by salt gradient elution but only 0.3M, and 0.4M NaCl fraction had strong lectin activity. On its 0.3M NaCl fraction, purity was identified by polyacrylamide gel electrophoresis. This lectin was inhibited by N-acetyl-D-galactosamine. It seems that two kinds of lectin react as antigen by immunochemical studies.

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역상 액체 크로마토그래피에 의한 Ni(II)-Isonitrosoethylacetoacetate Imine 유도체 킬레이트의 용리 메카니즘에 관한 연구 (A Study on the Elution Mechanism of Ni(II)-Isonitrosoethylacetoacetate Imine Chelates by Reversed Phase High Performance Liquid Chromatography)

  • 김인환;최강렬;이만호;강창희;이원
    • 대한화학회지
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    • 제36권5호
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    • pp.697-708
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    • 1992
  • 역상 액체 크로마토그래피에 의하여 Ni(IEAA-NH)(IEAA-NR)(R = H, $CH_3,\;C_2H_5,\;n-C_3H-7,\;n-C_4H9-,\;CH_5-CH_$) 킬레이트의 동시 분리 및 분석을 위한 최적조건을 Micropak MCH-5 분리관을 사용하여 조사하고, 이들의 용리거동에 대한 인자들과의 관계를 검토하였다. 용리액에서 methanol/water의 이성분 용매를 사용하였으며, 모든 금속 킬레이트의 용매 세기 인자는 $0{\le}logk'{\le}1$의 범위임을 확인하였고, 각 금속 킬레이트의 logk'값과 이성분용매계 중의 물의 부피분율을 도시한 결과 직선 관계가 성립하였다. 또한 뱃치법으로 측정한 분포비(Dc)값과 k'값을 도시하여 본 결과 직선 관계가 성립됨으로써 금속 킬레이트의 용리 메카니즘이 주로 소용매성 효과 즉 소수성효과에 기인함을 확인하였다. 한편 금속 킬레이트의 머무름에 미치는 용량 인자와 온도와의 관계를 조사한 결과 좋은 직선성을 나타내고 있으며, 뿐만 아니라 직선의 기울기로부터 엔탈피(${\delta}H$)와 엔탈피(${\delta}S$)를 구하고, 엔탈피와 용량 인자와의 값을 도시한 결과도 직선관계가 성립하였다. 직선의 기울기로부터 구한 보정 온도(${\beta}$)는 $773.47^{\circ}K$이었다. 이 결과 역상 HPLC에서 Ni(II)-Isonitrosoethylacetoacetate imine 킬레이트의 용리 메카니즘의 주로 소수성 효과에 기인함을 재확인 할 수 있었다.

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밤생율(生栗)에 함유된 Peroxidase의 정제 및 특성에 관한 연구 (Purification and Properties of the Peroxidase in Castanea Semen)

  • 오석홍;김용휘;이서나
    • 한국식품과학회지
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    • 제19권6호
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    • pp.506-514
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    • 1987
  • 밤(생율(生栗))으로 부터 peroxidase를 $(NH_4)_2SO_4$에 의한 염석 및 DEAE-cellulose column chromatography, sephadex G-100 column chromatography, HPLC방법으로 정제하였으며 정제도는 조효소에 비하여 65.3배였고, HPLC로 측정한 밤 peroxidase 분자량은 35,000으로 추정되었다. sephadexG-100 column chromatography 후 얻은 밤 peroxidase의 작용최적 pH는 5.0이었고, 작용최적 온도는 $50^{\circ}C$이었으며 $80^{\circ}C$에서 1.73분 열처리할 때 90%의 효소가 불활성화되었다. 본 효소는 OPDA 및 PPDA와 같은 방향족 amine류에 높은 활성을 나타내었다. OPDA와 $H_2O_2$에 대한 Km치는 각각 2.6mM과 10mM이었고, 저해작용은 L-ascorbic acid 와 sodium L-ascobate가 가장 컸으며, $Ca^{++}$$Ba^{++}$은 1mM과 5mM에서 현저히 효소활성을 증가시켰다.

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Determination of Trace Metals in Waters by FAAS after Enrichment as Metal-HMDTC Complexes Using Solid Phase Extraction

  • Tokalioglu, Serife;Kartal, Senol;Elci, Latif
    • Bulletin of the Korean Chemical Society
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    • 제23권5호
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    • pp.693-698
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    • 2002
  • A method has been described for the determination of Cu(Ⅱ), Pb(Ⅱ), Ni(Ⅱ), Cd(Ⅱ), Mn(Ⅱ) and Fe(Ⅲ) by flame atomic absorption spectrometry (FAAS) after preconcentration on Amberlite XAD-16 resin, using hexamethyleneammonium-hexamethylenedithiocarbamate (HMA-HMDTC) as a chelating agent, and NH3/NH4Cl buffer solution (pH 9). Influences of various analytical parameters such as pH, concentration of nitric acid, amount of analytes, diverse ions and sample volume were investigated. The relative standard deviation (RSD) and the detection limit (LOD) were found in the range of 0.8-2.9% and 0.006-0.277 ㎍/mL,respectively. Recoveries obtained by the column method were quantitative ( >95%) at optimum conditions.The method was applied to the determination of some metal ions in seawater and wastewater samples. A high preconcentration factor (about 150 for seawater and 75 for wastewater samples) and simplicity are the main advantages of this suggested method.

군소 (Aplysia kurodai)의 중추신경계로부터 myomodulin A와 E의 정제 (Purification of Myomodulin A and Myomodulin E from the Central Nervous System of the Sea Hare, Aplysia kurodai)

  • 김찬희;서해점;황은영;김은정;고혜진;김인혜;서정길;문정혜;허민도;박남규
    • 한국수산과학회지
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    • 제34권3호
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    • pp.279-284
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    • 2001
  • 군소의 중추신경계로부터 myomodulin A (MMA)과 myomodlin E (MME)의 정제에 대해 보고하고자 한다. 500마리 군소의 중추신경계를 산조건으로 추출한 후 4종류의 HPLC column system에 적용하여 두가지 신경성 펩타이드를 정제하였다. HPLC 분리과정에서 얻어진 모든 분획의 활성을 조사하기 위하여 bioassay system으로 진주담치 (Mytilis edulis)의 ABRM을 이용하였다. 최종 정제된 신경성 펩타이드는 Edman 분해법을 이용한 아미노산 서열 분석기, 질량분석기와 화학합성을 통해 완전한 일차구조를 밝힐 수 있었다. 정제한 MMA와 MME의 일차구조는 각각 Pro-Met-Ser-Met-Leu-Arg-Leu-$NH_2$, (847.41 Da) 과 Gly-Leu-Gln-Met-Leu-Arg-Leu-$NH_2$, (830.50Da) 이었다. 또한 이들 합성 펩타이드는 진주담치의 ABRM에 대해 phasic contration의 조절활성을 나타내었다.

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능이버섯에서 분리한 Protease의 정제와 특성 (Purification and Characterization of Pretense from Sarcodon aspratus (Berk.) S. Ito)

  • Lee, Jong-ho;Jung, Chung-Sung;Cho, Jae-Sun
    • 한국식품조리과학회지
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    • 제17권5호
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    • pp.497-502
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    • 2001
  • 능이버섯 〔Sarcodon aspratus(Berk.) S.Ito〕으로부터 단백질 가수분해 효소를 추출하여 75%(NH$_4$)$_2$SO$_4$ 염석과 DE52 anion exchange column chromatography 와 sepharyl-S 200 column 및 Mono s column chromatography 에 의해 정제하였는데 조 효소의 특이 활성은 55.2U/mg protein으로 조효소액에 비하여 11.26배 증가하였고 수율은 49.5%로 나타났다. 정제된 효소는 전기영동을 행한 결과 단일 band를 나타내었으며 분자량은 29,300으로 추정되었다. pH의 안정성은 4$^{\circ}C$에서 48시간 보존하였을 때 pH 8.5에서 가장 안정하였고, pH 5.5~10.5까지 높은 활성을 유지하였다. 온도에 대한 안정성은 30분간 보존 한 후 활성을 검토한 결과 단백분해능은 5$0^{\circ}C$까지 비교적 처음활성을 유지하다가 6$0^{\circ}C$에서는 53%정도의 활성이 유지되었으나 그 이상의 온도에서는 급격히 실화하여 7$0^{\circ}C$에서는 완전히 실화하였다. 금속 이온에 의해서는 크게 저해를 받지 않았으나 PMSF 저해제에 대하여 저해되어 본 효소가 serine protease임을 시사하였다.

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