• 생명과학회지
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• 제24권1호
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• pp.98-103
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• 2014

NQO1은 플라보 단백질 계통의 2 전자 환원 효소이며 NADH 또는 NADPH를 보조인자로 quinone 계통의 화합물을 hydroquinone으로 환원 한다. 암에서 NQO1은 그에 상응하는 정상 조직과 비교하였을 때 비교적 높은 발현을 나타낸다. NQO1의 다양한 기능 중 quinone 물질 대사는 두 가지 형태의 상반되는 기능을 가진다. 이것은 quinone으로부터 전환된 hydroquinone의 상태적 안정성과 불안정성에 기인하며, 불안정한 hydroquinone의 생성은 산화적 손상 야기 및 DNA 손상은 세포의 운명을 바꾸어 놓게 된다. 따라서 암에서 그 발현이 높은 NQO1을 표적으로 작용하는 생체환원 물질은 암 세포 사멸을 강하게 유도하게 되어 암 치료의 가능성을 보여주고 있다. 항암 표적 분자로서 NQO1 특징과 NQO1을 통해 작용하는 생체환원물질 ${\beta}$-lapachone의 항암 효과와 기전에 대하여 살펴보았다.

• 미생물학회지
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• 제26권3호
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• pp.197-206
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• 1988

Klebsiella pneumoniae의 세포외막으로부터 2-furaldehyde를 2-furoic acid로 산화시키는 2-furaldehyde dehydrogenase를 분리하여 그 특성을 조사하였다. 이 효소는 $\beta$-$NAD^{+}$를 특이적으로 요구하였다. 분리과정중의 효소활성도는 2-furaldehyde를 기질로 사용하고 $\beta$-$NAD^{+}$를 조효소로 사용하면서 high performance liquid chromatography에 의해 측정 되었다. 세포외막은 Percoll의 밀도흉배에 의한 초원심분리방법과 $Mg^{2+}$, Triton X-100으로 용해시킨 후, 초원심분리시키는 방법으로 수집되었다. 세포외막단백질은 EDTA와 lysozyme을 처리함으로서 얻어졌고, 효소는 QAE-Sephadex Q-504 S Sephadex G-100-을 사용하면서 column chromatography 방법에 의해 분리되었다. 본 효소는 $85^{\circ}C$, PH9.5, 그리고 1.5% (vol/vol) Triton X-100의 존재하에서 최대활성을 보여주었다. 효소의 분자량은 nondenaturing polyacrylamide gel e electrophoresis의 결과, 88, 000.으로 추정되었고, 2-furaldehyde에 대한 효소의 Km값은 4.72 mM 이였다.

• Animal cells and systems
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• 제9권4호
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• pp.191-198
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• 2005

The effects of 6-aminonicotinamide (6-AN) on viability of IMR32 neuroblastoma cells in the presence of ATP or $NAD^+$ have been investigated. 6-AN caused marked reduction in cell viability and similar observations were also made with cells treated with 6-AN+ATP. However, cells treated with $6-AN+NAD^+$ showed cell viability similar to untreated cells. Morphologically, 6-AN and 6-AN+ATP treated cells showed loss of neurites, polyhedric shapes, shrinkage of cell bodies and formation of lysed cells, while $6-AN+NAD^+$ cells did not show any such changes. The flow cytometry analysis demonstrated that 6-AN increased cell population in $G_0/G_1$ phase and decreased cell population in Sand $G_2/M$ phase following a 72 h exposure. Western blot analysis showed that 6-AN stimulated a substantial increase in the level of the cdk inhibitor $p27^{kip1}$, but lowered the levels of cdk2, cyclin E and p-Rb. However, cdc25A and p53R2 were not significantly affected. Immunofluorscence staining of $p27^{kip1}$, cdk2, cyclin E and p-Rb revealed close correlation between the signal observed in the Western blot analysis. 6AN+ATP treated cells showed similar results obtained with 6-AN treated cells in expression of cdk2, cyclin E, p-Rb proteins and $p27^{kip1}$, $6-AN+NAD^+$ cells showed greater expression of cdk2, cyclin E and p-Rb than those in 6-AN and 6-AN+ATP treated cells. The results suggest that 6-AN induced the $G_0/G_1$ phase arrest in IMR32 neuroblastoma cell lines through the increase of $p27^{kip1}$ and the decrease of cdk2, cyclin E and p-Rb.

• 미생물학회지
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• 제41권1호
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• pp.67-73
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• 2005

본 연구에서는 남세균인 Synechocystis sp. PCC 6803 (Syn6803)을 대상으로 transposable element Tn5를 이용하여 획득된 1,200여 돌연변이주로부터 모균주에 비하여 PHB 축적량이 크게 증진된 균주를 선별하고, Tn5 삽입에 의해 결함을 나타낸 유전자를 확인함으로써 Syn6803에서의 PHB 생합성에 영향을 주는 세포내 생리학적 요인을 조사하고자 하였다. 모균주인 야생형 균주의 경우 질소원이 제한된 $BG11_0$ 배지에서의 PHB 생합성량이 건체량의 $4\%$ (w/w) 수준인데 반하여, $10-34\%$의 생합성량을 보이는 25개의 돌연변이 균주를 얻을 수 있었다. Inverse PCR을 이용하여, 선별된 돌연변이 균주내 돌연변이가 일어난 유전자를 조사한 결과, 아직까지 그 기능이 규명되지 않은 유전자가 대부분이었으나, NADH-ubiquinone oxidoreductase, O-succinylbenzoic-CoA ligase 또는 photosystem II PsbT protein과 같이 광합성과 호흡에 관여하는 유전자에 돌연변이가 일어난 4 균주와 histidine kinase가 결여된 1균주가 확인되었다. 이들 균주를 대상으로pulse-amplitude modulated fluorometer를 이용하여 세포내 $NAD(P)H/NAD(P)^+$비를 측정한 결과, 에너지 대사 흐름의 차단에 의해 세포내의 $NAD(P)HNAD(P)^+$비가 모균주에 비하여 현저하게 높은 것으로 나타났다. 이는 잉여의 전자로 포화된 세포, 즉 NAD(P)H에 의해 환원적 상태를 유지하고 있는 세포의 경우 PHB 축적 이 증진될 수 있음을 시사한다. 이러한 사실은 인위적으로 광합성과 호흡 관련 유전자가 제거되어 $NAD(P)H/NAD(P)^+$비가 높아진 것으로 알려진 다수의 Syn6803 돌연변이 균주들을 대상으로 PHB 생합성량을 조사한 결과로부터 재확인되었다.

• 한국미생물·생명공학회지
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• 제19권6호
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• pp.610-613
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• 1991

Pseudomonas synxantha A3으로부터 정제된 결정화 효소를 사용하여 몇가지의 성질을 검토하였다. 본 효소에 대한 nucleoside 관련물질의 저해관계를 검토한 결과, 그 중에서 adenine, 8-azaadenine, 2-methyladenine, guanine, 8-azaguanine에 의해서 강한 저해를 받는 것으로 나타났으며, caffenine에 의해서는 저해를 받지 않았다. Adenine과 guanine은 비길항저해제로서, 그 저해상수($K_i$)는 각각 0.037mM과 0.098mM 이었다.

• 접착 및 계면
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• 제3권2호
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• pp.45-52
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• 2002

기존의 점착제 합성방법에서 탈피하여 용액형 점착제(Solution)의 장점과 입자형 점착제(Emulsion)의 장점을 동시에 보유한 NAD (Non-Aqueous Dispersion Polymer)를 합성하였다. NAD는 메탄올 분위기에서 6개월 이상의 분산 안정성을 유지하였다. NAD는 용액에서 입자형 고분자의 형태를 이루고 있음을 도공 공정에서 확인하였다. 또한 기존의 아크릴 점착제의 장점과 고무계점착제의 장점을 결합한 고분자량의 점착제, GP (Graft Polymer)를 합성하였다. GP는 자체가 매우 높은 분자량을 보유하여 가교제의 첨가 없이도 우수한 물성을 나타내었다. GP는 일반적으로 고 분자량의 고분자에서 나타나는 Weissenberg effect 현상을 나타내었다. 이들의 점착제로 응용시 각각의 물성을 비교하여 나타내었다.

• Journal of Electrochemical Science and Technology
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• 제5권1호
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• pp.19-22
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• 2014

Here we report a highly sensitive and stable detection of $NAD^+$ and NADH by the electrode on which diaphorase (DI) is covalently immobilized in viologen polymer network. The network is prepared by the covalent formation of the structure by mixing propylamine viologen (PAV), poly(ethylene glycol)(400) diglycidyl ether (PEGDGE), an diaphorase (DI). The PAV/PEGDGE/DI modified electrode has the sensitivity of $0.02nA{\cdot}{\mu}M$ and the detection limit of $3{\mu}M$ with a response time of 2 s ($t_{90%}$) for NADH sensing.

• 약학회지
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• 제36권5호
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• pp.469-473
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• 1992

Yeast alcohol dehydrogenase (YADH) has an acidic residue that interacts with the 2'- and 3'-hydroxyl groups of the adenosine ribose of the $NAD^+$ coenzyme. The acidic residue of Asp-223 (according to horse liver alcohol dehydrogenase amino acid sequence) is supposed to determine the coenzyme specificity for $NAD^+$ rather than $NADP^+$. We mutated Asp-223 to leucine and the mutant YADH was expressed in yeast and characterized for the coenzyme specificity. The turnover numbers of mutant enzyme for $NAD^+$ and ethanol were decreased 3.5- and 4.8-fold compared to wild-type enzyme, respectively. Contrastively, catalytic specificity for $NADP^+$ was increased 13-fold. As a result, the mutant YADH also employed $NADP^+$ as a coenzyme.

• 한국인터넷방송통신학회논문지
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• 제11권1호
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• pp.199-204
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• 2011

본 눈문은 차세대 전술 통신을 위한 웨이브폼인 WNW(Wideband Network Waveform)하에서의 매체접근 프로토콜로서의 MIL-STD-188-220 프로토콜의 사용 가능성에 대하여 IEEE 802.11e 기반의 프로토콜과의 비교, 모의실험을 통하여 평가하였다. 본 논문에서는 모의실험 평가를 통하여 MIL-STD-188-220 프로토콜의 특정 환경에서 IEEE 802.11e 기반의 프로토콜보다 나은 성능을 보여 줌으로써 사용 가능성을 보인다.

• Biodesign
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• 제7권1호
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• pp.24-27
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• 2019

Pnc1 converts nicotinamide to nicotinic acid to generate NAD⁺ through the Preiss-Handler pathway that is one of the NAD⁺-salvage pathway. By reducing levels of nicotinamide, an inhibitor of the NAD⁺-dependent histone deacetylase Sir2, yeast Pnc1 contributes gene silencing. In this study, to understand the structural features and molecular mechanism of nicotinamidase Pnc1, we overexpressed, purified, and crystallized the N-terminally His₆-tagged Pnc1 protein from Kluyveromyces lactis and obtained X-ray diffraction data at a resolution of 2.2 Å. The crystals of the K. lactis Pnc1 (KlPnc1) belonged to space group P2₁2₁2₁ with unit cell parameters a=38.5, b=77.3, c=83.3, and α=β=γ= 90°. There is one molecule in the asymmetric unit.