BACKGROUND: Chemical fungicides not only may pollute the ecosystem but also can be environmentally hazardous, as the chemicals accumulate in soil. Biological control is a frequently-used environment-friendly alternative to chemical pesticides in phytopathogen management. However, the use of microbial products as fungicides has limitations. This study isolated and characterized a three-antifungal-enzyme (chitinase, cellulase, and ${\beta}$-1,3-glucanase)-producing bacterium, and examined the conditions required to optimize the production of the antifungal enzymes. METHOD AND RESULTS: The antifungal enzymes chitinase, cellulase, and ${\beta}$-1,3-glucanase were produced by bacteria isolated from an sawmill in Korea. Based on the 16S ribosomal DNA sequence analysis, the bacterial strain AM50 was identical to Streptomyces sp. And their antifungal activity was optimized when Streptomyces sp. AM50 was grown aerobically in a medium composed of 0.4% chitin, 0.4% starch, 0.2% ammonium sulfate, 0.11% $Na_2HPO_4$, 0.07% $KH_2PO_4$, 0.0001% $MgSO_4$, and 0.0001% $MnSO_4$ at $30^{\circ}C$. A culture broth of Streptomyces sp. AM50 showed antifungal activity towards the hyphae of plant pathogenic fungi, including hyphae swelling and lysis in P. capsici, factors that may contribute to its suppression of plant pathogenic fungi. CONCLUSION(S): This study demonstrated the multiantifungal enzyme production by Streptomyces sp. AM50 for the biological control of major plant pathogens. Further studies will investigate the synergistic effect, to the growth regulations by biogenic amines and antifungal enzyme gene promoter.
Cordyceps pruinosa grows upon dead pupae of Lepidoptera and produces one or $3{\sim}4$ club-shaped stromata per host. The stromata have distinct club-shaped head and long stalk. The length of stromata varies from $1{\sim}3\;cm$. Apical head consists of densely crowded semi-immersed perithecia, which are $360{\sim}400\;{\times}\;180{\sim}200\;{\mu}m$ in size. Asci are $150\;{\mu}m$ in length and $2.8{\sim}3\;{\mu}m$ in diameter. Ascospores, which are $124{\sim}141\;{\mu}m$ in length, have thin thread-like structures in the middle with part-spores attached on both sides. Each ascospore does not separate into part-spores after dispersal, but each part-spore germinates and together develops a colony. The imperfect form produces phialides of $15{\sim}24\;{\times}\;2{\sim}3\;{\mu}m$ size, with spherical or spindle shaped conidia of $4{\sim}6\;{\times}\;1.8{\sim}2.4\;{\mu}m$ size, The anamorph was identified as Mariannaea elegans Samson. YMA and SDAY agar media with pH 7 was produced abundant mycelial growth with high density. Best mycelial growth was observed when dextrin was used as a carbon source. Lactose, saccharose and sucrose also produced high mycelial growth. Peptone, yeast extract and tryptone produced abundant mycelial growth, when used as nitrogen sources. Highest mycelial growth and density was observed when C/N ratio was 1 : 1 at the concentration of 12.5 g/l each. $KH_2PO_4$ was the best mineral source for mycelial growth. Highest mycelial dry wt. was produced in YM and SDAY broths. Optimum inoculum for 100 ml of liquid broth was 6 mycelial discs. Similarly, optimum liquid culture period was 7 days.
Effects of some sources on the vegetative growth of Naematoloma sublateritium (Fr.) Karst. were investigated using liquid and solid culture media. Temperature, pH, carbohydrates as carbon sources, amino acids as nitrogen sources, the optimal carbon/nitrogen ratio, mineral element and organic acids were studied for good mycelial growth. We could improve a new semisynthetic medium for mycelial growth in N. sublateritium.
A microorganism capable of producing high level of poly-3-hydoxybutyrate (PHB) from xylose was isolated from soil. The isolated strain J-65 was identified as Bacillus megaterium based on the morphological, biochemical and molecular biological characteristics. The optimum temperature and pH for the growth of B. megaterium J-65 were $37^{\circ}C$ and 8.0, respectively. The optimum medium composition for the cell growth was 2% xylose, 0.25% $(NH_4)_2SO_4$, 0.3% $Na_2HPO_4{\cdot}12H_2O$, and 0.1% $KH_2PO_4$. The optimum condition for PHB accumulation was same to the optimum condition for cell growth. Copolymer of ${\beta}$-hydroxybutyric and ${\beta}$-hydroxyvaleric acid was produced when propionic acid was added to shake flasks containing 20 g/l of xylose. Fermenter culture was carried out to produce the high concentration of PHB. In batch culture, cell mass was 9.82 g/l and PHB content was 35% of dry cell weight. PHB produced by B. megaterium J-65 was identified as homopolymer of 3-hydoxybutyric acid by GC and NMR.
A potent citric acid producing strain was selected by an extensive screening test of the yeasts isolated from the various sources. These experiments were conducted to identify the selected strain and investigate the cultural conditions for citric acid production. The results obtained were as fellows: 1. The selected strain of yeast was identified to Hansenula anomala var. anomala by a taxnoomic study of Lodder. 2. The optimum conditions for citric acid production in the basal medium containing 10% glucose were: temperature $30^{\circ}C$, the concentration of $CaCO_3$ 3% and the velocity of oscillation 110 oscills/min. 3. As a nitrogen source ol the basal medium $NH_4Cl(0.1%)$ was the most effective for citric acid production. Organic nitrogen sources such as peptone were adequate for growth of the strain but not for citric acid production. 4. The most effective concentration of glucose was 10% in yield ratio of citric acid from sugar. 5. The addition of defatted rape seed, defatted perilla or defatted rice bran to the medium was effective for citric acid production. When 5% extract solution of defatted rape seed was added, the citric acid production was increased as much as 40% as compared with the case of adding yeast extract(0.2%). 6. The most effective concentration of $KH_2PO_4$ and $MgSO_4{\cdot}7H_2O$ in the medium(for citric acid Production) was 0.05% and 0.025% respectively. 7. Under the optimum cultural conditions, the growth of the strain was continued up to 5 days and the increase of citric acid production was continued up to 6 days, showing the yield ratio of 46% to glucose.
Park, Geun-Tae;Cha, Mi-Sun;Nam, Gui-Sook;Cho, Sun-Ja;Son, Hong-Joo;Lee, Geon;Lee, Sang-Joon
Journal of Environmental Science International
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v.11
no.9
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pp.971-977
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2002
The isolated strain, Rhodococcus sp. EL-GT was able to degrade high phenol concentrations up to 10 mM within 24 hours in the medium consisting of 5.3 mM $KH_2PO_4$. 95 mM $Na_2HPO_4$, 18mM $NH_4NO_3$, 1 mM $MgSO_4{\cdot}7H_2O$,\;50{\mu}M CaCl_2$,\;0.5 {\mu}M FeCl_3$, initial pH 8.0, temperature $30^{\circ}C$ in rotary shaker at 200 rpm. This strain was good cell growth and phenol degradation in the alkaline pH range range, and the highest in the pH range of 7 to 9. The microorganism was able to grow at the various chlorinated phenols, benzene, toluene, and bunker-C oil. As Rhodococcus sp. EL-GT was good capable of attachment on the acryl media, it would be used as microorganism to consist of biofilm in wastewater treatment.
Chang, Hyun-You;Lee, Chan;Choi, Sung-Woo;Yun, Jong Won
Journal of Mushroom
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v.6
no.1
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pp.27-31
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2008
The optimization of submerged culture conditions for mycelial growth and exopolysaccharide (EPS) production in an edible mushroom Tremella fuciformis were studied in shake flasks and bioreactors. The temperature of $28^{\circ}C$ and pH 8 in the beginning of fermentation in agitated flasks was the most efficient condition to obtain maximum mycelial biomass and EPS. The optimal medium constituents were as follows (g l-1): glucose 20, tryptone 2, $KH_2PO_4$ 0.46, $K_2HPO_4$ 1 and $MgSO_4H_2O$ 0.5. The fungus was cultivated under various agitation and aeration conditions in a 5L stirred-tank bioreactor. The maximum cell mass and EPS production were obtained at a relatively high agitation speed of 200 rpm and at an aeration rate of 2 vvm. The flow behavior of the fermentation broth was Newtonian and the maximum apparent viscosity (35 cP) was observed at a highly aerated condition (2 vvm). The EPS productivity in an airlift reactor was higher than that in the stirred-tank reactor. The EPS was protein-bound polysaccharides consisted of mainly mannose, xylose, and fructose. The molecular weights of EPS were determined to be $1.3{\sim}1.5{\times}10^6$.
This study was conducted to examine the physiology of pine mushroom mycelia cultured with various media for artificial culture of pine mushroom. The results obtained were as follows: 1) Among the various media, the medium composed of honey, boiled pine mushroom and soil extract fluid, fibrous root extract fluid, dry yeast, $KH_2PO_4$ inositol, folic acid, and biotin was the best for the growth of pine mushroom mycelium. 2) The optimum temperature for germinating pine mushroom spore and for culturing pine mushroom mycelium, was $24^{\circ}C$ and the optimum pH was 4.5. 3) There was no significant difference in growth between the mycelium separated from the tissue of pine mushroom sporophore and that separated from the spore. 4) No noticeable effect was found on the growth if such salts as $ZnSO_4$, $MnSO_4$, $MgSO_4$, $CaCl_2$ and ferric citrate were added to the Hamada's medium. 5) The addition of fibrous root extract promoted the growth of pine mushroom mycelium. 6) As a carbon source of artificial media, honey was more effective than glucose. 7) The culture infiltration of Mortierlla growing often in Fairy Ring was good for the growth of mycelium compared with the control. 8) The addition of fibrous root extract, inositol, biotin, and folic acid to artificial culture media was greatly effective in growth. When the temperature was lowered $19^{\circ}C$ after mycelium has appeared, the formation of primordium was observed.
To reduce phosphorus and nitrogen from the swine wastewater, magnesium chloride $(MgCl_2)$ was used as a reaction material for both soluble phosphorus (SP) and ammonia-nitrogen (AN). The initial value of SP content were $471mg/\ell$ far aeration test and $515 mg/\ell$ for NaOH addition test, but treatment of $MgCl_2$ reduced SP value to $5mg/\ell$ and $4mg/\ell$. The removal efficiency of $MgCl_2$ for SP showed $99\%$ in both treatment, and the removal efficiency of $MgCl_2$ for AN showed $15\%$ with treatment of aeration and $18\%$ with NaOH. All the experiments were done in a low temperature of 6 to $8^{\circ}C$, suggesting that this methods are possibly able to apply to a cold weather conditions. Moreover, the struvite crystal structure was identified by electronic microscope, implying that $MgCl_2$ is an effective material for removal of SP from swine wastewater In addition to the increased removal rate of the AN in wastewater, both $MgCl_2$ and $KH_2PO_4$ were added. The SP value was reduced by $99\%$ with 2g addition of the phosphate. The SP removal rate by 4g addition of the phosphate was increased only as $15-19\%$, but the quantity of removed SP was higher than that of 2g addition test. The value of AN was not reduced as expected by adding $KH_2PO_4$. The AN removal rate were low as $18\%$ and $15\%$ like as the level of the former test with $MgCl_2$ alone. Therefore, it is needed to examine closely the reaction mechanism f3r reducing both SP and AN simultaneously.
Fruit bodies similar to the Phellinus sp. residing on the mulberry were collected at Yang-yang in Kang-won-do province and one strain of Phellinus sp. was isolated from the fruit bodies. For mass production of the isolated mycelia in a submerged culture, the culture conditions, medium composition, and the effect of various culture systems on the mycelial growth, were investigated. The morphological characteristics of the fruit body were as follows: covered with blackish to black and rough, lower surface with yellowish-brown to dull-brown and smooth, 5-7 cm thick and hard woody. Also, the pure cultured mycelia showed yellowish-brown color, capability of purplish-brown pigment production on the PDA plate media, no-formation of clamp-connection, much binding branch, and enzyme activities such as laccase, tyrosinase and peroxidase. Therefore, pure cultured strain was identified to be Phellinus sp. In the flask culture, the optimum culture conditions for the mycelial production were obtained after cultivation of 8 days at inoculum level of 5%(v/v), media volume of 70 mL, 150 rpm, initial pH 6, and temperature of $30^{\circ}C$. Optimum medium composition from the response surface analysis were determined to be glucose 12.12 g/L, sucrose 12.12 g/L, yeast extract 11.15 g/L, malt extract 11.15 g/L, $KH_2PO_4$ 0.855 g/L and $CaCl_2$ 0.855 g/L. The production of the mycelia after 4 and 8 days of cultivation was 1.95 and 9.89 g/L, respectively. The maximum specific growth rate and productivity were $0.020\;hr^{-1}$ and 1.25 g/L/day, respectively. Among the three different culture systems for the growth of mycelia, the maximum mycelial dry weight of 7.5 g/L was obtained after cultivation of 4 days in the air-lift fermentor under aeration rate of 2.5 vvm. The maximum specific growth rate and productivity were $0.033\;hr^{-1}$ and 1.9 g/L/day, respectively, which were about 1.7 and 4.2 times higher than those of flask culture.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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