The growth and fermentation profiles of Clostridium acetobutylicum KCTC 1037 were examined in batch and continuous modes with pH variation and phosphate limitation. Clostridium acetobutylicum KCTC 10 37 grew better at pH 4.5 than at pH 5.5 or 6.5. Acetate and butyrate were produced at pH 5.5, whereas culture at pH 4.5 produced acetone and butanol. Solvent production was increased by the phosphate limitation in a batch culture, but in a phosphate-limited continuous culture for 400 hours steady-state solventogenesis was not observed. The induction and maintenance of solventogenesis presumably require not only acidic condition or phosphate limitation but also favourable bioenergetic condition.
Park, Kwan-Hwa;Oh, Byung-Ha;Hong, Seung-Suh;Lee, Ke-Ho
Applied Biological Chemistry
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v.27
no.3
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pp.198-203
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1984
Ethanol fermentation of chemically gelatinized starch and uncooked raw starch was nested with various starchy materials. Starches were gelatinized by 5.4% NaOH and neutralized by sulfuric acid. The patterns of $CO_2$ evolving and the ethanol yield for the chemically gelatinized starch resemble those obtained with thermally gelatinized starch. The alcoholic fermentation of raw starch was carried out by the simultanous saccharification-fermentation using a commercial glucoamylase and yeast. Ethanol yield from uncooked rice starch fermentation was highly comparable to that from cooked one. $CO_2$ evolving rates of the uncooked starches of corn, barley, tapioca and sweet potato were lower than those of the cooked starches. However, the final ethanol yields were similar or slightly lower, depending on the types of starch.
An investigation was conducted on the enhancement of production and purification of an oxidant and SDS-stable alkaline protease (BHAP) secreted by an alkalophilic Bacillus horikoshii, which was screened from the body fluid of a unique Korean polychaeta (Periserrula leucophryna) living in the tidal mud flats of Kwangwha Island in the Korean West Sea. A prominent effect on BHAP production was obtained by adding 2% maltose, 1% sodium citrate, 0.8% NaCl, and 0.6% sodium carbonate to the culturing medium. The optimal medium for BHAP production contained (g/l) SBM, 15; casein, 10; $K_2HPO_4$, 2; $KH_2PO_4$, 2; maltose, 20; sodium citrate, 10; $MgSO_4$, 0.06; NaCl, 8; and $Na_2CO_3$, 6. A protease yield of approximately 56,000 U/ml was achieved using the optimized medium, which is an increase of approximately 5.5-fold compared with the previous optimization (10,050 U/ml). The BHAP was homogenously purified 34-fold with an overall recovery of 34% and a specific activity of 223,090 U/mg protein using adsorption with Diaion HPA75, hydrophobic interaction chromatography (HIC) on Phenyl-Sepharose, and ion-exchange chromatography on a DEAE- and CM-Sepharose column. The purified BHAP was determined a homogeneous by SDS-PAGE, with an apparent molecular mass of 28 kDa, and it showed extreme stability towards organic solvents, SDS, and oxidizing agents. The $K_m$ and $k_{cat}$ values were 78.7 ${\mu}M$ and $217.4s^{-1}$ for N-succinyl-Ala-Ala-Pro-Phe-pNA at $37^{\circ}C$ and pH 9, respectively. The inhibition profile exhibited by PMSF suggested that the protease from B. horikoshii belongs to the family of serine proteases. The BHAP, which showed high stability against SDS and $H_2O_2$, has significance for industrial application, such as additives in detergent and feed industries.
To meet the need of protein feed and fine more efficient ways of returning waste to resources, we have carried out the study of the production of yeast for foods and feeds from the corn starch cake. The present study includes the method for acid-hydrolysis, the selection of yeast capable of utilizing hydrolyzate of the corn starch cake, and culture condition of Candida tropicalis under the liquid culture and the semisolid culture. Obtained results were as follows. 1. Hydrochloric acid was more excellent on the hydrolysis of the corn starch cake than sulfuric acid, and the yield of sugar was maximum, 57.2%, when the corn starch cake was hydrolyzed with 1.0% of hydrochloric acid at 2.0kg/cm for 30 minutes. 2. As the acid solution content was increased, more sugar was liberatedfrom the mixture, until the acid solution-substrate ratio reached 10:1. Beyond this point, no further increase was observed. To prepare the cultural medium of semisolid fermentation, a acid solution to substrate ratio of 3:1 appeared to be optimum. 3. Out of 6 yeast strains, Candida tropicalis had excellent growth on the hydrolyzate of the corn starch cake, and optimum temperature and initial pH were $30^{\circ}C$ and 6.0 respectively. 4. Optimum liquid medium of Candida tropicalis is ures 0.3%, potassium phosphate monobasic 0.15g and magnesium sulfate 0.04g in 100ml of the hydrolyzate of the corn starch cake, while optimum semisolid medium is ammonium chloride 0.4g, potassium phosphate monobasic 0.1%, magnesium sulfate 0.04%. 5. Candida tropicalis could assimilate the sugar in the hydrolyzate up to more than 88.75%, and a yield of dry yeast reached 19.13% to the corn starch cake under the liquid culture. 6. Compared to the that of the untreated corn starch cake, the cellulose content of the semisolid fermented cake decreased by 3.76% to 14.7%, whereas dry yeast contents increased by 13.89%.
Bacillus polyfermenticus SCD, which is commonly called a 'Bisroot' strain, has been appropriately used for the treatment of long-term intestinal disorders, since the live strains, in the form of active endospores, can successfully reach the target intestine. Goal of this study was to develop an industrial medium for growth and sporulation of B. polyfermenticus SCD. From the results of effect of mixed carbon sources on growth and sporulation of B. polyfermenticus SCD, glucose 2% and starch 2% was particularly found to be the most effective for the maximum number of spore production, resulting in spore cells of $4.3{\times}10^9\;spores/mL$ with a sporulation yield of 91%. For the effect of nitrogen sources, the maximum spore cells of $5.7{\times}10^9\;spores/mL$ of B. polyfermenticus SCD with a sporulation yield of 97% was obtained when B. polyfermenticus SCD was cultivated in an optimum nitrogen source medium containing 5% soybean flour. A medium involving proper phosphate salt yielded the maximum number of a spore cells of $6.0{\times}10^9\;spores/mL$ with a sporulation yield of 95%. Finally, the efficacy of an industrial medium (KH5 medium) on growth and sporulation of B. polyfermenticus SCD was investigated in jar fermenter. The higher number of viable cells $(3.3{\times}10^{10}\;cells/mL)$ and spore cells $(3.0{\times}10^{10}\;spores/mL)$ were obtained in 5 L fermenter when compared with a 500 mL baffle flask cultivation. Thus, KH5 medium developed in this study shows promise as an industrial medium because of higher cells and sporulation yield.
Culture conditions of yellow pigment in Monascus sp. were studied. According to the studies of culture conditions optimum condition was found to be pH 4.5, 3 days of incubation with 3% of sucrose as carbon source, 0.2 % of yeast extract as nitrogen source and 75m1 of medium in the 500m1 erlenmyer flask by rotary shaking (rpm 180) at 180 r.p.m. Effective levels of inorganic compounds were found to be 0.25 % of potassium phosphate monobasic and 0.1 % of Magnesium sulfate.
The nutritional requirements for the maximum production of lipopeptides by Bacillus subtilis N7 (B. subtilis N7) were investigated and optimized using response surface methodology (RSM) under shake flask fermentation. A one-factor-at-a-time experimental setup was used to screen carbon and nitrogen sources. A Plackett-Burman design (PBD) was employed to screen the most critical variables for lipopeptides production amongst ten nutritional elements. The central composite experimental design (CCD) was finally adopted to elucidate the composition of the fermentation medium. Statistical analyses (analysis of variance, ANOVA) of the results showed that KCl, $MnSO_4$ and $FeSO_4{\cdot}6H_2O$ were important components and that their interactions were strong. Lipopeptide production was predicted to reach 709.87 mg/L after a 60 h incubation using an optimum fermentation medium composed of glucose 7.5 g/L, peanut oil 1.25 g/L, $MgSO_4$ 0.37 g/L, $KH_2PO_4$ 0.75 g/L, monosodium glutamate 6.75 g/L, yeast extract and $NH_4Cl$ (5:3 w/w) 10 g/L, KCl 0.16 g/L, $FeSO_4{\cdot}6H_2O$ 0.24 mg/L, $MnSO_4$ 0.76 mg/L, and an initial pH of 7.0. Lipopeptide production ($706.57{\pm}3.70$ mg/L) in the optimized medium confirmed the validity of the predicted model.
We investigated the optimal conditions for keratinase production by feather-degrading Pseudomonas geniculata H10 using one variable at a time (OVT) method. The optimal medium composition and cultural condition for keratinase production were determined to be glucose 0.15% (w/v), beef extract 0.08% (w/v), $KH_2PO_4$ 0.12% (w/v), $K_2HPO_4$ 0.02% (w/v), NaCl 0.07% (w/v), $MgSO_4{\cdot}7H_2O$ 0.03%, $MgCl_2{\cdot}6H_2O$ 0.04% along with initial pH 10 at 200 rpm and $25^{\circ}C$, respectively. The production yield of keratinase was 31.6 U/ml in an optimal condition, showing 4.6-fold higher than that in basal medium. The strain H10 also showed plant growth promoting activities. This strain had ammonification activity and produced indoleacetic acid (IAA), siderophore and a variety of hydrolytic enzymes such as protease, lipase and chitinase. Therefore, this study showed that P. geniculata H10 could be not only used to upgrade the nutritional value of feather wastes but also useful in situ biodegradation of feather wastes. Moreover, it is also a potential candidate for the development of biofertilizing agent applicable to crop plant soil.
For the screening and the development of the new bio-material, cultural conditions for the exo-biopolymer (EBP) production throught the submerged cultivation of Ganoderma lucidum mycelium were investigated. Also, the fractionations and the purifications of the exo-biopolymer were carried out and the chemical compositions of the exo-biopolymer were examined. The optimal culture conditions for the exo-biopolymer production were pH 5.0, 30$^{\circ}C$ and 100 rpm of agitation speed in the medium containing of 5% (w/v) glucose, 0.5%(w/v) yeast extract, 0.1% (w/v) ($(NH_4)_2HPO_4$, and 0.05% (w/v) $KH_2PO_4$. In the flask cultivation for 7 days under these conditions, the concentration of the maximum exo-biopolymer and the cell mass were 15.4g/l and 18.8g/l, respectively. The specific growth rate was 0.039 $hr^{-1}$. In addition, the substrate consumption rate, and the exo-biopolymer production rate were 0.043$gg^{-1}$$hr^{-1}$ and 0.025$gg^{-1}$$hr^{-1}$, respectively. The exo-biopolymer was fractionated into BWS (water soluble exo-biopolymer) and BWI (water insoluble exo-biopolymer) by the water extraction, and the sugar contents of two fractions were higher than 97% (based on dry basis). The components sugar of BWS and BWI fractions were glucose, galactose, mannose, xylose, and fucose. Their molar ratios were 3.6:1.5:2.1:0.5: trace and 2.9:3.1:2.0:1.6:0.3, respectively.
A feather-degrading bacterium Elizabethkingia meningoseptica CS2-1 was isolated from compost in a chicken farm. Cultured on a basal medium containing 2% chicken feather, the bacterium showed 729.7 ${\mu}mol/mL$ of amino acid. Optimal culture conditions for feather degradation by E. meningoseptica CS2-1 were $25^{\circ}C$, pH 7.5, and 180 rpm. The optimal pH and temperature for protease activity were 8.0 and $40^{\circ}C$, respectively. The composition of an optimal medium for amino acid production was 0.05% NH4Cl, 0.05% NaCl, 0.03% $K_2HPO_4$, 0.03% $KH_2PO_4$, 0.01% $MgCl_2{\cdot}6H_2O$, 0.1% urea, and 2% chicken feather. Characteristics of amino acids extracted from the optimal medium under the optimal culture conditions of E. meningoseptica CS2-1 were analyzed. The total amino acid content of strain CS2-1 was 1063 ${\mu}mol/mL$, which was 46% higher compared to the basal condition (729.7 ${\mu}mol/mL$). The essential amino acid content in the total amino acid was 315.9 ${\mu}mol/mL$, which was 44% higher than that of the basal condition. Major amino acids were proline (14%), aspartic acid (12%), glutamic acid (11%), serine (10%), alanine (10%), glycine (9%), and tyrosine (7%) by strain CS2-1. These results suggest that strain CS2-1 can be used as a potential microbial resource for the production of amino acid using chicken feathers.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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