본 연구는 유단백질 유래 카제인염을 상업용 단백질가수분해 효소로 처리하여 효소의 종류와 가수분해 시간에 따른 ACE 저해효과를 살펴보고 주요 성인병인 고혈압의 예방을 위한 혈압강하 효과가 높은 가수분해물을 제조하고자 수행하였다. 카제인염을 6종의 단백질 분해효소로 기질대 효소비 1000:1로 첨가하여 8시간 가수분해했을 때 가수분해도는 2.54-4.25%로 나타났고, 다시 가수분해물을 기질대 효소비 500:1로 처리하여 4시간 동안 2차 가수분해하였을 때 4.30-5.22%의 가수분해가 일어났다. 효소별 가수분해물의 ACE 저해효과는 가수분해가 진행됨에 따라 $IC_{50}$의 수치는 감소하였고 저해율을 증가하였다. 1차 가수 분해시 8시간 가수분해한 가수분해물의 $IC_{50}$ 수치는 Protamex 처리군이 $516{\mu}g/mL$로 가장 낮았고 Flavourzyme이 $866{\mu}g/mL$로 가장 높았다. 1차 가수분해물을 Flavourzyme로 4시간 2차 가수분해를 하였을 때 1차 가수분해물 보다 $IC_{50}$ 수치가 감소되어 ACE저해 효과가 증가하였으며 Neutrase로 처리하였을 때 $282{\mu}g/mL$로 가장 낮았고 Protease M이 $570{\mu}g/mL$로 가장 효과가 적었다. 가장 효과가 좋은 Neutrase 2차 가수분해물을 소화효소인 pepsin, trypsin, ${\alpha}$-chymotrypsin으로 가수분해 하였을 경우 $IC_{50}$ 수치는 $597{\mu}g/mL$로 1차 가수분해물보다 저해효과가 유의적으로 감소되었다(p<0.05). Neutrase 2차 가수분해물을 MW 10,000로 한외여과하였을 때 MW 10,000 미만 permeate의 $IC_{50}$ 수치는 $273{\mu}g/mL$로 저해효과는 유의차가 없었으나, 10,000 이상의 retentate는 $IC_{50}$ 수치가 $635{\mu}g/mL$로 유의적 수준에서 저해효과가 감소하였다(p<0.05). 이에 효소의 종류와 가수분해 시간의 조합에 의한 ACE 저해활성을 측정하고 분리공정을 최적화하기 위한 추가 연구를 수행한다면 주요 유단백질인 카제인 유래 기능성 식품의 산업적 대량생산이 가능할 것으로 사료된다.
전통식품인 된장으로부터 혈소판 응집 저해활성을 갖는 항혈전 펩타이드를 탐색하고자 하였다. 증류수로 추출한 된장액을 한외 여과하여 얻은 분자량 3,000 dalton 이하의 여액에 대하여, SD흰쥐의 세척혈소판 (washed platelet)을 이용하여 ADP 자극으로 유도되는 혈소판응집의 저해정도를 aggregometer에서의 탁도로 측정하였을 때, $96\;{\mu}g/ml$로 처리시 90% 가량의 응집 저해효과가 확인되었다. 추출물을 Dowex 50W X-2 강양이온 교환칼럼을 이용하여 pyridine-formic acid 완충액의 pH (2.8-5.0) 및 몰농도(0.1-3.0M)를 단계별로 증가시키면서 용출시켜 19개의 획분(No.B-18)으로 분리하였다. 이들 획분의 활성을 microplate를 이용한 방법으로 측정하였을 때, 전체적으로 앞의 방법보다는 감도가 낮게 나타났으나 모든 분획에서 응집억제 효과가 확인되었다. 이때 용량반응 곡선으로부터 구한 각 획분의 $IC_{50}$은 $10-1,000\;{\mu}g/ml)$의 범위를 보였으며, 대부분의 획분들은 양성대조구인 RGDS $(IC_{50},\;205\;{\mu}g/ml)$보다 높은 활성을 나타내었다. 또한, 후반부의 염기성 획분$(IC_{50},\;10-20\;{\mu}g/ml)$에서 된장추출물$(IC_{50},\;30\;{\mu}g/ml)$보다 활성이 높게 나타났다. 이들 중 활성이 가장 높은 16번 획분을 아미노산 분석한 결과, 펩타이드 부분에 histidine, arginine, alanine 등이 높은 비율로 존재하였다.
This study was conducted to compare the nutritional properties of cookies made with Israeli carp Cyprinus carpio (C-IC) to those made without Israeli carp (control). The proximate composition of C-IC per 100 g was 4.1 g moisture, 9.7 g protein, 29.2 g lipid, 1.4 g ash, and 55.6 g carbohydrates. Moisture, protein and ash contents were significantly higher and the carbohydrate content was significantly lower (P<0.05) in C-IC than control, but there was no difference in lipid content (P>0.05). The total amino acid content of C-IC per 100 g was 9.46 g and the major amino acid was glutamic acid (2.49 g). The mineral contents of C-IC per 100 g were 216.6 mg calcium, 193.2 mg phosphorus, 170.9 mg potassium, and 18.2 mg magnesium, which were all significantly higher than the contents of the control (P<0.05). The major fatty acids of C-IC were 16:0, 18:1n-9, and 18:2n-6. The digestibility of C-IC in the small intestine was 51.3%, which was higher than the digestibility of the control. These results suggest that C-IC have better nutritional properties than the control.
트리아졸계 살균제인 플루퀸코나졸을 분해할 수 있는 Pseudarthrobacter sp. IC2-21 균주는 이천 지역의 비닐하우스 토양으로부터 분리하였다. IC2-21 균주의 전체 염기서열을 분석한 결과, 4,265,009 bps를 가진 단일 환형 염색체로서 G+C 함량은 65.4%로 구성되었다. 이유전체는 3,884개의 단백질을 암호하는 염기서열을 가졌으며, 12개의 rRNA와 51개의 tRNA 유전자를 포함한다. 염기서열 분석 결과, IC2-21 균주는 플루퀸코나졸의 분해에 관여하는 효소인 oxygenase를 암호화하는 유전자를 가졌음을 밝혔다.
콘크리트의 파괴 특성을 평가하기 위한 매개변수, 모델, 그리고 시험방법 등이 현재 많이 제안되고 있으며, 이러한 발전으로 최근에는 콘크리트의 비선형 파괴와 준취성 파괴를 해석 가능하게 하고 있다. 이 논문에서는 파괴 매개변수에 대하여 간략히 소개하고 3점 휨시험을 시행하여 콘크리트의 파괴인성을 나타내는 J-적분값 ($J_{Ic}$ )과 다른 매개변수($K_{Ic}$ , $G_{F}$ )를 비교하였다. 콘크리트 보 시험체의 두께(width)와 노치 길이에 따라 파괴인성값이 어떻게 변화하는지를 실험적으로 고찰하였고 콘크리트 파괴 인성을 측정하기 위해서 응력-변위 곡선을 사용하였다. $G_{F}$ 와$ J_{Ic}$ 의 값은 노치 길이가 클수록 감소하는 경향을 보이며 $G_{F}$ 가 $J_{Ic}$ 보다 덜 민감한 반응을 보이는 것으로 나타났다. 따라서, 콘크리트 파괴 인성 매개변수로써 전자가 후자보다 더 유용한 것으로 나타났다. $G_{v}$ 와 $J_{Ic}$ 의 값은 콘크리트 시험체 두께가 75mm에서 150mm로 커질 때 증가한다. 따라서, 시험체 두께의 영향이 콘크리트 파괴 인성을 결정할 때 고려되어져야 한다.
동백나무의 생엽과 생화, 그리고 이를 재료로 제다한 단일 동백엽차$.$화차 및 혼합 동백차의 세포독성과 다제 내성 극복을 규명하기 위하여, 4종의 인간암세포(MCF-7, Calu-5, SNU-601, AML-2/WT)와 1종의 다제내성 세포주(AML-2/ D100)를 이용하여 MTT방법으로 분석하였다. 동백의 어린엽 추출물은 Calu-6($IC_{50}$/: 79.8 $\mu\textrm{g}$/mL), SNU-601($IC_{50}$/: 39.0 $\mu\textrm{g}$/mL)에 대해 성엽과 꽃에 비해 세포독성 효과가 높았다. 단일 동백엽 차중, 찐차는 덜음차나 차차에 비해 상당한 생육 억제효과를 보였으며, 혼합 동백 차의 경우, Cahemix보다는 Catemix추출물이 MCF-7, Calu-6에 대한 $IC_{50}$/: 100 $\mu\textrm{g}$/mL 이하의 낮은 농도에서 세포 증식 억제 및 사멸 효과가 현저히 상승됨을 보여주었다. 특히 Catemix-2를 첨가하였을 때 MCF-7과 Calu-6 암세포에서 $IC_{50}$/값이 각각 75.3과 74.6으로 높은 억제효과를 나타내었다. 시료에 대하여 감수성 세포인 AML-2/WT에 대하여 세포독성을 측정하여 감수성 세포에 비하여 내성 세포에 대하여 선택적 세포독성 여부를 관찰한 결과, 대체적으로 $IC_{50}$/의 차이가 없거나 내성세포의 $IC_{50}$/이 높게 나타내어 그다지 선택적 세포독성을 나타내지 않는 것으로 보인다. 혼합 동백차의 경우, 내성세포에 대한 선택적 세포독성은 Catemix-2(녹차와 동백엽의 덜음차의 혼합)와 Catemix-3(녹차와 동백화차의 혼합)에서 0.9로 다소 효과를 보였으며, 내성 극복 효과는 Cahemix-1(CR: 1.7)에서 높게 관찰되었다.
Five compounds were isolated from the BuOH fraction of Polygonum bistorta (Polygonaceae). On the basis of spectral data, these compounds were established as caffeic acid, quercimeritrin, avicularin, gallic acid and protocatechuic acid. The inhibitory activies on $3{\alpha}-hydroxysteroid$ dehydrogenase $(3\;{\alpha}-HSD)$ of isolated compounds were compared. $IC_{50}$ value of isolated compounds were $133.57\;{\mu}g/ml\;(caffeic\;acid)$, $89.1\;{\mu}g/ml\;(quercimeritrin)$, $189.85\;{\mu}g/ml\;(avicularin)$, $140.69\;{\mu}g/ml\;(gallic\;acid)$ and $165.27\;{\mu}g/ml\;(protocatechuic\;acid)$ respectively. Although all compounds showed lower inhibition activities than BuOH fraction $(IC_{50}<50\;{\mu}g/ml)$ of Polygonum bistorta, it showed higher inhibition activities than aspirin $(IC_{50}\;246.81\;{\mu}g/ml)$.
Objectives: The objective of this study was to investigate the antioxidant effects of manufactured Wen-pi-tang-Hab-Wu-ling-san (WHW$^{(R)}$) in vitro. Methods: WHW$^{(R)}$ was prepared by the pilot manufacture of WHW water extract from a GMP system appointed company. Antioxidative activities were determined by in vitro tests as follows: the scavenging activities of oxygen free radicals including 1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl (DPPH) radical, superoxide anion, hydrogen peroxide and nitric oxide radicals, as well as ferrous ion chelating capacity and Trolox equivalent antioxidant capacity (TEAC). Results: WHW$^{(R)}$ significantly scavenged oxygen free radicals such as DPPH (IC$_{50}$=115.28 $\pm$ 0.25 $\mu$g/$m\ell$), superoxide anion (IC$_{50}$=8.56 $\pm$ 0.08 $\mu$g/$m\ell$), hydrogen peroxide (IC$_{50}$=240.36 $\pm$ 3.41 $\mu$g/$m\ell$) and nitric oxide (IC$_{50}$=162.28 $\pm$ 0.21 $\mu$g/$m\ell$) radicals. WHW$^{(R)}$ also showed ferrous ion chelating activity (IC$_{50}$=543.19 $\pm$ 4.85 $\mu$g/$m\ell$) and Trolox equivalent effects (IC$_{50}$=45.311 $\mu$g/$m\ell$) in TEAC and ORAC assay, respectively. Conclusion: This study demonstrates that WHW$^{(R)}$ has strong antioxidative properties through free radical scavenging activity. These data suggest that WHW$^{(R)}$ be used as an antioxidant agent.
본 연구에서 국립원예특작과학원 인삼특작부 추출물은행에서 분양받은 에탄올 추출물 시료(시료번호: 4)인 선이질풀(Geranium krameri)에 대한 다양한 생리활성을 조사하여 기능성소재 응용가능성을 검토하였다. 선이질풀 추출물은 멜라노마 세포에 대하여 낮은 세포독성을 나타냈다. 세포독성이 거의 없는 농도에서 선이질풀 추출물 처리 시 산화방지 활성($IC_{50}$, $8.72{\mu}g/mL$) 및 B. subtilis, E. coli, C. albicans에 대한 항균활성이 우수하게 나타났으며 타이로시네이즈 활성저해($IC_{50}$, $456.86{\mu}g/mL$) 및 멜라닌 함량 저하($IC_{50}$, $50.35{\mu}g/mL$)를 보여주었다. 또한, B16F10 세포에서 선이질풀 추출물 농도 의존적으로 타이로시네이즈 발현이 억제되었으며, 이는 선이질풀 추출물이 직접적인 타이로시네이즈 활성저해 및 세포 내 타이로시네이즈 발현을 억제시킴으로서 멜라닌 합성을 저해하는 것으로 판단된다. 이와 같은 결과로 미루어볼 때 선이질풀 추출물은 피부미백 소재 등 피부개선 효과를 지닌 기능성 화장품에 활용하기 위한 매우 효과적인 재료가 될 수 있다고 판단된다.
고삼 추출물의 암세포에 대한 세포독성을 파악하기 위하여 고삼의 에틸 아세테이트 소분획으로 MTT 정량분석을 실시하였다. 고삼의 에틸 아세테이트 소분획은 암세포인 KB 세포, B16 세포, HeLa 세포와 MCF-7 세포에 대하여 $6.25{\mu}g/ml$ 농도부터 세포독성이 나타났으며, 12.5, 25, 50 및 $100{\mu}g/ml$까지 각각의 농도별로 세포독성은 증가하였고, 통계적으로 유의성이 인정되었다(p<0.05). KB 세포에 대한 $IC_{50}$는 $56.58{\mu}g/ml$, B16 세포에 대한 $IC_{50}$는 $65.43{\mu}g/ml$, HeLa 세포에 대한 $IC_{50}$는 $83.95{\mu}g/ml$, MCF-7 세포에 대한 $IC_{50}$는 $106.65{\mu}g/ml$로 나타났다. 고삼의 에틸 아세테이트 소분획은 암세포의 성장을 억제하였고, 세포독성의 강도는 B16 세포, HeLa세포, MCF-7 세포, KB 세포 순서로 높게 나타났다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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