Objective: An experiment was conducted to investigate the effects of dietary non-phytate phosphorus (nPP) deficiency on intestinal pH value, digestive enzyme activity, morphology, nutrient utilization, and gene expression of NaPi-IIb in meat ducks from 1 to 21 d of age. Methods: A total of 525 one-d-old Cherry Valley ducklings were fed diets (with 7 pens of 15 ducklings, or 105 total ducklings, on each diet) with five levels of nPP (0.22%, 0.34%, 0.40%, 0.46%, or 0.58%) for 21 d in a completely randomized design. Five experimental diets contained a constant calcium (Ca) content of approximately 0.9%. Body weight (BW), body weight gain (BWG), feed intake (FI), and feed to gain ratio (F:G) were measured at 14 and 21 d of age. Ducks were sampled for duodenum and jejunum digestion and absorption function on 14 and 21 d. Nutrient utilization was assessed using 25- to 27-d-old ducks. Results: The results showed ducks fed 0.22% nPP had lower (p<0.05) growth performance and nutrient utilization and higher (p<0.05) serum Ca content and alkaline phosphatase (ALP) activity. When dietary nPP levels were increased, BW (d 14 and 21), BWG and FI (all intervals), and the serum phosphorus (P) content linearly and quadratically increased (p<0.05); and the jejunal pH value (d 14), duodenal muscle layer thickness (d 14), excreta dry matter, crude protein, energy, Ca and total P utilization linearly increased (p<0.05); however, the serum ALP activity, jejunal $Na^+-K^+$-ATPase activity, and duodenal NaPi-IIb mRNA level (d 21) linearly decreased (p<0.05). Conclusion: The results indicated that ducks aged from 1 to 21 d fed diets with 0.22% nPP had poor growth performance related to poor intestinal digestion and absorption ability; but when fed diets with 0.40%, 0.46%, and 0.58% nPP, ducks presented a better growth performance, intestinal digestion and absorption function.
Wang, Xiaochen;Yang, Hongyu;Zhou, Wei;Liu, Jun;Xu, Ning
Journal of Microbiology and Biotechnology
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v.29
no.8
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pp.1288-1298
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2019
Bacterial ATP synthases drive ATP synthesis by a rotary mechanism, and play a vital role in physiology and cell metabolism. Corynebacterium glutamicum is well known as an industrial workhorse for amino acid production, and its ATP synthase operon contains eight structural genes and two adjacent genes, cg1360 and cg1361. So far, the physiological functions of Cg1360 (GenBank CAF19908) and Cg1361 (GenBank CAF19909) remain unclear. Here, we showed that Cg1360 was a hydrophobic protein with four transmembrane helices (TMHs), while no TMH was found in Cg1361. Deletion of cg1360, but not cg1361, led to significantly reduced cell growth using glucose and acetic acid as carbon sources, reduced F1 portions in the membrane, reduced ATP-driven proton-pumping activity and ATPase activity, suggesting that Cg1360 plays an important role in ATP synthase function. The intracellular ATP concentration in the ${\Delta}cg1360$ mutant was decreased to 72% of the wild type, while the NADH and NADPH levels in the ${\Delta}cg1360$ mutant were increased by 29% and 26%, respectively. However, the ${\Delta}cg1361$ mutant exhibited comparable intracellular ATP, NADH and NADPH levels with the wild-type strain. Moreover, the effect of cg1360 deletion on L-valine production was examined in the L-valine-producing V-10 strain. The final production of L-valine in the $V-10-{\Delta}cg1360$ mutant reached $9.2{\pm}0.3g/l$ in shake flasks, which was 14% higher than that of the V-10 strain. Thus, Cg1360 can be used as an effective engineering target by altering energy metabolism for the enhancement of amino acid production in C. glutamicum.
Comparative effects of $PGF_{2{\alpha}}$ and ouabain on the isolated rat(Sprague-Dowley) atria were studied. The isolated rat atria were prepared for isometric myography in the isolated organ bath containing Feigen's solution perfused with 95% $O_2$ and 5% $CO_2$, and the pH of the medium was maintained at 7.4. The cumulative concentration-response relationship revealed the positive inotropic effects of both drugs with the higher potency of $PGF_{2{\alpha}}$ and the higher efficacy of ouabain. $PGF_{2{\alpha}}$ showed a positive chronotropic effect, but ouabain showed a tendency of increasing the contraction rate. In low-Ca(1.4 mM) medium, the positive inotropic and chronotropic effect of $PGF_{2{\alpha}}$(by $3{\times}10^{-8}M$) were preponderant $(p<0.05{\sim}p<0.005)$ over those of ouabain(by $3{\times}10^{-3}M$). $Ca^{++}$-addition(cumulative, to 2.8, 4.2, 5.6, and 7.0 mM) into the medium evoked the more sensitive response in the $PGF_{2{\alpha}}$ group than in the ouabain group. In low-K(2.8 mM) medium, the $PGF_{2{\alpha}}a(3{\times}10^{-8}M)$ group and the ouabain$(3{\times}10^{-3}M)$ group showed similar tensions(DT and RT) and contraction rates. And both group showed significantly(p<0.05p<0.01) higher tensions and contraction rates than those of the control group. By the cumulative addition of the $K^+$(to 4.2, 5.6, 7.0 and 8.4 mM), only the DT of the $PGF_{2{\alpha}}$ group was sustained at signifcantly$(p<0.05{\sim}p<0.01)$ higher level than the DT of the control group. The $K^+$-addition inhibited the positive inotropic effect of ouabain significantly (p<0.05). The cumulative addition of lidocaine in high concentrations $(1{\times}10^{-5}\;to\;1{\times}10^{-3}M)$ evoked no significant influence on the intropic activities of $PGF_{2{\alpha}}$ and ouabain, but significant ${\beta}$-blockade with propranolol could not inhibit the positive intropic and chronotropic effect of $PGF_{2{\alpha}}$. In conclusion, it is presumed that $PGF_{2{\alpha}}$ may have some more active mechanism of accelerating the influx of $Ca^{++}$ across the cell membrane of the isolated rat atria as compared with ouabain, and the action site may be located at the cell membrane. As a supposition which needs further investigations, it is presumed that $PGF_{2{\alpha}}$ may have its specific membrane receptors on the atrial muscle or sinus node cells.
The anti platelet effects of a novel guanidine derivative, KR-32570 ([5-(2-methoxy-5-chlorophenyl) furan-2-ylcarbonyl]guanidine), were investigated with an emphasis on the mechanisms underlying its inhibition of collagen-induced platelet aggregation. KR-32570 significantly inhibited the aggregation of washed rabbit platelets induced by collagen $(10{\mu}g/mL)$, thrombin (0.05 U/mL), arachidonic acid $(100{\mu}M)$, a thromboxane (TX) $A_2$ mimetic agent U46619 (9,11-dideoxy-9,11-methanoepoxy-prostaglandin $F_2,\;1{\mu}M$) and a $Ca^{2+}$ ATPase inhibitor thapsigargin $(0.5{\mu}M)$ ($IC_{50}$ values: $13.8{\pm}1.8,\;26.3{\pm}1.2,\;8.5{\pm}0.9,\;4.3{\pm}1.7\;and\;49.8{\pm}1.4{\mu}M$, respectively). KR-32570 inhibited the collagen-induced liberation of $[^3H]$arachidonic acid from the platelets in a concentration dependent manner with complete inhibition being observed at $50{\mu}M$. The $TXA_2$ synthase assay showed that KR-32570 also inhibited the conversion of the substrate $PGH_2$ to $TXB_2$ at all concentrations. Furthermore, KR-32570 significantly inhibited the $[Ca^{2+}]_i$ mobilization induced by collagen at $50{\mu}M$, which is the concentration that completely inhibits platelet aggregation. KR-32570 also decreased the level of collagen $(10{\mu}g/mL)$induced secretion of serotonin from the dense-granule contents of platelets, and inhibited the NHE-1-mediated rabbit platelet swelling induced by intracellular acidification. These results suggest that the antiplatelet activity of KR-32570 against collagen-induced platelet aggregation is mediated mainly by inhibiting the release of arachidonic acid, $TXA_2$ synthase, the mobilization of cytosolic $Ca^{2+}$ and NHE-1.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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