Mechanical stimuli to the cardiac myocytes initiate many biochemical and physiological events. Stretch-activated cation channels have been suggested to mediate these events. In this study, cell-attached and inside-out excised-patch clamp methods were used to identify stretch-activated cation channels in adult rat atrial myocytes. Channel openings were increased in cell-attached configuration when negative pressure was applied to the pipette, and also in inside-out excised patches by negative pressure. The channel was not permeable to $Cl^-$, $Na^+$ and $Cs^+$, but selectively permeable to $K^+$, and the degree of activation was dependent on the magnitude of negative pressure (full activation at ${\sim} -50 mmHg). In symmetrical 140 mM KCl, the slope conductance was $51.2{\pm}3$ pS between the potentials of -80 and 0 mV and $55{\pm}6$ pS between 0 and +80 mV (n=5). Glibenclamide ($100{mu}M$) or ATP (2 mM) failed to block the channel openings, indicating that it is not ATP-sensitive $K^+$ channel. Arachidonic acid ($30{mu}M$), which has been shown to activate a $K^+$ channel cooperatively with membrane stretch, did not affect the channel activity. $GdCl_3$ ($100{mu}M$) also did not alter the activity. These results demonstrate that the mechanical stretch in rat atrial myocytes activates a novel $K^+$-selective cation channel, which is not associated with other $K^+$ channels such as ATP-sensitive and arachidonic acid-activated $K^+$ channel.
XeCl 엑시머 레이저를 횡방향의 전자빔으로 여기하여 이의 출력특성을 조사하였다. 전자빔의 출력은 880kV, 21kA(70ns, FWHM)이며 전자빔의 전류밀도는 다이오드(A-K) 간격과 공진기 외부에 설치한 펄스자계코일(4.7kG)로 제어하였다. 레이저 매질에 주입되는 전자빔의 축적에너지는 35J(4기압)이다. 축적에너지는 Radcolor film의 감광면적과 압력상승법에 의해 측정한 가스매질의 상승압력으로부터 환산된 수치이며, 이 때의 여기체적은 $320cm^{3}$이었다. 레이저 가스의 혼합비율은 HCl/Xe/Ar=0.2/6.3/93.5%이고 총압력이 3기압일 때, 최대효율 1.7%를 얻었다. 이 때의 출력에너지, 특성에너지는 각각 0.52J, 1.7J/l이었다. 실험결과의 분석을 위해 컴퓨터 시뮬레이션코드를 완성하였다. 시뮬레이션 결과는 실험결과와 잘 부합하고 있음을 확인하였고 그 결과를 이용하여 XeCl의 형성채널, 완화채널, 308nm의 흡수채널을 이론적으로 설명하였다.
목적: Guinea pig heart의 ATP sensitive $K^{+}$ channel xenopus oocyte에 발현시켜 연구하고져 본 실험을 행하였다. 실험방법: 기니픽 심장으로부터 ,RNA를 분리하여 50ng/$\mu$l의 농도로 50nl를 xenopusdp 주입하였다. Xenpus oocyte에서 conventional electrode를 이용 막전휘를 측정하였고, pH selective 미세전극으로 세포내 pH를 측정하였다. 막전위에 미치는 potassium channel opener, blocker, KCN의 작용을 관찰하였다. 결과: 기니픽 심장 mRNA를 주입하거나 주입하지 않은 xenopus oocyte에서 $K^{+}$channel opener인 cromakalin, RP49356등은 과분극을 일으키지 못하였다. 그러나 세포내 ATP 감소제인 KCN은 농도 의존적으로 과분극을 일으켰으나 ,glibenclamide에 의해 차단되는 않았다. mRNA를 주입한 oocyte에서 Na-H 자극제인 NH$_4$Cl은 pH 변동을 일으켜 NA-H exchange를 expression 시켰다. 결론: Xenopus oocyte는 cromakalin등에 의해 open되는 $K^{+}$channel 은 없었고, 기니픽 심근의 ATP sensitive $K^{+}$channel로 expression 되지 않았으나 Na-H exchange 는 expression 됨을 알 수 있었다. KCN으로 open 되는 $K^{+}$channel이 있었으나 glibenclamide에는 차단되지 않는 channel이였다.
Ha, Kotdaji;Kim, Sung-Young;Hong, Chansik;Myeong, Jongyun;Shin, Jin-Hong;Kim, Dae-Seong;Jeon, Ju-Hong;So, Insuk
Molecules and Cells
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제37권3호
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pp.202-212
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2014
ClC-1 is a member of a large family of voltage-gated chloride channels, abundantly expressed in human skeletal muscle. Mutations in ClC-1 are associated with myotonia congenita (MC) and result in loss of regulation of membrane excitability in skeletal muscle. We studied the electrophysiological characteristics of six mutants found among Korean MC patients, using patch clamp methods in HEK293 cells. Here, we found that the autosomal dominant mutants S189C and P480S displayed reduced chloride conductances compared to WT. Autosomal recessive mutant M128I did not show a typical rapid deactivation of Cl- currents. While sporadic mutant G523D displayed sustained activation of $Cl^-$ currents in the whole cell traces, the other sporadic mutants, M373L and M609K, demonstrated rapid deactivations. $V_{1/2}$ of these mutants was shifted to more depolarizing potentials. In order to identify potential effects on gating processes, slow and fast gating was analyzed for each mutant. We show that slow gating of the mutants tends to be shifted toward more positive potentials in comparison to WT. Collectively, these six mutants found among Korean patients demonstrated modifications of channel gating behaviors and reduced chloride conductances that likely contribute to the physiologic changes of MC.
Park, Myoung-Kyu;Richard Lomax;Alexei V. Tepikin;Ole H. Petersen
한국생물물리학회:학술대회논문집
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한국생물물리학회 2001년도 학술 발표회 진행표 및 논문초록
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pp.27-27
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2001
In exocrine acinar cells, $Ca^{2+}$ -activated Cl$^{[-10]}$ channels in the apical membrane are essential for fluid secretion, but it is unclear whether such channels are important for Cl$^{[-10]}$ uptake at the base. Whole cell current recording, combined with local uncaging of caged $Ca^{2+}$, was used to reveal the Cl$^{[-10]}$ channel distribution in mouse pancreatic acinar cells, where ~90% of the current activated by $Ca^{2+}$ in response toacetylcholine was carried by Cl$^{[-10]}$ .(omitted)
The infrared multiphoton decomposition of trichloroethylene-H(TCE-H) and trichloroehtylene-D(TCE-D) was studied by using the high power $CO_2$ laser. The pressure dependence of TCE-H decomposition showed that the HCl elimination channel to form ClC ≡ CCl was the major step at high pressures, while the HC ≡ CCl formation step became important at low pressures. $Cl_2C$ = CHCl ${\rightarrow}$ (high pressure) ClC ${\equiv}$ CCl + HCl ${\rightarrow}$ (low pressure) HC ${\equiv}$ CCl + 2Cl${\cdot}$($Cl_2$) The IRMPD of TCE-H and TCE-D mixtures with 10P(20) laser line showed that optimum conditions of large isotope selectivity were the low system pressures and high laser powers. The experimentally observed dependence of the branching ratios on the pressure and laser fluence, and the isotope selectivity coefficients were quantitatively explained by using the modified energy grained master equations (EGME) model.
Cytolysin produced by Vibrio vulnificus has been incriminated as one of the important virulence determinants in V. vulnificus infection. Ion selectivity of cytolysin-induced pores was examined in a CPAE cell, a cell line of pulmonary endothelial cell, using inside-out patch clamp techniques. In symmetrical NaCl concentration (140 mM), intracellular or extracellular application of cytolysin formed ion-permeable pores with a single channel conductance of $37.5{\pm}4.0$ pS. The pore currents were consistently maintained after washout of cytolysin. Replacement of $Na^+$ in bath solution with monovalent ions $(K^+,\;Cs^+\;or\;TEA^+)$ or with divalent ions $(Mg^{2+},\;Ca^{2+})$ did not affect the pore currents. When the NaCl concentration in bath solution was lowered from 140 to 60 and 20 mM, the reversal potential shifted from 0 to -11.8 and -28.2 mV, respectively. The relative permeability of the cytolysin pores to anions measured at $-40\;mV\;was\;Cl^-\;=\;NO_2^-\;{\geq}\;Br^-\;=\;I^-\;> \;SCN^-\;>\;acetate^-\;>\;isethionate^-\;>\;ascorbic acid^-\;>\;EDTA^{2-},$ in descending order. The cytolysin-induced pore current was blocked by $CI^-$ channel blockers or nucleotides. These results indicate that V. vulnificus cytolysin forms anion-selective pores in CPAE cells.
Dan, Yoichiro;Kishida, Masahiro;Ikuta, Tatsuya;Takahashi, Koji
한국추진공학회:학술대회논문집
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한국추진공학회 2004년도 제22회 춘계학술대회논문집
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pp.597-600
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2004
Fabrication technique and performance test of catalytic micro propulsion are treated based on MEMS technology. This propulsion is designed to use hydrogen peroxide as liquid mono-propellant for attitude control of pica-satellite. The propellant is fed into the micro reactor channel and decomposed into hot gas yielding controllable thrust by catalyst. In order to increase the efficiency of the reaction that depends on the contact area of propellant and catalyst, porous surface formation on the channel accompanied by platinum particle deposition has been performed using H$_2$PtCl$_{6}$ solution as a precursor. Several thrusters were fabricated in different concentration of H$_2$PtCl$_{6}$ solution to determine the best quantity of Pt particles. For the comparison of the performance of each thruster, the volume of oxygen generated by the decomposition of hydrogen peroxide and the thrust were measured.red.
Park, Su-Jung;Choi, Won-Woo;Kwon, Oh-Sang;Chung, Jin-Ho;Eun, Hee-Chul;Earm, Young-E;Kim, Sung-Joon
The Korean Journal of Physiology and Pharmacology
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제12권4호
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pp.177-183
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2008
The layers of keratinocytes form an acid mantle on the surface of the skin. Herein, we investigated the effects of acidic pH on the membrane current and $[Ca^{2+}]_c$ of human primary keratinocytes from foreskins and human keratinocyte cell line (HaCaT). Acidic extracellular pH ($pH_e{\leq}5.5$) activated outwardly rectifying $Cl^-$ current ($I_{Cl,pH}$) with slow kinetics of voltage-dependent activation. $I_{Cl,pH}$ was potently inhibited by an anion channel blocker 4,4'-diisothiocyanostilbene-2,2'-disulphonic acid (DIDS, 73.5% inhibition at 1${\mu}$M). $I_{Cl,pH}$ became more sensitive to $pH_e$ by raising temperature from $24^{circ}C$ to $37^{circ}C$. HaCaT cells also expressed $Ca^{2+}$-activated $Cl^-$ current ($I_{Cl,Ca}$), and the amplitude of $I_{Cl,Ca}$ was increased by relatively weak acidic $pH_e$ (7.0 and 6.8). Interestingly, the acidic $pH_e$ (5.0) also induced a sharp increase in the intracellular [$Ca^{2+}$] (${\triangle}[Ca^{2+}]_{acid}$) of HaCaT cells. The ${\triangle}[Ca^{2+}]_{acid}$ was independent of extracellular $Ca^{2+}$, and was abolished by the pretreatment with PLC inhibitor, U73122. In primary human keratinocytes, 5 out of 28 tested cells showed ${\triangle}[Ca^{2+}]_{acid}$. In summary, we found $I_{Cl,pH}$ and ${\triangle}[Ca^{2+}]_{acid}$ in human keratinocytes, and these ionic signals might have implication in pathophysiological responses and differentiation of epidermal keratinocytes.
Lim, Chae Woo;Kim, Sang Hee;Choi, Hyong Woo;Luan, Sheng;Lee, Sung Chul
The Plant Pathology Journal
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제35권6호
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pp.684-691
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2019
Evolution of adaptive mechanisms to abiotic stress is essential for plant growth and development. Plants adapt to stress conditions by activating the abscisic acid (ABA) signaling pathway. It has been suggested that the ABA receptor, clade A protein phosphatase, SnRK2 type kinase, and SLAC1 anion channel are important components of the ABA signaling pathway. In this study, we report that the shaker type potassium (K+) channel, GORK, modulates plant responses to ABA and abiotic stresses. Our results indicate that the full length of PP2CA is needed to interact with the GORK C-terminal region. We identified a loss of function allele in gork that displayed ABA-hyposensitive phenotype. gork and pp2ca mutants showed opposite responses to ABA in seed germination and seedling growth. Additionally, gork mutant was tolerant to the NaCl and mannitol treatments, whereas pp2ca mutant was sensitive to the NaCl and mannitol treatments. Thus, our results indicate that GORK enhances the sensitivity to ABA and negatively regulates the mechanisms involved in high salinity and osmotic stresses via PP2CA-mediated signals.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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