Here, we report the first biochemical and structural characterization of the hypothetical protein HP0902 from Helicobacter pylori, in terms of structural genomics. Gel-permeation chromatography and dynamic light scattering indicated that the protein behaves as a dimer in solution. Circular dichroism spectroscopy showed that HP0902 primarily adopts a $\beta$-structure and the protein was highly thermostable with a denaturing temperature higher than $70^{\circ}C$. Finally, the backbone NMR assignments were obtained on the [$^{13}C,^{15}N$]HP0902 and the secondary structure was determined using the chemical shift data. Additionally, the local flexibility was assessed via a heteronuclear $^1H-^{15}N$ steady state NOE experiment. The results revealed that HP0902 would adopt a compactly folded, all-$\beta$ topology with 11 $\beta$-strands. All of the results clearly support the notion that HP0902 belongs to the cupin superfamily of proteins.
호염성 세균이 갖는 특성 즉, 다른 균에 의한 오염 감소, 세포벽 파괴의 수월성, 용매를 이용하지 않는 색소추출 등을 응용하기 위한 기초 자료를 얻기 위하여 호염성 세균인 Haloarcular sp. EH-1 으로부터 추출한 천연색소를 bioreactor 에서 배양한 후 색소의 함량을 조사한 결과 3 L 용량에서는 8 83.1 mg%, 5 L 용량에서는 82.7 mg%의 카로테노이드를 함 유하는 것으로 나타났다 이들의 주된 성분은 $\beta$-c따otene (8.1 %), $\beta$-hydroxyechinenone (42.0%) 및 astaxanthin(25.0% )으로 동정 되었으며, 이들 성분을 동정하기 위하여 표품과의 co- TLC, co-HPLC, 가시부 홉수스펙트럼, 화학적 변화 등을 조사하였다.
This study investigated the effect of subconjunctival injections of bevacizumab, an anti-VEGF antibody, on processes involved in corneal wound healing after alkali burn injury. Mice were divided into three groups: Group 1 was the saline-treated control, group 2 received subconjunctival injection of bevacizumab 1hr after injury and group 3 received bevacizumab 1 hr and 4 days after injury. Cornea neovascularization and opacity were observed using a slit lamp microscope. Corneal repair was assessed through histological analysis and immunostaining for CD31, $\alpha$-SMA, collagen I, and TGF-$\beta$2 7 days post-injury. In group 3, injection of bevacizumab significantly lowered neovascularization and improved corneal transparency. Immunostaining analysis demonstrated a reduction in CD31, $\alpha$-SMA and TGF-$\beta$2 levels in stroma compared to group 1. These results indicate that bevacizumab may be useful in reducing neovascularization and improving corneal transparency following corneal alkali burn injury by accelerating regeneration of the basement membrane.
국내에서 자생하고 있는 더위지기와 사철쑥의 정유성분 조성의 차이점을 비교하기 위하여 각 시료로부터 수증기증류에 의해 정유를 분리한 다음 GC-MS 분석결과 및 문헌에 보고된 각 성분의 retention index 비교에 의해 성분을 동정하였다. 국내의 2개 지역에서 수집한 더위지기에서 분리한 정유에서 60종의 성분을 동정하였으며, 그중 한 시료에서는 iso-pinocamphone(31.64%), 1,8-cineole(21.55%), ${\beta}-pinene$(4.46%), pinocarvone(3.72%), myrtenal(3.42%) 및 trans-pinocarvel(3.14%)이 주요 구성성분이었으나 다른 시료에서는 camphor(26.99%), 1,8-cineole(11.02%), ${\alpha}-terpineol$(7.63%), borneol(4.10%), camphene(3.97%) 및 artemisia ketone(3.84%)이 주요 구성성분이었다. 또한 2개 지역에서 수집한 사철쑥에서는 80종의 성분을 동정하였으며, 두 시료간에 구성성분이나 성분별 조성비율은 유사한 편이었으나 그 중에서도 capillene$(26.01{\sim}30.31%)$, ${\beta}-pinene(8.55{\sim}18.38%)$, ${\beta}-caryophyllene(8.80{\sim}13.70%)$, $cis,trans- {\alpha}-farnesene(2.10{\sim}7.38%)$, ${\beta}-himachalene(1.57{\sim}5.57%)$ 및 germacrene D$(2.27{\sim}5.46%)$가 주요 구성성분이었다. 더위지기와 사철쑥의 정유 성분 조성상의 뚜렷한 차이점으로서 더위지기의 정유에서는 사철쑥에서 검출되지 않은 iso-pinocamphone 또는 camphor, 1,8-cineole과 같은 monoterpenoid 화합물의 함유비율이 높은 반면 사철쑥에서는 더위지기에서 검출되지 않은 acetylene화합물인 capillene 이외에도 sesquiterpenoid 화합물의 함유비율이 높은 것이 특징이었다.
Objectives: This study was performed to screen target-specific inhibitors of ${\beta}$-catenin/TCF signaling whose functional activation plays an important role in early events in carcinogenesis. Methods: To investigate the activation or suppression of ${\beta}$-catenin/TCF transcription, we established a transiently transfected cell line with a constitutively active ${\beta}$-catenin mutant gene whose product is not degraded. This cell line was also co-transfected with luciferase reporter gene constructs containing either an optimized (TOPflash) or mutant (FOPflash) TCF-binding element. We investigated cytotoxic effects using a 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-5-(3-carboxymethoxyphenyl)-2-(4-sulfophenyl)-2H-tetrazolium salt (MTS) assay. To find effective inhibitors of ${\beta}$-catenin/TCF signaling from medicinal herbs, the crude extracts of 99 types of medicinal herbs were screened using a luciferase assay system in HEK-293 and SH-SY5y cells. Results: At a concentration of $50{\mu}g$/ml, extracts of Angelica koreanae radix, Cannabis sativa semen, Ephedrae intermedia Schrenk radix, and Vitis rotundifolia fruit showed the following inhibitory effects on ${\beta}$-catenin/TCF signaling: $40{\pm}5.6%$, $23{\pm}6.1%$, $8{\pm}5.1%$, and $22{\pm}9.8%$ in ${\beta}$-catenin-activated HEK-293 cells and $9{\pm}4.7%$, $39{\pm}8.1%$, $39{\pm}6.4%$, and $42{\pm}10.1%$ in ${\beta}$-catenin-activated SH-SY5y cells, respectively. Crude extracts of E. radix were isolated by silica gel column chromatography, and two non-polar fractions of these extracts showed inhibitory effects on ${\beta}$-catenin/TCF signaling. Conclusions: In this study, we established a transiently transfected cell line as a screening system and found that various medicinal herb extracts had inhibitory effects on ${\beta}$signaling.
볼락의 성장단계에 따른 차등발현 유전자를 탐색하기 위하여 6개월령 및 18개월령 근육조직을 사용하여 subtracted cDNA library를 제작하였고, 각각의 연령에서 발현량 차이를 나타낸 202개의 cDNA 단편을 확보하였으며, 발현량 차이가 뚜렷한 32개의 cDNA 클론은 성장단계별 특이발현 후 보유전자로 선발하여 염기서열을 분석하였다. Myosin, adenylate kinase, calsequestrin, dystrobrevin beta, diphosphate kinase 유전자는 6개월령 근육조직에서 발현량이 많았으며, desmin, TGFBR2 (transforming growth factor-beta receptor), creatine kinase (muscle type), cathepsin D 유전자는 18개월령 근육조직에서 발현량이 많았다. 볼락의 성장초기와 성장절정기에서 차등발현 양상을 나타낸 유전자는 6, 18, 30, 42개월령 근육조직에서 연령 증가에 따른 발현양상을 분석하였으며, dystrobrevin beta와 diphosphate kinase-Z1은 6개월령 이후에는 발현량이 급격히 감소하여 18개월령, 30개월령 및 42개월령에서는 발현량이 극히 적었으며, creatine kinase (muscle type)와 cathepsin D 유전자는 연령 이 증가함에 따라 발현량이 증가되어 18개월령 이후, 30개월령과 42개월령 근육조직에서도 발현량이 많았다. 이와 같이 성장단계에 따른 차등발현 유전자를 탐색하고 연령 증가에 따른 발현양상을 비교 분석한 결과로부터 본 연구에서는 어류의 성장 초기단계 근육조직에서는 근육수축 관련 유전자가 많이 발현되고, 성장 절정기에는 근육 내 에너지 양 조절 관련 유전자가 많이 발현되는 것을 확인하였다.
Reserpine은 항고혈압제로서 알츠하이머질병의 증상을 나타내는 Caenorhabditis elegans에서 세포독성을 감소시켜 마비를 억제하고 수명을 연장시키는 것으로 알려져 있다. 본 연구에서는 이러한 reserpine의 효능을 포유동물에서 확인하기 위하여, 알츠하이머질병의 병리적 특성과 연관된 주요인자의 변화를 30일 동안 reserpine을 투여한 Tg2576 마우스에서 관찰하였다. 그 결과, 공격행동(aggressive behavior)은 vehicle 투여 그룹에 비하여 reserpine 투여 그룹에서 유의적으로 감소하였으나 사회적 접촉(social contact)은 유의적인 변화가 없었다. 뇌의 해마부분에서 알츠하이머질병의 원인 중 하나인 $A{\beta}$-42의 축적은 reserpine 투여 그룹에서 유의적으로 감소하였고, $A{\beta}$-42의 농도도 대조군에 비하여 reserpine 투여 그룹에서 감소하였다. 더불어, ${\gamma}$-secretase의 구성단백질 중에서 PS-2, Pen-2, APH-1의 발현은 대조군에 비하여 reserpine 투여군에서 유의적으로 감소하였으나 NCT 발현은 변화가 없었다. 혈청에서 NGF의 농도는 Tg2576 마우스에서 감소하였다가 reserpine 투여한 그룹에서 유의적으로 증가하였으며, high affinity receptor의 신호전달과정에 포함된 단백질 중에서 reserpine 투여 그룹은 TrkA의 인산화가 증가하고 ERK 인산화는 감소되었다. 한편 low affinity receptor의 신호전달과정에서, $p75^{NTR}$과 Bcl-2의 발현은 vehicle 그룹에 비하여 reserpine 투여 그룹에서 유의적으로 발현이 증가하였으나 RhoA의 발현은 reserpine 투여 그룹에서 감소하였다. 따라서 이러한 결과는 reserpine은 포유동물 치매모델인 Tg2576 마우스에서 행동학적 변화, $A{\beta}$-42의 축적, NGF의 농도, NGF신호전달의 변화 등을 유도하며, 향후 치매치료제로서 가능성을 제시하고 있다.
Purpose: The purpose of this study was to examine burnout and job satisfaction among nurses based on Job Demand-Resource Model. Methods: A survey using a structured questionnaire was conducted with 464 hospital nurses. Analysis of data was done with both SPSS Win 17.0 for descriptive statistics and AMOS 18.0 for the structural equation model. Results: The hypothetical model yielded the following Chi-square=34.13 (p=<.001), df=6, GFI=.98, AGFI=.92, CFI=.94, RMSR=.02, NFI=.93, IFI=.94 and showed good fit indices. Workload had a direct effect on emotional exhaustion (${\beta}$=0.39), whereas supervisor support had direct effects on emotional exhaustion (${\beta}$=-0.24), depersonalization (${\beta}$=-0.11), and low personal accomplishment (${\beta}$=-0.22). Emotional exhaustion (${\beta}$=-0.42), depersonalization (${\beta}$=-0.11) and low personal accomplishment (${\beta}$=-0.36) had significant direct effects on job satisfaction. Conclusion: The results suggest that nurses' workload should be decreased and supervisor's support should be increased in order to retain nurses. Further study with a longitudinal design is necessary.
Objectives : This study was investigated the effects of the root of Polygala tenuifolia (POL) on learning and memory impairment induced by chronic cerebral hypoperfusion in rats. Methods : Chronic cerebral hypoperfusion was produced by permanent bilateral common carotid artery occlusion (pBCAO). POL was administered orally once a day (130 mg/kg of water-extract) for 28 days starting at 4 weeks after the pBCAO. The acquisition of learning and the retention of memory were tested on 9th week after the pBCAO using the Morris water maze. In addition, effects of POL on $A{\beta}$ generation and expressions of APP and BACE1 were observed in the hippocampus of rats. Results : POL significantly prolonged the swimming time spent in target quadrant and significantly reduced the swimming time spent in the quadrant far from the target. POL significantly increased the percentage of swim in the targer quadrant in the retention test, while POL was not effective on the escape latencies in the acquisition training trials. POL significantly reduced the levels of $A{\beta}_{(1-40)}$ and $A{\beta}_{(1-42)}$ in the cerebral cortex and the level of $A{\beta}_{(1-42)}$ in the hippocampus produced by chronic cerebral hypoperfusion. POL also significantly attenuated the up-regulation of APP and BACE1 expression in the hippocampus produced by chronic cerebral hypoperfusion. Conclusions : The results show that POL alleviated memory deficit and up-regulation of $A{\beta}$ and BACE1 expressions in the hippocampus. This result suggests that POL may exert ameliorating effect on memory deficit through inhibition of ${\beta}$-secretase activity and $A{\beta}$ generation.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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