This study was done to investigate the relationship between ultrasonograph fat density (ULFD) using objective measurement and serum enzymes for testing liver function in 101 healthy adults(43 males and 58 females). Average serum enzyme activities in males and females were GOT27.111U/L and 22.46IU/L, GPT 34.06IU/L and 18.501U/L, and ${\gamma}$-GTP 37.67IU/L and 17.201U/L, respectively. Males showed significantly higher activities of GPT and ${\gamma}$-GTP than females. ULFD of the obese group (BMI$\geq$25) was significantly higher than that of the nonobese group. GOT, GPT, and ${\gamma}$-GTP tended to be high in the obese group. GPT and ${\gamma}$-GTP of the high TG group (TG$\geq$170) tended to be markedly high for males, but not for females. GPT was positively correlated with ULFD, body weight , and weight-to-height, ratio, and ${\gamma}$-GTP was positively correlated with body weight, weight-to-height ratio. BNI, and KI. ULFD and ${\gamma}$-GTP were positively correlated with serum TG. These results suggests that , among serum enzymes for testing liver function, GPT has a close relationship with ULFD using objective measurement, while GOT does not. Also , ${\gamma}$-GTP has a close relationship with parameters for obesity.
Objective : To investigate gamma-Glutamyltransferase (${\gamma}-GTP$) and its related factors in male industrial workers. Method : Five hundred and tony male workers without heart disease, diabetes mellitus, renal disease, hepatitis, and other liver diseases were surveyed in October 1998. Blood samples were collected to test for ${\gamma}-GTP$, total-cholesterol and fasting blood glucose. A self-administered questionnaire survey on life style was also done. Results : The total geometric mean value of ${\gamma}-GTP$ was 30.6 U/L. According to a univariate analysis: age, BMI(body mass index, $kg/m^2$), alcohol consumption, current smoking, stress, diastolic blood pressure, and blood total cholesterol were significantly associated with ${\gamma}-GTP$(p<0.05). From a multiple regression analysis: BMI, alcohol consumption, current smoking, diastolic blood pressure and total-cholesterol were significantly related to ${\gamma}-GTP$(p<0.05). Coffee consumption was negatively related to ${\gamma}-GTP$, but not significantly. Conclusion : We recommend that a change in health behavior (i.e. reducing alcohol intake, controlling BMI and not smoking) is necessary to decrease ${\gamma}-GTP$ in male workers.
1,281 male subjects who had been examined more than 3 times for regular check-up in one human dock center of the university hospital were studied between 1990-1995, to evaluate the effect of health counselling with life style and $\gamma-GTP$ value between 1054 normal group without intervention and 227 abnormal group with intervention, ages from 30 to 69 years old. Total mean value of $\gamma-GTP$ was $45.7{\pm}40.7$ unit with highest $\gamma-GTP$ value in age group 50-59 on initial examination. Total abnormal rate was 17.7% with the highest abnormal rate of 18.6% in age group 50-59. Initially, the value of $\gamma-GTP$ was significantly different according to the degree of alcohol intake, relative weight and smoking in normal group(p<0.01) not in abnormal group. In conclusion, the value of $\gamma-GTP$ were significantly increasing in normal group without intervention and significantly decreasing in abnormal group with intervention(p<0.05), which suggests the effect of health counselling, such as the recommendation to change the health behaviour.
Present experiment was performed in order to establish the optimum conditions for quantitation of ${\gamma}$-GTP and AGS activities in rat urine and investigate the applicability of the these enzymes in experimental assessment of nephrotoxicity in rats. The results obtained were as follows. 1. The optimal pH of Tris-BCI buffer containing glycylglycine for determination of urinary ${\gamma}$-GTP activity was 7.6(37$^{\circ}C$). 2. The Michaelis constant of urinary ${\gamma}$-GTP ranged from 1.1 to 1.2 mmol/$\ell$. 3. The optimal pH of citrate buffer for determination of urinary AGS activity was 3.6(37$^{\circ}C$). 4. The Michaelis constant of urinary AGS ranged from 0.8 to 0.9mmo1/$\ell$. 5. Coefficient of variance for within-run imprecision of urinary ${\gamma}$-GTP ranged from 3.8 to 6.4% and that of urinary AGS ranged from 2.5 to 4.1%. 6. There was no significant difference between gel-filtered samples and crude samples in the mean activity of urinary ${\gamma}$-GTP and the intra-individual differences by gel-filtration were either increased or decreased. Mean values of ${\gamma}$ -GTP activities in gel-filtered samples and crude samples were 1570 and 1590 U/$\ell$, repectively. 7. The mean activity of urinary AGS increased significantly after gel-filtration and all the individual urines revealed higher activities after gel-filtration. 8. ${\gamma}$-GTP and AGS activities were linear to 135 and 7U/$\ell$, respectively. 9. Urinary ${\gamma}$-GTP and AGS excretion before administration of potassium dichromate were 22.1 ${\pm}$ 11.2 and 0.5${\pm}$0.2 U/24hrsㆍkg body weight respectively and increased significantly to 102.3${\pm}$44.5 and 5.8${\pm}$3.30/24hrsㆍkg body weight respectively within 24 hours after administration. 10. BUN increased continuously from 24 hours following exposure to potassium dichromate in all 10 rats. From these findings it is concluded that the urinary ${\gamma}$-GTP and AGS excretions are early and sensitive indicators for nephrotoxicity assessment in rat.
Bacillus subtilis 돌연변이주 중 ${\gamma}-GTP$활성이 높은 SM-2와 SM-10을 융합시켜 획득한 융합주 중 ${\gamma}-GTP$활성이 높은 융합주 FG-21의 배양적 특성을 조사하였다. 융합주 FG-21에 의한 ${\gamma}-GTP$의 생산은 1% glycerol, 1% peptone, 0.1% citric acid, 5 mM $K_2HPO_4$, 1 mM $FeCl_3$, 1 mM $MgCl_2$, 1 mM $NH_4Cl$, pH 7.0의 배지에 의해 $37^{\circ}C$에서 36시간 배양했을 때 621 U/mL으로 최대한 활성을 보였다. 융합주 FG-21이 생산한 biopolymer A가 단백질함량이 38.4%이고 B. subtilis K-1이 생산하는 biopolymer B의 단백질함량은 19.3%로 융합주 FG-21이 생산하는 Biopolymer A보다 함량이 낮았다. 융합주 FG-21의 biopolymer가 모균주의 biopolymer B보다 단백질함량이 높은 것은 상대적으로 높은 ${\gamma}-GTP$활성이 높아서 생성된 PGA가 levan보다 함량이 많기 때문인 것으로 사료된다. 총당함량은 biopolymer A가 58.5%, biopolymer B가 76.5%로 나타났다. 융합주 FG-21과 모균주가 생산하는 biopolymer의 단백질함량과 총당함량비는 융합주 FG-21이 생성한 biopolymer는 38 : 59. 모균주가 생산한 biopolymer B는 19 : 78의 비율이었고 HPLC 분석에 의한 biopolymer A와 B의 fructose함량은 각각 537.7 mg/g biopolymer, 764.4 mg/g biopolymer으로 나타났다. Biopolymer A와 B의 glutamic acid함량은 각각 163.7 mg/g, 94.3 mg/g이었다. Biopolymer A와 B의 fructose와 glutamic acid의 함량비는 각각 78 : 22, 89 : 11의 비로 함유되어 있었다. 따라서 융합주에 의해 생산된 biopolymer는 모균주보다 구성상태가 변화된 biopolymer를 생산한 것으로 판단되어 fusion과 같은 균주개량을 통하여 물질의 구성적, 물질적 변화된 biopolymer를 생산할 수 있을 것이라 사료된다.
뉴론에서 ATP는 분비 과립내에 신경전달물질과 함께 다량 저장되어 있다가 신경전달물질과 함께 분비되는 것으로 알려져 있으므로 신경전달물질의 자극-분비(stimulus-secretion) coupling 과정에 있어 중요한 조절작용을 할 것으로 기대된다. 그러므로 본 연구에서는 뉴론과 그 발생학적 기원이 동일한 부신수질 세포(adrenal chromaffin cell)를 대상으로 하여 세포막 칼슘통로를 통한 세포막 전류에 미치는 ATP의 영향을 측정함으로써 신경전달물질이 자극-분비 coupling 과정에 작용하는 ATP의 조절 작용을 알아보고자 하였다. 부신수질 세포의 칼슘통로를 통한 세포막 전류는 패치클램프 테크닉으로 기록하였다. 10 mM $Ba^{2+}$을 포함한 세포 외 용액에서, $Ba^{2+}$ current는 0.1 mM ATP를 세포외부에 처치했을 때, 평균 $36{\pm}6%$ (n=6) 감소되어 나타났고 ATP를 씻어준 후 전류는 다시 회복되는 가역적 반응을 보였다. ATP의 전류 억제 기전을 알아보고자 칼슘통로에서 관찰되는 현상 중의 하나인 소통(facilitation)현상을 기록하였다. +80 mV의 큰 prepulse를 준 후 바로 테스트 펄스를 주며 측정한 전류는 큰 prepulse에 의해 억제효과가 풀리는(disinhibition) 현상을 나타내었다. ATP 처치 후 큰 자극을 주어 $37{\pm}5%$ (n=11)의 $Ba^{2+}$ 전류 증가가 있었고 이는 ATP가 없는 상태에서 순수하게 큰 자극에 의해 소통되는 $25{\pm}3%$ (n=12)과 유의한 차이를 보였다(p<0.05). ATP의 억제 기전이 G-protein을 매개로 한 것인지를 알아보고자 가수분해 되지 않는 GTP 유도체인 $GTP{\gamma}S$를 세포 내에 준 후 $Ba^{2+}$ 전류를 기록하였다. $GTP{\gamma}S$에 의해 55%의 전류 크기의 감소가 있었고 이 환경에서 큰 prepulse를 인가하였을 때 $34{\pm}4%$ (n=19)의 소통현상을 보였다. 이는 $GTP{\gamma}S$가 없는 환경에서의 $25{\pm}3%$ (n=12)의 소통현상을 보인 것과 유의한 차이를 보였다(p<0.05). $Ba^{2+}$ current trace의 활성화 과정(activation)을 curve-fitting한 결과, control은 single exponential curve로 fitting된 반면, ATP 또는 $GTP{\gamma}S$를 처치한 경우, 그리고 ATP와 $GTP{\gamma}S$ 모두 처치한 경우에서는 double-exponential curve로 가장 잘 fitting이 되었다. 즉, ATP나 $GTP{\gamma}S$를 처치했을 때 모두 전류가 더 느리게 활성화되는 모양을 나타내었고, 이상의 결과로 미루어 ATP와 $GTP{\gamma}S$는 같은 방식으로 칼슘통로를 억제하고, 이러한 억제효과는 세포막에 아주 큰 전압을 걸어주면 칼슘 통로에 결합했던 G-protein이 막전압 의존적으로 떨어짐으로써 소실(disinhibition)된다고 해석된다. 본 연구에서 확인한 ATP의 칼슘통로 억제효과는 자체 크로마핀 세포 또는 주변 세포에서 아드레날린이 적게 분비되게 하는 autocrine 또는 paracrine inhibition 과정의 중요한 기전으로 작용할 것이다.
전통적인 수용체 이론에 따르면 상경적 길항제는 효현제와 수용체의 같은 부위에 작용하지만, 효능(efficacy)이 없기 때문에 생물학적 반응을 일으키지는 않는다. 그러나 최근에 발표되는 자료들에 따르면 모든 길항체의 효능(efficacy)이 0가 아니라 음수도 될 수가 있다고 생각된다. 이러한 음수의 효능을 갖는 약물을 역효현제라 부른다. 본 연구에서는 쥐의 cerebral cortex에서 얻은 membranes을 사용하여, $A_1$ 아데노신 수용체에 작용하는 역효현제를 인구하였다. 8개의 길항제로 알려진 약물들이 G단백에 대한 $[^{35}S]GTP_{\gamma}S$ 결합을 감소시키는 정도를 측정함으로써 역효현제의 특성을 검색하였다. 효현제에 의한 $[^{35}S]GTP_{\gamma}S$ 결합의 증가는 이틀 길항제틀에 의해 완전히 억제되었지만, 검색한 8개의 길항제는 두 군으로 구분되었다. DPCPX를 포함한 7개 길항제는 효현제 부재시의 basal $[^{35}S]GTP_{\gamma}S$ binding을 통계적으로 의의있게 감소시켜 역효현제의 특성을 나타내는 반면, CCS-15943은 basal $[^{35}S]GTP_{\gamma}S$ binding에 아무런 영향을 주지 않았다. NEM을 membranes에 처치하면 PIA에 의한 $[^{35}S]GTP_{\gamma}S$ binding이나 basal binding 둘다 감소하는데 이는 $[^{35}S]GTP_{\gamma}S$ binding의 상당부분이 G단백의 activated state를 나타내는 것을 알 수 있다. 또한 $[^3H]DPCPX$를 이용한 competitive binding assay에서 0.1 mM GTP는 효현제인 PIA의 apparent affinity를 감소시켰으며, DPCPX의 apparent affinity는 증가시키고, CGS-15943에는 아무런 영향을 미치지 않았다. 이것은 상기의 $[^{35}S]GTP_{\gamma}S$ binding의 결과를 뒤받침해 주는 결과라고 생각된다.
일본의 전통 발효 식품인 Natto의 맛 개선을 위한 연구 목적으로 증자대두에 Bacillus natto(NN-1)를 접종하고 마늘 2%와 고추 oleoresin 0.2%를 각각 첨가한 후, $40^{\circ}C$에서 24시간 발효시켜 제조한 Natto에서의 nattokinase 활성은 전 시험구에서 발효 12시간 부터 나타나기 시작하여 점차적으로 증가하였으며 24시간 발효하였을 때의 활성은 마늘과 고추 oleoresin 첨가에 의해 활성도가 약간 낮았다. ${\gamma}-GTP$ 활성은 24시간 발효하였을 때 전 시험구간에 활성도가 비슷하였으며 마늘 2%와 고추 oleoresin 0.2% 첨가에 의해 ${\gamma}-GTP$ 활성에는 영향을 주지 않았다. Protease 활성은 마늘 첨가구에서 발효 8시간에 가장 높은 활성을 나타내었으며 발효 24시간에는 전 시험구간에서 비슷한 활성을 나타내었다. 관능검사 결과, 맛에서는 oleoresin 첨가구와 마늘, 고추 oleoresin 첨가구가 유의성이 인정되었으므로 Natto를 제조할 때 고추 oleoresin 0.2%와 마늘 2%, 고추 oleoresin 0.2%를 혼합하여 Natto를 발효시키는 것이 한국인의 입맛에 적합한 Natto의 맛 개선에 바람직한 것으로 생각된다.
Present experiment was performed to establish the optimal reaction conditions for measurement of urinary gamma-glutamyltranspeptidase(${\gamma}$-GTP), N-acetyl-${\beta}$-D-glucosaminidase (AGS) and alanine aminopeptidase(AAP) activities in bovine and to investigate in vitro stability of the enzymes, within-run imprecision of the methods, and normal ranges. 1. The optimal wavelength for measurement of ${\gamma}$-GTP activity was 545nm. 2. The optimal pH of Tris-HCI buffer containing glycylglycine for measurement of urinary ${\gamma}$-GTP activity was 7.6~7.8(37$^{\circ}C$). 3. Coefficient of variance for within-run imprecision of urinary ${\gamma}$-GTP activity ranged from 4.8 to 7.2% and there was no significant difference among replications, 4. The optimal wavelength for measurement of urinary AGS activity was 405nm. 5. The optimal pH of citrate buffer for measurement urinary of AGS activity was 4.0(37$^{\circ}C$). 6. Coefficient of variance for within-run imprecision of urinary AGS activity ranged from 3.9 to 6.1% and there was no significant difference among replications. 7. The optimal wavelength for measurement of urinary AAP activity was 400nm. 8. The optimal pH of phosphate buffer for measurement of urinary AAP was 7.8. 9. Coefficient of variance for within-run imprecision of urinary AAP activity ranged from 2.5 to 4.8% and there was no significant difference among replications. 10. ${\gamma}$-GTP and AGS activities were increased significantly by gel-filtration. 11. Turbidity interfered with measurement of urinary AAP activity in bovine unless the specimen was gel-filterated. 12. Preservation of the specimen at 5$^{\circ}C$ or -20$^{\circ}C$ did not affect the AGS activity at least for 7 days after collection. 13. Preservation of the specimen at 5$^{\circ}C$ or 20$^{\circ}C$ did not affect the ${\gamma}$-GTP and AAP activities statistically, but some individual specimens revealed fluctuation during preservation. 14. ${\gamma}$-GTP, AGS and AAP activities revealed fluctuation by the tine of the day when the specimen was collected. 15. The normal ranges of urinary ${\gamma}$ -GTP, AGS and AAP activities were 6.60${\pm}$3.26(2.36-14.50), 1.31 ${\pm}$ 0.81(0.33-3.78), and 1.73 ${\pm}$ 0.55(0.77-3.03)U/l. respectively.
세포막 정보전달 경로에서 수용체에 전달된 정보를 세포내로 전달하는데 조절 단백질로 알려진 GTP 결합단백질을 소외 뇌조직으로부터 정제하고 그 분자량등을 관찰하였다. 분쇄한 소의 뇌조직으로부터 세포막을 분리 해내고 1% cholate를 이용하여 세포막 단백질을 얻었으며 DEAE-Sephacel column chromatography를 시행하였다. 여기서 얻은 GTP 결합단백질은 다시 Ultrogel AcA 34 column chromatography, heptylamine-Sepharose column chromatography 순으로 실시하여 $GTP{\gamma}S$와 결합하는 단백질 분획을 모았고 활성도와 일치하는 분획을 얻었다. 전기영동으로 관찰한 결과 $Go{\alpha}$가 분자량 39,000 dalton. $G{\beta}$가 36,000 dalton인 band를 확인하였고 나머지 다른 단백질도 함께 관찰되어 heptylamine-Sepharose 분획을 다시 DEAE-Sephacel column에 적용하여 순수한 band를 구하였다. GTP 결합단백질의 활성화는 GTP가 결합될 때 ${\alpha}$부분과 결합하고 ${\beta}{\gamma}$는 떨어져 나간다. 그러므로 heptylamine-Sepharose column분획의 활성도에서 $Go{\alpha}$의 band 분획과 곡선의 활성도가 일치하고 ${\beta}$는 곡선이 하향하는 분획에서 전기영동상에 관찰되었다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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