The mushroom Coriolus versicolor contains biologically active polysaccharides, most of which belong to the ${\beta}$-glucan group. Diverse physicochemical properties, due to different sources and isolated types of ${\beta}$-glucans, can induce distinct biological activities. We investigated the effects of ${\beta}$-glucans from C. versicolor on phagocytic activity, nitric oxide (NO), TNF-${\alpha}$ production, and signaling of dectin-1, a well-known ${\beta}$-glucan receptor, in macrophages. ${\beta}$-Glucans increased phagocytic activity and TNF-${\alpha}$ and NO-iNOS/eNOS production. Laminarin, a specific inhibitor of dectin-1, showed strong inhibitory effects on phagocytosis and subsequent TNF-${\alpha}$, iNOS, and eNOS production increased by ${\beta}$-glucans, indicating that ${\beta}$-glucans reacts with dectin-1 receptors. We examined whether the aforementioned cytokines were involved in the signaling pathway from the dectin-1 receptor to phagocytosis, and found that the inhibition of iNOS, eNOS, and TNF-${\alpha}$ receptors significantly decreased ${\beta}$-glucan-induced phagocytosis. In conclusion, our study showed that dectin-1 signaling, triggered by ${\beta}$-glucans, subsequently elicited TNF-${\alpha}$ and NO-iNOS/eNOS production, and that these molecules seem to act as secondary molecules that cause eventual phagocytosis by macrophages. These findings suggest that C. versicolor could be used as a nutritional medicine that may be useful in the treatment of infectious disease.
Aspergillus oryzae KCCM 11372 was used to enhance the production of β-glucan using humidity control strategies. Under conditions of 60% humidity, solid-state fermentation (SSF) increased the yields of enzymes (amylase and protease), fungal biomass (ergosterol), and β-glucan. The maximum concentrations obtained were 14800.58 U/g at 72 h, 1068.14 U/g at 120 h, 1.42 mg/g at 72 h, and 12.0% (w/w) at 72 h, respectively. Moreover, the β-glucan containing fermented brown rice (β-glucan-FBR) extracts at concentrations of 25-300 ㎍/ml was considered noncytotoxic to 3T3-L1 preadipocytes. We then studied the inhibitory effects of the extracts on fat droplet formation in 3T3-L1 cells. As a result, 300 ㎍/ml of β-glucan-FBR extracts showed a high inhibition of 38.88% in lipid accumulation. Further, these extracts inhibited adipogenesis in the 3T3-L1 adipocytes by decreasing the expression of C/EBPα, PPARγ, aP2, and GLUT4 genes.
BACKGROUND/OBJECTIVES: The present study investigated the hypothesis that a highly pure linear ${\beta}$-1,3-glucan produced by Agrobacterium sp. R259 enhances human natural killer (NK) cell activity and suppresses pro-inflammatory cytokines. SUBJECTS/METHODS: In an eight-week, double-blind, randomized, placebo-controlled clinical trial, 83 healthy adults with white blood cell counts of $4,000-8,000cells/{\mu}L$ were participated and randomly assigned to take two capsules per day containing either 350 mg ${\beta}$-1,3-glucan or placebo. Six participants withdrew their study consent or were excluded due to NK cell activity levels outside the normal range. NK cell activity and serum levels of immunoglobulin G (IgG) and cytokines, such as interferon (IFN)-${\gamma}$, interleukin (IL)-2, IL-4, IL-6, IL-10, IL-12 and tumor necrosis factor (TNF)-${\alpha}$ were measured. RESULTS: NK cell activity and the serum levels of IL-10 were significantly higher from baseline to week 8 in the ${\beta}$-glucan group compared with the placebo group (P = 0.048, P = 0.029). Consumption of ${\beta}$-1,3-glucan also significantly increased NK cell activity compared with placebo after adjusting for smoking and stress status (P = 0.009). In particular, the effect of ${\beta}$-1,3-glucan on NK cell activity was greater in participants with severe stress than in those experiencing mild stress. However, the administration ${\beta}$-1,3-glucan did not significantly modulate the levels of IFN-${\gamma}$, IL-2, IL-4, IL-6, IL-12, TNF-${\alpha}$ and IgG compared with the placebo. CONCLUSION: The results showed that supplementation with bacterial ${\beta}$-1,3-glucan significantly increased NK cell activity without causing any adverse effects. Additionally, the beneficial effect of ${\beta}$-1,3-glucan on NK cell activity was greater in participants experiencing severe stress.
한국미생물생명공학회 2001년도 Proceedings of 2001 International Symposium
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pp.73-76
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2001
$\alpha$-Glucosidase contributing $\alpha$-glucan metabolism in microorganisms is characterized by the variety in substrate recognition. Recent studies on microbial enzymes show that $\alpha$-glucosidases are divided into two groups, family I and family n, in which family I enzymes have four conserved catalytic-regions of $\alpha$-amylase family. The presentation focusing on the difference of the $\alpha$-glucosidase families reviews i) the catalytic amino-acid residues of nucleophile and acid/base catalyst, and ii) the molecular evolution of two families.
치마버섯에서 추출한 베타글루칸을 Raw 264.7 세포에 처치한 후 MTT assay로 측정한 결과 베타글루칸 400 ${\mu}g$/mL까지에 의한 세포독성은 없었다. 대식세포의 활성능을 측정하기 위해서 Raw 264.7 세포에서 NO와 TNF-${\alpha}$의 생성을 측정하였다. 베타글루칸을 대식세포에 24시간 처리한 결과 대조군과 비교 시 NO와 TNF-${\alpha}$가 유의적으로 상승하였다. 이 결과 베타글루칸이 대식세포인 Raw 264.7 세포를 활성화 시키는 것으로 사료된다. 따라서 본 실험에 사용된 베타글루칸은 면역강화용 사료첨가제로서의 의미가 충분하다고 사료된다. MDA-MB-231 유방암 세포의 성장을 저해하는지 확인하기 위하여 MTT assay를 시행하였다. 400 ${\mu}g$/mL 베타글루칸을 48시간 처리한 결과 대조군과 비교 시 유방암 세포의 성장이 유의적으로 억제하였다. 그리고 베타글루칸이 유방암 세포에서 성장 억제 효과를 알아보기 위해 누드마우스에 MDA-MB-231 유방암 세포를 접종하였다. 베타글루칸의 용량은 대조군(0 ${\mu}g$/mouse), 저용량(200 ${\mu}g$/mouse), 고용량(400 ${\mu}g$/mouse)으로 설정하여 누드마우스에 경구투여 하였다. 이 결과 저용량군(200 ${\mu}g$/mouse)이 고용량군(400 ${\mu}g$/mouse)보다 항암효능이 더 많이 일어나는 것을 확인하였다. MDA-MB-231 유방암 세포주에서 베타글루칸이 종양 성장이 감소하였지만, 그 결과가 유의적인 차이를 보이지 않아 본 연구에서 사용한 용량에서는 베타글루칸이 MDA-MB-231 유방암 세포주에서 종양 성장을 유의적으로 억제하지 않는 것으로 사료된다. 조직병리학적 검사에서 독성이 무해한 것으로 판단되어 면역강화용 사료첨가제로 사용하여도 무방할 것으로 사료된다.
Protein conjugation of curdlan belonging to $\beta$-1, 3-glucan was carried out to improve it surface functionalities. The glucan was mixed with phosvitin, {TEX}$$\alpha$_{s}${/TEX}-casein, lysozyme or ovalbumin, respectively. The mixture was freeze-dried, and he resulting powder was incubated at 6$0^{\circ}C$ and 79% relative humidity for 12 days in order to generate a controlled Maillard reaction between curdlan and proteins. conjugation with unfolding proteins, i.e., phosvitin and {TEX}$$\alpha$_{s}${/TEX}-casein, drastically increased the solubility of the glucan, whereas lysozyme and ovalbmin did not. The solubility in water of curdlan was 3.44% for the phosvitin conjugate and 1.09% for the {TEX}$$\alpha$_{s}${/TEX}-casein conjugate. SDS-slab polyacrylamide gel electrophoresis showed that curdlan was solubilized due to covalent binding with phosvitin. Emulsifying properties of curdlan were substantially improved by the conjugation with phosvitin and {TEX}$$\alpha$_{s}${/TEX}-casein. Emulsion stability of the curdlan-phosvitin conjugate was about 2.9 times greater than that of the curdlan-phosvitin mixture.
신품종으로 개발한 양송이 '다향'의 우수성을 조사하기 위하여 총 폴리페놀성 물질, 유리당 및 ${\beta}$-glucan의 함량과 항산화활성 및 ${\alpha}$-glucoamylase 저해활성을 기존 유통되고 잇는 705호 양송이와 비교 분석하였다. 총 폴리페놀 함량은 189${\pm}$12 mg%로 기존 705호 양송이 168${\pm}$8 mg%에 비하여 더 높았고, 유리당은 mannitol, xylose 및 trehalose의 3종이 각각 3.11, 0.12 및 0.08%로 mannitol이 가장 많이 함유되어 있었으며, ${\beta}$-glucan의 함량은 건조물에 대하여 28.34%이었고 705호 양송이는 26.55%의 함량을 보여 대조군에 비하여 높은 함량을 보여주고 있었다. DPPH용액에 의한 전자공여능은 다향은 물 추출물과 80% 에탄올 추출 각각 52.14% 및 57.81%, 705호는 각각 45.27% 및 46.93%를 보였으며, ${\alpha}$-glucoamylase 저해활성은 물 추출물에서는 다향이 705호 양송이보다 저해활성이 더 높은 경향이었으며 80% 에탄올 추출물에서는 거의 비슷한 저해활성을 보였다.
Background: Lichen-derived glucans have been known to stimulate the functions of immune cells. However, immunostimulatory activity of glucan obtained from edible lichen, Umbilicaria esculenta, has not been reported. Thus we evaluated the phenotype and functional maturation of dendritic cells (DCs) following treatment of extracted glucan (PUE). Methods: The phenotypic and functional maturation of PUE-treated DCs was assessed by flow cytometric analysis and cytokine production, respectively. PUE-treated DCs was also used for mixed leukocyte reaction to evaluate T cell-priming capacity. Finally we detected the activation of MAPK and NF-${\kappa}B$ by immunoblot. Results: Phenotypic maturation of DCs was shown by the elevated expressions of CD40, CD80, CD86, and MHC class I/II molecules. Functional activation of DCs was proved by increased cytokine production of IL-12, IL-$1{\beta}$, TNF-${\alpha}$, and IFN-${\alpha}/{\beta}$, decreased endocytosis, and enhanced proliferation of allogenic T cells. Polymyxin B, specific inhibitor of lipopolysaccharide (LPS), did not affect PUE activity, which suggested that PUE was free of LPS contamination. As a mechanism of action, PUE increased phosphorylation of ERK, JNK, and p38 MAPKs, and enhanced nuclear translocation of NF-${\kappa}B$ p50/p65 in DCs. Conclusion: These results indicate that PUE induced DC maturation via MAPK and NF-${\kappa}B$ signaling pathways.
A glucan and a fructan producing enzymes from Leuconostoc mesenteroides NRRL B-1149 were prepared and concentrated from the cu1ture of 1.5% sucrose using polysulfone ultrafiltration hollow fiber in the presence of 0.1% (w/v) Tween 80, 1 mM $CaCl_2$, and 0.02% $NaN_3$. The molecular masses of the enzymes were estimated to be about 213.6 kDa and 180 kDa, respectively, based on the PAS staining for the glucosyltransferase and Mukasa method for fructosyltransferase. Polymers produced by the enzymes showed different solubility; an insoluble glucan and a soluble fructan. The linkages of polymers were determined by methylation using Hakomori reagent and following acid hydrolysis. The glucan was composed of ${\alpha}$-1,6 and 1,3 linkages and the fructan showed similar linkage data of levan.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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