The growth of recombinant E. coil and by-product production were investigated. D-cycloserine was added to increase the secretion of ${\alpha}$-amylase from recombinant E.coil. Even though cell growth was increased for optimal d-cycloserine concentration $0.1g/\ell$, extracellular ${\alpha}$-amylase activity remained almost the same as the case without d-cycloserine. It is important to achieve the high cell density for commercial production of methaboliles including ${\alpha}$-amylase. To achieve this goal, culture conditions should be selected carefully and optimized considering cell growth and by-products production. In cultivating retombinant E. coli, lactic acid and acetic acid turned out to be important by-product which affected cell yield and growth rate.
Journal of the Korean Society of Food Science and Nutrition
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v.44
no.5
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pp.681-686
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2015
The purpose of this study was to measure total phenolic compounds as a measure of antioxidant activity as well as ${\alpha}$-amylase inhibitory and ${\alpha}$-glucosidase inhibitory activities as a measure of anti-diabetic efficacy in methanol extracts from 23 kinds of medicinal plants. Extracts of three medicinal plant species showing high total polyphenol contents were selected (Euonymus alatus stem, Taxus cuspidata fruit, and Eucommia ulmoides leaf). Extracts of six medicinal plant species showing over 60% DPPH radical scavenging activity were also selected [Eucommia ulmoides barks (80.10%), Lycium chinense roots (64.25%), Euonymus alatus stem (73.59%), Lespedeza cuneata (78.20%), Taxus cuspidata fruits (70.52%), and Tilia taquetii leaf and stem (67.81%)]. Regarding ${\alpha}$-glucosidase and ${\alpha}$-amylase inhibitory activities acarbose showing approximately 80% inhibitory activity was selected as a control group, and six species (Eucommia ulmoides heartwood, Eucommia ulmoides bark, Euonymus alatus stem, Dioscorea batatas, Coix lachryma-jobi, and Phaseolus radiatus) showed greater than 80% ${\alpha}$-glucosidase inhibitory activity. Extracts of nine medicinal plant. species showing over 80% ${\alpha}$-amylase inhibitory activity (Pueraria thunbergiana root, Eucommia ulmoides bark, Eucommia ulmoides leaf, Lycium chinense fruits, Euonymus alatus leaf and stem, Euonymus alatus stem, Sasa borealis whole, Dioscorea batatas leaf and stem, and Tilia taquetii leaf and stem). Based on these results, medicinal plants showing high antioxidant and antidiabetic activities can be used as fundamental products in developing new medicines, as well as functional foods to prevent adult disease.
An extracellular ${\alpha}$-amylase from Lactococcus lactis IBB500 was purified and characterized. The optimum conditions for the enzyme activity were a pH of 4.5, temperature of $35^{\circ}C$, and enzyme molecular mass of 121 kDa. The genome analysis and a plasmid curing experiment indicated that $amy^+$ genes were located in a plasmid of 30 kb. An analysis of the phylogenetic relationships strongly supported a hypothesis of horizontal gene transfer. A strong homology was found for the peptides with the sequence of ${\alpha}$-amylases from Ralstonia pikettii and Ralstonia solanacearum. The protein with ${\alpha}$-amylase activity purified in this study is the first one described for the Lactococcus lactis species, and this paper is the first report on a Lactococcus lactis strain belonging to the amylolytic lactic acid bacteria (ALAB).
pH stability of sweet potato $\beta$-amylase modified with IO4-oxidized soluble starch was increased at pH 3, 5~9 and 11. And optimum pH was 3 and 5 for modification. Thermal stability of the enzyme modified with IO4-oxidized soluble starch was increased at 6$0^{\circ}C$ for 15 min. pH stability of barley $\beta$-amylase modified with IO4-oxidized soluble starch was increased at 3~4 and 8~11, and more increased at pH 3 and 8~11 in the presence of $\alpha$-cyclodextrin.
A Korean commercial sweet rice drink "Sikhye" showed sucrose, fructose, glucose, maltose, limit dextrin and various size of maltooligosaccharides in HPLC and TLC analysis. Commercial Sikhye was found to contain 0.09% of limit dextrin and 0.2% of rice residue. Limit dextrin in commercial Sikhye showed both signal of $\alpha$-1,4- and $\alpha$-1,6-glucosidic linkage with its estimation ratio of 15:1 by 1H-NMR analysis. This limit dextrin was hydrolyzed to produce various size of maltooligosaccarides with more longer chain than that of traditional Sikhye by pullulanase. Limit dextrin was digested wit enzymes(30units/ml) of $\alpha$-amylase, $\alpha$-glucosidase and glucoamylase from Aspergillus awamori, sweet potato $\beta$-amylase and human salivary $\alpha$-amylase at 37$^{\circ}C$ for 1 hour, respectively. Hydrolysis rates of these amylases on it were higher than in case of traditional sikhye. $\alpha$-Glucosidase plus human salivary $\alpha$-amylase hydrolyzed it to 61.3%. Hydrolysis rates of these amylases on rice residue were lower than that of traditional Sikye. These results suggest that limit dextrin in commercial Sikhye is less effective than isomaltooligosaccharides in traditional Sikhye as a growth factor for Bifidobacterium while rice residue in commercial Sikhye is more effective than that in traditional Sikhye as dietary fiber.ary fiber.
These experiments were conducted to investigate the enzymatic characteristics of the purified $\alpha$-amylase (F-2A) of Bacillus circulans F-2 and the digestion rate of various starches. 1. The molecular weight was estimated to be 93000 by SDS-polyacrylamide disc gel electrophoresis. The isoelectric point was about pH 5.0. The optimum pH for the enzyme action was 6.0-6.5 and the stable pH ranged pH 5.5-12.0. The optimum temperature was 6$0^{\circ}C$, and the purified $\alpha$-amylase was stable below 4$0^{\circ}C$. 2. The purified $\alpha$-amylase was activated by Mn$^{++}$ and Co$^{++}$, whereas it was inhibited by Ag$^{+}$, HT$^{++}$, Cu$^{++}$ and Pb$^{++}$. 3. The purified $\alpha$-amylase is considered to have no sulfhydryl residue essential for its catalytic activity. 4. Michaelis constant (Km) was 1.704 mg/$m\ell$. Activation energy between 25-4$0^{\circ}C$ was 12.297 Kcal/mole, and between 40-6$0^{\circ}C$, it was 7.831 Kcal/mole. 5. The hydrolysis product from soluble starch, amylose and amylopectin in the early stage of hydrolysis was G$_{6}$, and as hydrolysis proceeds, G$_4$and G$_2$appeared. 6. Products from each oligosaccarides are as follows: G$_4$longrightarrow G$_2$+ G$_2$,G$_3$ +G$_1$,G$_{5}$longrightarrow G$_4$+G$_1$,G$_{6}$longrightarrowG$_4$+ G$_2$,G$_{7}$ G$_4$,G$_{8}$longrightarrow G$_4$+G$_4$, 7. On raw potato starch, raw sago starch and raw yam starch, the purified enzyme exhibited a remarkably high digestion rate than Porcine pancreatic amylase and Streptococcus bovis amylase.
${\alpha}-amylase$ activities of bean water was not significantly influenced by bean water concentrations but they were remarkably influenced by different temperatures and substrates. ${\alpha}-amylase$ activities of bean water on cooked starch were significantly higher than those on raw starch. ${\beta}-amylase$ and glucoamylase activities in 14% bean water were significantly higher than those in 7% bean water. Yukwa paste is glutinous rice flour paste. Bean water was added to Yukwa paste by 0, 7, 14% and incubated 0, 3, 6, 9, 12 hours at $60^{\circ}C$. The pH of Yukwa paste increased with bean water concentration and decreased with the incubation time. The viscosity decreased with bean water concentration and incubation time. The ruducing sugar content of Yukwa paste increased with bean water concentration and incubation time. The changes of reducing sugar content in cooked Yukwa paste were much higher than those in the raw one. ${\alpha},\;{\beta}-amylase$glucoamylase activities of Yukwa paste also increased with bean water concentration, and their activities were much higher on the cooked glutinous rice flour than those on the raw one. The SEM observation on the freeze-dried flour of Yukwa paste showed breakdown of amylopectin structure by addition of bean water in the paste.
The objective of this study was determined to evaluate ${\alpha}$-amylase, ${\alpha}$-glucosidase, pancreatic lipase inhibition in vitro and DPPH radical scavenging activity of the several Korean resources plants. The ${\alpha}$-amylase inhibitory activity of Salicornia herbacea, Erythronium japonicum (flower) and Phragmites communis (root) in water extract showed relatively high 62.8%, 66.5% and 69.3%, respectively. The ${\alpha}$-amylase inhibitory activity of Citrus junos (pericarp) and Cornus officinalis in methanol extract was found to have an effect with 32.8% in Citrus junos (pericarp) and 60.9% in Cornus officinalis. Corylopsis coreana in both water and methanol extract had the highest ${\alpha}$-glucosidase inhibitory activity of 81.7% and 89.5%, while the extract of Portulaca oleracea, Ficus carica and Citrus junos was not measured ${\alpha}$-glucosidase inhibitory activity at given experiment concentration. Depending on the extraction solvent and the plant species, it was observed that there was a significant difference in ${\alpha}$-glucosidase inhibitory activity. The pancreatic lipase inhibitory activity showed relatively higher in the methanol extract than water extract except pericarp of Citrus junos. The DPPH radical scavenging activity of selected plants was much difference between measured plant species, and showed that the increase was proportional to the concentration. These results suggested that selected plants had the potent biological activity on carbohydrate, lipid Inhibitory activity and antioxidant activity, therefore these plant resources could be a good materials to develop medicinal preparations, nutraceuticals or health functional foods for diabetes or obesity.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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