• 한국발생생물학회지:발생과생식
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• 제4권2호
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• pp.237-242
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• 2000

흰쥐 시상하부에서 합성ㆍ분비되어 뇌하수체 전엽에서의 growth hormone (GH) 분비를 촉진하는 growth hormone releasing hormone (GHRH)이 시상하부 이외 조직들 (extrahypothalamic tissues)인 태반, 생식소, 그리고 뇌하수체 전엽에서도 발현됨이 보고되었다. 본 연구는 흰쥐 뇌하수체 전엽에서 발현되는 GHRH의 기능을 조사하기 위해 i)세포 배양을 시행하면서 GHRH의 세포내 함량, 분비 그리고 세포분획법 (cell-fractionation)을 사용하여 분리한 뇌하수체 세포 유형별로 GHRH 함량을 방사면역측정법으로 조사하였고, ii)체외배양 중인 뇌하수체 전엽세포의 증식에 미치는 GHRH의 효과를 측정하기 위해 [$^3$H] thymidine incorporation assay를, 그리고 iii) GHRH의 세포분열 촉진 효과와 세포내 c-fos 유전자 발현과의 상관관계를 조사하기 위해 northern blot analysis를 시행하였다. GHRH 방사면역측정법을 시행한 결과 상당량의 GHRH-like 분자들이 흰쥐 뇌하수체 전엽내에 존재하고, 체외 세포배양시 분비됨을 관찰하였다. 세포분획을 사용한 실험에서 GHRH 함량은 gonadotrope, somatotrope, lactotrope 그리고 thyrotrope 순으로 나타났다. 이 러한 결과는 흰쥐 뇌하수체 전엽에서 생성된 GHRH가 국부적인 조절인자, 특히 상이한 유형의 세포들 간의 상호조절 (cross-talk)을 통해 뇌하수체 전엽에서의 세포분열과 분화, 그리고 기능조절에 관여할 가능성을 보여주었다. GHRH는 체외 배양중인 뇌하수체 전엽세포의 [$^3$H] thymidine incorporation을 농도의존적으로 증가시켰으며, 이러한 GHRH의 세포분열 촉진 효과는 예상대로 세포내 oncogene 활성 의 증가를 통해 일어나는 것임을 c-fos northrn blot으로 확인하였다. 결론적으로, 본 연구는 흰쥐 뇌하수체 전엽에서 합성되는 GHRH가 paracrine 또는 autocrine 기작으로 GH의 분비 촉진 이외에도 세포분열의 조절함을 시사하는 것이다.

• The Korean Journal of Physiology
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• 제8권1호
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• pp.27-30
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• 1974

인삼이 마우스의 간조직 방사능지수에 미치는 영향을 알아보기 위하여 몸무게 $18{\sim}20\;g$ 되는 마우스 수컷 30마리를 사용하여 다음과 같은 실험을 실시하였다. 인삼주정추출액은 고려인삼 300g을 95% 에칠 알코올로 중탕남비 위에서 약 300시간 동안 추출하여 얻은 54.2 g의 흑갈색 추출물을 생리적 식염수 1 ml 속에 이 추출물 4 mg 이 포함되도록 용해시켜 만들었다. 인삼군에는 5일 동안 매일 같은 시각에 인삼주정추출액을 몸무게 10 g에 대하여 0.05 ml씩 등의 피하에 주사하였으며 식염수군에는 몸무게 10 g에 대하여 0.05 ml 씩 피하에 주사하였다. 인삼주정추출액 혹은 식염수 투여가 시작된지 제 5일째 되는 날에 해당 약물을 주사한 다음 2시간 후에 $[^3H]$ thymidine을 단 1회에 복강 속에 주사하고 이어서 이들 동물을 1, 10 및 24시간 후에 한번에 5마리씩 도살하여 간조직을 적출하고 자기장사법을 이용하여 방사능지수를 계수한 바 다음과 같은 결과를 얻었다. 1. $[^3H]$ thymidine 주사 후 1, 10 및 24시간만에 관찰된 식염수군의 간조직 방사능지수는 각각 $3.23{\pm}0.23,\;5.20{\pm}0.21$ 및 $6.00{\pm}0.30$이었다. 2. 인삼군의 간조직 방사능지수는 1, 10 및 24시간 값이 각각 $4.02{\pm}0.33,\;6.32{\pm}0.32$ 및 $7.42{\pm}0.35$으로 나타났다. 그러므로 인삼군의 간조직 방사능지수는 식염수군의 해당 값보다 현저하게 증가되었다. 이상의 결과로 미루어 보아 인삼은 마우스의 간조직 DNA 합성능을 촉진시킨다고 믿어진다.세에 다발하는 경향을 보이고, 오히려 연령이 높아질수록 질병이환율이 감소하는 경향을 보이는 반면, 안이비인후과질환만이 점진적 증가를 보여 대조를 이루었다. 4) 가족력과 질환과의 상관관계를 살펴보면, 중풍환자의 25.0%가 중풍의 가족력을, 고혈압환자의 11.6%가 고혈압의 가족력을 가지고 있는 것으로 나타나 가족력과의 상관관계가 매우 높게 나타남을 알 수 있었고, 그밖에 결핵은 5.6%, 당뇨병은 2.6%가 가족력을 가지고 있는 것으로 나타났다. 5) 음주와 질환과의 상관관계를 살펴보면, 호흡기질환의 36.4%, 고혈압의 34.7%, 심장병의 33.3%, 소화기질환의 28.4%가 음주를 하는 것으로 나타났으나 음주의 정도는 조사되지 않아 음주와 질환과의 필연적 관계는 알 수 없었다. 6) 흡연과 질환과의 상관관계를 살펴보면, 호흡기질환의 44.1%, 심장병의 38.0%, 고혈압의 29.8%가 흡연을 하는 것으로 나타났으나 흡연의 정도는 조사되지 않아 흡연과 질환의 필연적 관계는 알 수 없었다. 7) 사상체질의 분포는 태음인(太陰人) 44.6%, 소양인(少陽人) 30.7%, 소음인(少陰人) 24.7%, 태양인(太陽人) 0.0%의 순으로 나타났고, 체질별 질환빈도는 모든 체질에서 운동기계 질환과 소화기계 질환의 이환율을 높았는데, 태음인에서는 순환기계질환(50.0%), 호흡기계질환 (23.1%)이 타체질에 비해 높게 나타났고, 소양인에서는 운동기계질환(77.7%), 난청등 안이비인후과 질환(12.2%)이 타체질에 비하여 높게 나타났고, 소음인에 있어서는 소화기계 질환(65.8%)이 타체질에 비해 높게 나타났다. 8) 양방의 1차검진상 이상소견자의 빈도와 한양방종합판정에 의한 질환의 빈도 사이에는 상당한 차이가 있는 것으로 나타났는데, 이는 노인질환의 특성상 건강검진에 한방의 참여가 필요한 이유가 되는

• Journal of Ginseng Research
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• 제19권2호
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• pp.114-116
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• 1995

Panax ginseng ginsenosides were examined for their affects on the DNA synthesis. The DNA 1 synthesis was measured by the thymidine incorporation into NIH3T3 cells. The ginsenoside, panaxytriol, $Rh_1$ and $Rh_2$ showed reduced [$^{3}H$]-thymidine incorporation. However, other ginsenosides of $Rh_1$, $Rh_2$ and $Rh_3$ did not inhibit DNA synthesis. Among the various ginsenosides, ginsenoside $Rh_2$ was found to be the most inhibitory on DNA synthesis. We suggest $Rh_2$ as one of the potential choice of antiproliferative drugs.

• 대한약침학회지
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• 제3권1호
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• pp.1-19
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• 2000

To study anti-cancer effect and molecular biological mechanism of bee venom for aqua-acupuncture, the effects of bee venom on cell viability and apoptosis were analyzed using MTT assay, tryphan blue assay, $[^3H]$thymidine release assay, flow cytometric analysis, and activity of caspase-3 protease activity assay. To explore whether anti-cancer effects of bee venom are associated with the transcriptional control of gene expression, quantitative RT-PCR analysis of apoptosis-related genes was performed. The obtained results are summarized as follows: 1. The MTT assay demonstrated that cell viability was decreased by bee venom in a dose-dependant manner. 2. Significant induction of apoptosis was identified using tryphan blue assay, $[^3H]$thymidine release assay, and flow cytomet1 ric analysis of sub $G_1$ fraction. 3. In analysis of caspase-3 protease activity, the activity had increased significantly, in a dose-dependant manner. 4. Quantitative RT-PCR analysis of the apoptosis-related genes showed that Bcl-2 and Bcl-$X_L$ were down-regulated whereas Bax was up-regulated by bee venom treatment.

• 폴리머
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• 제28권6호
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• pp.538-544
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• 2004

Z-라이신 올리고머를 사슬연장제로 하고 D-다이페닐이소시아네이트와 폴리테트라메틸글리콜을 반응시켜 주사슬에 L-라이신 분절을 함유하는 폴리우레틴 (PULL)을 합성하였다. PULL 표면의 아민기와 인슐린의 공유 결합으로 인슐린 고정화 폴리우레탄 (PULL-In)을 제조하였다. Bradfold법으로 측정한 고정화 인슐린의 양은 약 0.30 nmol/$\textrm{cm}^2$이였다. $^3$H-thymidine 분석방법과 광학 현미경법으로 NIH/3T3 섬유아세포와 표면 개질된 PULL의 상호작용을 조사하였다. 그 결과 PULL-In 필름 표면에서의 세포 성장 속도는 다른 기질에서보다 높았다. 또한 고정화된 인슐린에서의 세포증식이 배양액에 용해된 인슐린에서와 거의 유사한 특성을 나타내었다.

• 대한바이러스학회지
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• 제28권3호
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• pp.215-224
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• 1998

Cloning, sequencing and expressing in E. coli of the thymidine kinase (TK) gene of Herpes simplex virus type-1 (HSV-1) strain F was investigated. The TK gene, located in the BamHI 3.74 kb DNA fragment of the plasmid pHLA-12, was amplified by polymerase chain reaction (PCR). The 1,131 kb PCR product was cloned into the BamHI and EcoRI sites of pBacPAK9 plasmid and then named pBac-TK recombinant. The TK gene was subcloned into the BamHI and BglII sites of pQE-30, and named pQE-TK recombinant. The nucleotide sequence of the 1,131 kb TK gene was determined, and the GC content was 65.13%. There were deduced 367 amino acid residues with a total molecular weight of 43 kDa. The weight was confirmed by the protein produced by E. coli M15/pQE-TK on the SDS-PAGE and Western blot. The production of the TK protein in the IPTG induced cells was measured over 4 h. At the end of 1, 2 and 3 h the level increased by 146, 204 and 242%, respectively. The amount of the protein at the highest fraction purified with Ni-NTA resin chromatography was $0.68\;{\mu}g$ per ml. The soluble state TK protein was present in the cytoplasm. In these results the F strain was different in base sequence and amino acid sequence from that of the CL101 strain, which caused difference in their strains.

• 대한바이러스학회지
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• 제26권1호
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• pp.121-129
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• 1996

Herpes simplex virus type-1의 vero 세포에서의 증식기작을 규명하기 위해 전자현미경으로 관찰하였고, 유전학적 특성을 규명하기 위해 유전자도서관을 작성하였고, thymidine kinase (TK) 유전자를 클로닝을 하였다. 감염 48시간 후 많은 수의 바이러스 nucleocapsid가 핵뿐만 아니라 세포질에서 관찰되었다. 바이러스는 세포에 감염된 후 핵내에서 복제증식한 후 세포질내로 이동하였으며, 이때 핵막을 통과하면서 외투막을 갖고 세포질로 이동하여 세포밖으로 나가는 것을 관찰할 수 있었으며, 또한 일부 nucleocapsid는 세포막을 출아하여 비리온으로 출아되었다. HSV-1의 DNA를 BamHI과 BglII 제한효소로 각각 절단하여 DNA의 절단 양상을 조사하였다. BamHI에 의해 절단된 단편은 27개 이었고, 그들 분자량의 범위는 1.1 - 14 kb이었으며, BglII에 의해 절단된 단편은 16개이었고, 분자량의 범위는 4.5 - 20.1 kb이었다. Southern blot 방법으로 TK 유전자를 포함하고 있는 단편을 확인하였는데, pHLA-12와 pHLB-14클론에 포함되어 있었고 각 단편의 분자량은 3.74와 6.41 kb이었다.

• 한국식품과학회지
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• 제5권3호
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• pp.157-162
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• 1973

무균(無菌) 상태하에서 습윤한 여지위에 숙성(熟成)시킨 감자 괴경 박편(塊莖 薄片) $(1mm{\times}1.5cm)$을 재료로 방사선(放射線)의 작용기작(作用幾作)연구를 행하였다. Invertase, 핵산 및 호흡작용의 time courses를 결정하고 이들 세작용의 방사선(放射線)에 대한 민감도를 측정하였다. 세 작용 중 어느 것도 세포분열을 억제하는 선량에서 심하게 억제되지 않았다. $^3H-thymidine$의 incorporation 결과는 방사선(放射線)의 작용부위가 mitosis나 $G_2$ period에 존재할지도 모른다는 것을 암시한다.

• 한국미생물·생명공학회지
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• 제20권3호
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• pp.243-248
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• 1992

동결건조법이 Nocardia mediterranei의 세포막 손상에 미치는 영향을 3H-thymidine 표지에 의한 DNA 유출 방법과 전자현미경으로 조사하였으며, 재수화 과정이 생존도에 미치는 영향을 연구하였다. 그 결과 N.mediterranei의 동결건조시 세포벽과 세포막의 손상이 세포 사멸의 원인으로 판명되었다.

• 한국독성학회:학술대회논문집
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• 한국독성학회 2002년도 Current Trends in Toxicological Sciences
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• pp.99-99
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• 2002

In the present study, the potent lipopolysaccharide (LPS)-mimetic stimulation of B cells and macrophages by hot water extract from Salicornia herbacea (S. europeae L.) is described. The extract activated spleen cells to proliferate in a dose-related manner as measured by [$^3$ H)-thymidine incorporation response.(omitted)