Branched-chain 아미노산이인 leucine이 골격근육의 단백질 합성을 촉진하는 요소로 보고되어 왔다. 이러한 역할은 다른 아미노산도 나타낼 수 없는 특이한 것이나 생체로부터 분리된 근육(isolated muscle system)에서 라는 제한된 실험조건하에 얻어진 결과에 바탕하므로, 본 연구는 생체내에서 leucine이 단백질의 생합성에 미치는 영향을 조사하고자 시도되었다. 실험동물은 정상으로 먹이를 먹인 또는 하루 굶게된 주로 leucine군과 비교군으로 나누었다. Leucine군은 80 또는 $160\mu\textrm{moles}$의 leucine을 복강으로 한번 주사하여 주입받았고 비교군에는 생리적 식염수를 같은 방법으로 주입했다. 단백질 합성속도는 $^{14}\textrm{C}-tyrosine을 주사한 후 근육의 단백질에 혼입된 $^{14}\textrm{C}의 량으로 측정하였다. 본 연구에 이용된 근육은 두가지 형태의 뒷다리 근육 즉 oxidative형 soleus와 glycolytic형 extensor digitorium longus(EDL)와 plataris근육이었다. 만 하루 굶게된 뒤의 EDL과 plantaris 근육은 $160\mu\textrm{moles}$의 leucine에 의해 단백질 합성 속도가 24%, 29% 씩 각각 상승했다. 하루 굶게된 쥐의 soleus근육과 정상으로 먹인 쥐의 어느 근육도 첨가된 leucine에 대해 반응을 보이지 않았다. Leucine에 의해 단백질 합성 속도가 상승된 근육은 굶게되므로 합성속도가 정상군의 54%로 떨어졌고 soleus근육은 정상군의 78%에 상당한 단백질 합성 능력을 가지고 있었다. 따라서 생체로부터 분리된 근육에서 동물의 영양상태나 홀몬 분비의 정상여부에 관계없이 leucin이 단백질 생합성 속도를 상승시키는 현상은 생체내에서 재현되지 않았다. 본 연구결과는 식이 제한등으로 인한 스트레스에 민감하게 반응하여 근육내 생성 활동이 저하된 특수한 상태에서만 leucine은 골격근육의 질소 보유능력을 상승시키리라는 것을 시사한다.
본 연구는 산소 장력이 사람의 치주인대에서 유래된 세포의 활성과 세포외 기질 및 cytokine에 미치는 영향을 알아 보고자 저산소 및 과산소 조건에서 배양한 후 세포의 활성, 총 단백질 합성, 교원질 합성, 그리고 $IL-1{\beta}$, IL-6, $TNF-{\alpha}$를 측정하였다. 교정치료를 위해 발거한 제 1 소구치에서 사람의 치주인대 세포를 채취하여 $37^{\circ}C,\;5\%\;CO_2,\100\%$ 습도의 환경에서 배양한 후 5 내지 6 계대배양하여 실험에 사용하였다. Gaspack system에 $0.2{\mu}m$ Millipore filter를 부착하여 세균 감염을 막았고, 저산소군에는 $10\%\;O_2,\;5\%\;CO_2,\;85\%\;N_2$ 가스를, 과산소군에는 $90\%\;O_2,\;5\%\;CO_2,\;5\%\;N_2$ 가스를 연결하여 산소 장력에 변화를 주었으며 대조군에는 $5\%\;CO_2,\;95\%$ 공기를 공급하였다. $37^{\circ}C$ 에서 2, 4, 6일간 배양한 후에 세포활성을 측정하기 위해 tetrazolium(MTT) assay를 시행하였고 sulforhodamine B(SRB) assay를 이용하여 총 단백질 합성을 알아보았으며, 4-hydroxyproline 측정으로 교원질 합성을 측정해 보았다. 또한 효소면역측정법으로 $IL-1{\beta}$, IL-6, $TNF-{\alpha}$를 측정하여 다음과 같은 결과를 얻었다. 1. 저산소근에저 세포 활성과 총 단백질 합성은 대조군보다 다소 높거나 같은 정도이었다. 2. 과산소군에서 세포 활성은 대조군보다 낮았으며 총 단백질 합성도 다소 감소되었다. 3. 교원질 합성은 저산소군과 과산소군에서 대조군보다 유의하게 감소되었다가 배양기간이 길어짐에 따라 증가되어 대조군과 유사한 정도에 달했다. 4. 효소면역법 측정 결과 IL-6, $TNF-{\alpha},\;IL-1{\beta}$ 순으로 다량 검출되었다. 5. IL-6, $TNF-{\alpha},\;IL-1{\beta}$는 저산소군과 과산소군에서 배양기간이 길어짐에 따라 대조군에 비해 급격히 증가하였다. 5. IL-6, $TNF-{\alpha}$는 과산소 조건에서 배양 6일 후에는 대조군에 비해 유의하게 증가하였으며 이는 배양 2일 또는 4일 후보다도 유의하게 증가한 것이었다.
인공광 스마트온실(식물공장) 조건에서 작물의 생장은 주로 외부 환경조건의 변화와 상관없이 형광등이나 특정 파장역의 발광다이오드와 같은 인공광원에 의해 좌우된다. 본 실험에서는 형광등 및 발광다이오드를 활용한 광질 및 광강도 제어가 케일 실생묘의 생장 및 물질합성에 미치는 영향을 조사하였다. 잎이 3~4매 전개한 케일 실생묘는 광강도를 50 및 $100{\mu}mol/m^2/s$로 제어한 형광등 (FLL 및 FLH구), 적색 LEDs (RL 및 RH 구), 청색+백색 LEDs (BWL 및 BWH구) 및 청색+적색 LEDs (BRL 및 BRH구) 등 단일 및 혼합광질로 제어하였으며 50일간 담액방식으로 수경재배하였다. 케일 지상부 생체중은 광강도 $100{\mu}mol/m^2/s$의 적색, 청색+ 백색 및 청색+적색의 혼합광 조사구에서 유의하게 증가하였으며, 신초신장은 광강도가 높은 처리구에서 억제되었고 잎내 폴리페놀 함량은 증가하였다. 당합성은 광강도 $50{\mu}mol/m^2/s$에 비해 $100{\mu}mol/m^2/s$ 조건의 적색광질에 의해 2배이상 증가하였다. 본 실험을 통하여 인공광 스마트온실 조건에서 특정 파장역의 광질 및 광강도를 제어하면서 작물을 수경재배하는 것은 노지나 온실에서 토경재배하는 관행적 재배방식에 비해 작업효율성을 높이면서 잎의 생장 및 물질합성을 촉진할 수 있다는 것을 알 수 있었다. 금후, 인공광 스마트온실에서 특정 파장역의 LEDs를 인공광원으로 할 때 작물생장을 최대로 유지할 수 있는 적정 광강도에 대한 연구를 수행할 계획이다.
The ubiquitous presence of lactoferrin(LF) receptor in human as reported by the research group of Prof. Bo Lonnerdal, Univ. California (Suzuki, Y. A.,2001) encouraged us to search for the unknown physiological roles of Lf. Under the collaboration with Prof. Etsumori Harada, Tottori Univ., and his research group, we have found two novel biological activities of LF as the control of the lipid metabolism and the effect on the central nervous system. Relating to the lipid metabolism, LF could, in animal experiments, reduce triglyceride and total cholesterol both in blood and liver (Takeuchi, T et αl., 2003). LF increased plasms HDL-C and lowered LDL-C. In the central nervous system, LF showed anti-nociceptive activity mediated by ${\mu}$-opioid receptor in the rat spinal cord (Hayashida, K. et al., 2003). LF enhanced analgesic action of morphine synergistically via nitric oxide synthesis (Hayashida, K., et al., 2003) LF showed opioid-mediated suppressive effect on distress induced by maternal separation in rat pups (Takeuchi, T., et al., 2003).
The ubiquitous presence of lactoferrin (LF) receptor in human as reported by the research group of Prof, Bo Lonnerdal, Univ. California, encouraged us to search for the unknown physiological roles of LF. Under the collaboration with Prof. Etsumori Harada, Tottori Univ., and his research group, we have found two novel biological activities of LF as the control of the lipid metabolism and the effect on the central nervous system. Relating to the lipid metabolism, LF could, in animal experiments, reduce triglyceride and total cholesterol both in blood and liver. LF increased plasma HDL-C and lowered LDL-C. In the central nervous system, LF showed anti-nociceptive activity mediated by ${\mu}$-opioid receptor in the rat spinal cord. LF enhanced analgesic action of morphine synergistically via nitric oxide synthesis. LF showed opioid-mediated suppressive effect on distress induced by maternal separation in rat pups.
To investigate the clastogenicity of taxol and its precursor, 10-aleacetyl baccatin III, we performed chromosomal aberration assay with chinese hamster lung cells in vitro. The IC$_{50}$ values of taxol and 10-deacetyl baccatin III were determined as $1/16 \times 10^{-4}$ M (5.34 $\mu$g/ml) and $1 \times 10^{-2}$ M (560 $\mu$g/ml) in MTT assay, respectively. It means that the cytotoxicity of taxol revealed 100 times more cytotoxic than 10-deacetyl baccatin III in chinese hamster lung cell line. Nevertheless the strong positive genetic toxicity of taxol in the bone marrow micronucleus assay in vivo which was recently reported, we observed weak positive clastogenicity of taxoi only in the absence of metabolic activation system in the concentration ranges used in this experiment. Moreover, to clarify the involvement of metabolic fate of taxol because of its strong positive result in vivo, 10-deacetyl baccatin III which is a precursor in taxol synthesis, also subjected in chromosomal aberration assay in vitro. However, we observed no clastogenicity of 10-deacetyl baccatin III in this experiment. From above results, it was suggested that the esterification at C-13 appears to be relative for its genetic toxicity in chromosome aberration using chinese hamster lung cell in vitro.
The present study was aimed to determine if endogenous L-arginine-nitric oxide (NO) pathway has central, rather than peripheral, mechanisms in blood pressure regulation. Arterial blood pressure and heart rate responses to acute inhibition of the t-arginine-NO pathway were examined in rats anesthetized with thiopental (50 mg/kg, IP). An intracerebroventricular (ICV) cannula was placed in the left lateral ventricle. The right femoral artery was cannulated to measure arterial blood pressure and the vein to serve as an infusion route. $N^G-nitro-L-arginine$ methyl ester (L-NAME) was infused either intracerebroventricularly or intravenously. ICV infusion $(1.25\;{\mu}L/min)$ of L-NAME $(20\;or\;100\;{\mu}g/kg)$ per minute for 60 min) increased the mean arterial pressure and heart rate. Plasma renin concentrations(PRC) were significantly lower in L-NAME-infused group than in the control. L-Arginine $(60\;{\mu}g/min,\;ICV)$ prevented the pressor response to ICV L-NAME. The pressor response was not affected by simultaneous intravenous infusion of saralasin, but was abolished by hexamethonium treatment. Intravenous infusion $(40\;{\mu}L/min,\;10{\sim}100\;{\mu}g/kg\;per\;minute\;for\;60\;min)$ also increased blood pressure, while it decreased heart rate. These results indicate that endogenous L-arginine-NO pathway has separate central and peripheral mechanisms in regulating the cardiovascular function. The central effect may not be mediated via activation of renin-angiotensin system, but via, at least in part, activation of the sympathetic outflow.
Mancozeb (MCZ) is known to have detrimental effects on the reproductive system, but the toxicity of MCZ on immune responses has not been systematically investigated. We investigated the effects of MCZ exposure on the activities of murine peritoneal macrophages through evaluation of MCZ-induced alteration of nitric oxide (NO) production and tumor necrosis $factor-{\alpha}(TNF-\alpha)$ synthesis. Macrophages were examined ex vivo from mice orally treated with various doses of MCZ for 5 consecutive days per week for 4 weeks (subacute exposure, 250, 1000, 1500 mg/kg/day) followed by culture for 2 $(TNF-{\alpha})$ or 3 days (NO) in the presence of LPS plus $IFN-{\gamma}$. Macrophages from naive mice were also cultured with various concentrations of MCZ (0.05, 0.25, 0.5, 1 and 2 ${\mu}g//mIL$ in the presence of LPS plus $IFN-{\gamma}$ for 2 $(TNF-{\alpha})$ or 3 days (NO) in vitro. NO production was decreased with the in vitro exposure to all concentrations of MCZ. However, the amount of NO production by peritoneal macrophages from MCZ-subacutely exposed mice was increased in comparision with that of control group. In vitro, MCZ suppressed $(TNF-\alpha)$ secretion with significant reduction at 2 ${\mu}g/mL$ MCZ. Conversely, $(TNF-{\alpha})$ release was enhanced ex vivo. This study provides the substantial evidence on MCZ-induced alternation in macrophage activity. In order to clearly understand the contrasting effect of MCZ on peritoneal macrophage activity, it is necessary to further investigate the influence of major metabolite of MCZ (ETU) exposure on the NO production and $(TNF-{\alpha})$ synthesis.
The radiopharmaceuticals are routinely injected to blood vessel for acquiring PET image. For this reason, It is imperative that they undergo strict quality control measures. Especially, Sterility test is more important than any other quality control procedures. According to the FDA guideline, It requires filter integrity test used in the processing of sterile solutions. Among several methods, we can decide to use bubble point test. We usually use vented GS-filters (Millipore co., USA) which are sterilizinggrade (0.22 um pore size) and are placed upper site on product vial. After the synthesis of $^{18}F$-FDG, solutions wet the membrane in filter and then go into the product vial. By all synthesis steps have finished, we can observe the presence of the bubbles in the product vial. Since we have started this study, we have never found any bubbles in the product vial. Because the maximum pressure intensity of the filter which has set by manufacturer is up to 5 bars, but helium gas pressure is up to 1 bar in our module system. So, we can make 5 bars pressure using helium gas bombe and increase pressure up to 5 bars step by step. However, it does not happen to anything in vial.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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