The mushroom Coriolusversicolor contains biologically active polysaccharides, most of which belong to the ${\beta}$ glucan group. Diverse physicochemical properties, due to different sources and isolated types of ${\beta}$-glucans, may induce distinct biological activities. Here, we examined the effects of ${\beta}$-glucan from Coriolusversicolor (CVG) on the scavenger receptor B1 (SR-B1) expression and the role of SR-B1 in CVG-induced phagocytosis regulation by using SR-B1-specific shRNA transfected cells. We also examined whether Dectin-1 and CK2 are involved in SR-B1 expression in CVG-treated cells. Our study results showed that CVG increased the SR-B1 expression via Dectin-1 and CK2 in macrophages. However, the inhibition of SR-B1 expression by shRNA did not completely eliminate the effect of CVG on the increase of phagocytosis suggesting that SR-B1 is not essential for CVG-stimulated phagocytosis. This study will contribute to identify CVG's mechanism of action and its use in the development of functional foods.
Biochemical polymorphisms of sow's milk proteins, $\beta$-casein ($\beta$-CN), $\beta$-lactoglobulin ($\beta$-LG), post-lactoglobulin (post-LG), $\alpha$-lactalbumin ($\alpha$-LA) and X-protein, as genetic markers for major pig breeds (Landrace, Yorkshire, Duroc, Hampshire and cross bred) in Korea were determined by starch gel electrophoresis. Phenotype and gene frequencies at all marker loci were estimated and genetic differences among breed populations were analyzed. Three $\beta$-CN phenotypes (AA, AB and BB) controlled by two codominant alleles (${\beta}-CN^A$ and ${\beta}-CN^B$), four $\beta$-LG phenotypes (AA, AC, $AC^{\pm}$ and CC) controlled by two codominant alleles (${\beta}-LG^A$ and ${\beta}-LG^C$) and ten X-protein phenotypes (AA, BB, CC, DD, AB, AC, AD, BC, BD and CD) controlled by four codominant alleles ($X^A,\;X^B,\;X^C\;and\;X^D$) were identified. In addition, a genetically controlled polymorphism of post-LG was found for the first time in sow's milk protein. Three different phenotypes (AA, AB and BB) were designated $post-LG^A$ and $post-LG^B$. Of the five marker loci examined, $\alpha$-LA locus was observed to lack any individual variation in all breeds studied. All populations were in Hardy-Weinberg equilibrium for all loci. There were marked breed differences for phenotype and gene frequencies in the post-LG and X-protein marker loci. However, there were little differences between breeds in the gene frequencies at the $\beta$-CN and $\beta$-LG marker loci.
단백식이조건을 달리하여 성장시킨 동물에 $CCl_4$를 투여하였을 때 혈청중 lipoprotein 분획비의 변동 및 이의 원인을 검토할 목적으로 흰쥐를 저단백식이(7% casein : LP) 및 고단백식이 (20% casein : HP)로 성장시킨 후, 50% $CCl_4$(v/v in olive oil)를 복강내 주사한 다음 간 중량 및 혈청 ALT 활성도 측정으로 간손상을 확인함과 동시에, 혈청지질과 혈청 lipoprotein 분획비를 측정하였다. $CCl_4$투여시 체중 당 간무게 및 혈청중 ALT의 활성도는 대조군에 비해 증가하였으며 그 증가율은 HP군이 LP군보다 더 높게 나타났다. 혈청중 총지질, 총 cholesterol 및 triglyceride의 함량은 대조군간에 별다른 차이를 관찰할 수 없었으나, $CCl_4$투여로 인해 이들 지질은 대조군에 비해 감소하였으며, 그 감소율은 HP군이 LP군보다 높게 나타났다. $CCl_4$투여로 인한 lipoprotein분획비의 변동은 대조군에 비하여 양군 공히 pre $\beta$-lipoprotein비율 및 $\alpha$-lipoprotein 비율은 감소되었고, 그 감소율은 HP군이 LP군에 비해 더 크게 나타났다. 한편 $\beta$-lipoprotein비율은 $CCl_4$투여로 인하여 두군 공히 증가하였으며 그 증가율은 HP군에서 높게 나타났다. 이상의 실험결과와 문헌상의 지견을 종합해 볼때 $CCl_4$투여시 LP군에 비하여 HP군에서 간손상이 보다 더 심하게 나타나며, 이로 인하여 apoprotein의 합성억제현상이 초래됨으로써 혈청중 lipoprotein분획비의 변동이 높게 나타날 것으로 생각된다.
Whey는 일명 lactoserum 이라고도 하며 치즈제조시 우유를 응고시키는 과정에서 Casein과 지방으로부터 분리되어 나오는 액상의 부산물로 본래 우유 부피의 약 90%를 차지하며, 용해성 단백질, 유당, 비타민과 무기질 등을 함유하고 있다. 유청에 함유되어 있는 단백질은 건조고형분의 약 13%가 되는데, 주요 단백질은 $\beta$-lactoglobulin(50%), $\alpha$-lactalbumin(22%), Serum albumin(5%), Immunoglobulin(12%), Proteose-peptone(10%) 등이 있다. 유청단백질중 가장 많이 함유되어 있는 $\beta$-lactoglobulin은 구형의 단백질로 단량체의 분자량은 약 18,400이며, pH 3.5~7 범위내에서는 해리되지 않는 이량체(dimer)를 형성한다. pH 3.5 이하에서 이량체는 해리되고 다량체의 형성으로 재평성한다. pH 7.0 이상의 알칼리 영역에서는 Conformational Change가 일어나는 것으로 알려져 있으며, 등전점(isoelectric point)은 pH 5.2이다. $\alpha$-lactalbumin은 14,200의 분자량을 가지는 구형의 단백질로 등전점은 pH 4.8이다.
조직특이적 프로모터 및 벡터를 연구하고 검증하기 위해서는 조직 및 종의 특이성을 유지하는 세포 시스템을 개발하는 것이 바람직하다. 이러한 시스템은 형질전환동물 모델에 대한 효과적인 대안이다. 우리는 베타 카제인 (CSN2)의 세포 형태와 mRNA 수준에 기초하여 일차 배양으로부터 돼지 유선 상피 세포 주 (PMECs)를 확립하였다. 선택된 PMECs는 cytokeratin 항체에 의해 염색되었으며, 유선 상피 세포에 존재한다고 생각되어지는 유즙 단백질 유전자 (CSN2, 락토페린 및 유청 단백질)를 발현하는 것으로 나타났다. 또한, 3D 배양에서 PMECs932-7의 acini 구조를 확인하기 위해 살아있는 세포를 핵산에 결합하는 SYTO-13으로 염색하였다. 우리는 마트리겔 (matrigel)에 있는 PMECs의 acini가 말초 세포의 응집에 의해 형성되고 공간의 lumen을 특징으로 한다는 것이 관찰하였다. 우리는 PMECs의 matrigel 사용법과 세포 밀도를 포함한 세포 배양 조건의 영향을 시험함으로서 시스템을 시연했다. 이러한 결과는 PMCEs의 유선 상피 세포는 유전적 또는 구조적 특징을 갖고 있음을 시사하고 있다.
Han Yong-Mahn;Koo Deog-Bon;Park Jung-Sun;Kim Young-Hun;Lee Kea-Joung;Lee Kyung-Kwang
Reproductive and Developmental Biology
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제29권4호
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pp.235-239
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2005
This study was conducted to test whether the transgenic cattle pass the transgene to their progeny through germ cells, and whether the transgene is expressed in the mammary gland of ransgenic cows. Two male ransgenic calves were born from IVF-derived embryos injected with bovine $\beta-casein/human$ lactoferrin fusion gene and then grew up to be reproducible. Semen was collected from a transgenic bull after 18 mon of age and then frozen. Bovine oocytes matured in vitro were fertilized with spermatozoa of the transgenic bull and cultured in $50\;{\mu}L$ drops of CRlaa medium supplemented with 3 mg/mL BSA. After 48 h of culture, cleaved embryos were determined for the presence of transgenes by DNA polymerase chain reaction (PCR). Proportion of transgene positives among bovine embryos fertilized with sperm of the transgenic bull was $20.9\%$ (28/134). One of transgenic bulls did not produce transgenic sperm. Out of 34 calves produced from recipient heifers inseminated with semen of the other bull, 3 $(8.8\%)$ were transgenic animals (2 females and 1 male). Thus, one transgenic bull showed a low transmission frequency below Mendelian levels in both the IVF-derived embryos and his progeny. It was demonstrated by Southern blot that copy numbers of the transgene in the transgenic progeny enhanced about 1.8 times as compared to those of the founder bull The results demonstrate that the transgenic bull carrying human lactoferrin gene could pass his transgene to the progeny through germ cells, although he is a germ-line mosaic.
Objective : This study was conducted to investigate the effect of Mokhyangsaenghwa-tang (MS) and Mokhyangsaenghwa-tang plus Cervi Pantotrichum Cornu (MS-C) on postpartum recovery and lactation. Materials and Methods : We used 18-week pregnant Spraque Dawley rats and administered the decoctions of MS and MS-C to rats once a day for 4 days or 8 days. Then we observed changes in the body weight of pup rats and complete blood cell count, liver function test, renal function test, mammary gland tissue, level of serum prolactin, ${\beta}-casein$ and WAP of postpartum rats. Result : A significant increase in body weight was observed in MS-C treated pup rats compared with in MS treated group. The levels of WBC and platelet from MS group and MS-C group were decreased compared with the control group. The levels of RBC, hemoglobin and hematocrit from MS group and MS-C group showed statistically significant increases compared with the control group. The levels of protein, albumin from MS group and MS-C group were increased compared with the control group. The levels of BUN, creatinine from MS group and MS-C group did not show statistically significant changes compared with the control group. The mammary gland tissues from MS group and MS-C group showed increased angiogenesis. The levels of serum prolactin from MS group and MS-C group were increased compared with the control group. The expression of ${\beta}-casein$ and WAP genes from postpartum rats treated with MS and MS-C was increased. Conclusion : This study shows that MS and MS-C improved postpartum recovery and lactation in rats.
Among milk proteins, caseins are not subjected to chemical changes during heat treatment of milk; however, whey proteins are partially denatured following heat treatment. The degree of whey protein denaturation by heat treatment is decreased in the order of high temperature short time (HTST) > low temperature long time (LTLT) > direct-ultra-high temperature (UHT) > indirect-UHT. As a result of heat treatment, several changes, including variations in milk nitrogen, interactions between beta-lactoglobulin and k-casein, variations in calcium sulfate and casein micelle size, and delay of milk coagulation by chymosin action, were observed. Lysine, an important essential amino acid found in milk, was partially inactivated during heat treatment. Therefore, the available amount of lysine decreased slightly (1~4% decrease) after heat treatment, However, the influence of heat treatment on the nutritional value of milk was negligible. Nutritional value and nitrogen balance did not differ significantly between UHT and LTLT in milk. In conclusion, our results showed that heat treatment of milk did not alter protein quality. Whey proteins denatured to a limited extent during the heat treatment process, and the nutritional value and protein quality were unaffected by heat treatment.
You, Eunae;Jeong, Jangho;Lee, Jieun;Keum, Seula;Hwang, Ye Eun;Choi, Jee-Hye;Rhee, Sangmyung
BMB Reports
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제55권4호
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pp.192-197
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2022
Cell signals for growth factors depend on the mechanical properties of the extracellular matrix (ECM) surrounding the cells. Microtubule acetylation is involved in the transforming growth factor (TGF)-β-induced myofibroblast differentiation in the soft ECM. However, the mechanism of activation of α-tubulin acetyltransferase 1 (α-TAT1), a major α-tubulin acetyltransferase, in the soft ECM is not well defined. Here, we found that casein kinase 2 (CK2) is required for the TGF-β-induced activation of α-TAT1 that promotes microtubule acetylation in the soft matrix. Genetic mutation and pharmacological inhibition of CK2 catalytic activity specifically reduced microtubule acetylation in the cells cultured on a soft matrix rather than those cultured on a stiff matrix. Immunoprecipitation analysis showed that CK2α, a catalytic subunit of CK2, directly bound to the C-terminal domain of α-TAT1, and this interaction was more prominent in the cells cultured on the soft matrix. Moreover, the substitution of alanine with serine, the 236th amino acid located at the C-terminus, which contains the CK2-binding site of α-TAT1, significantly abrogated the TGF-β-induced microtubule acetylation in the soft matrix, indicating that the successful binding of CK2 and the C-terminus of α-TAT1 led to the phosphorylation of serine at the 236th position of amino acids in α-TAT1 and regulation of its catalytic activity. Taken together, our findings provide novel insights into the molecular mechanisms underlying the TGF-β-induced activation of α-TAT1 in a soft matrix.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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