• 미생물학회지
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• 제27권3호
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• pp.181-187
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• 1989

Lactobacillus casei SW-M1으로부터 lactose 이용 pPLac Plasmid를 분리하였다. 이 plasmid에 lactose이용 유전자가 존재하는지를 확이하기 위하여 plasmid curing을 실시한 결과, acriflavin 8mg/ml 과 11 mg/ml EtBr를 처리한 후 , 3차 접종 배양의 경우에 curing 빈도가 가장 높았다. Lac와 plasmid가 cured 된 $Lac^{+}$strain의 당 이용능을 조사한 결고, glucose lactosidasedldydsmd은 불변이나, lactosedldydsmd만이 $Lac^{+}$strain에서 감소하였다 pPLac plasmid의 lactose 분해능은 $\beta$-galactosidase 에 의한 것이 아니고, phospho-$\beta$-galactosidase 에 의한 것으로 확인되었다. $Lac^{+}$strain의 carbohydrate가 막투과시 PTS과 관련이 있는가를 조사한 결과ㅏ lactose-PTS가 가장 활성이 높았으며, 그 다음이 galactose-PTS, glucose-PTS 로 나타났다. 그러므로 lactose는 lactose-PTS(lactose-phosphotransferase system)에 의하여 glucose와 galactose-6-phosphate로 분해됨을 알 수 있었다. Phospho-$\beta$-galactosidase의 induction 실험에서는 galactoserk 가장 높은 induction 효과를 보여 주었으며, lactose와 glucose는 높은 수준의 induction을 나타내었으며, IPTG는 induction 효과가 없었다. Glucosedh lactose 배지에서 L. casie는 diauxic growth나 phospho-$\beta$-galactosidase합성을 조사한 결과, catabolite repression을 받지 않는 것으로 나타났다.

• Applied Biological Chemistry
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• 제46권4호
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• pp.299-304
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• 2003

토양으로부터 lactose의 가수분해를 촉매하는 균체외 ${\beta}-galactosidase$를 생산하는 YB-9가 분리되었다. 분리균 YB-9는 분리균의 배양, 형태, 생리적 특성을 조사한 결과 Streptomyces속 균주로 동정되었다. 분리균의 배양상등액을 ammonium $sulfate(15{\sim}70%)$로 처리하고 투석하여 부분정제된 ${\beta}-galactosidase$를 $para-nitrophenyl-{\beta}-D-galactopyranoside(pNP-{\beta}Gal)$와 lactose를 기질로 하여 반응특성을 분석하기 위해 조효소액으로 사용하였다. ${\beta}-Galactosidase$는 pH $6.0{\sim}6.5$와 $60^{\circ}C$에서 최대활성을 보였다. $pNP-{\beta}Gal$과 lactose에 대한 ${\beta}$-galactosidase의 가수분해 활성은 galactose에 의해 감소되었다. Lactose에 대한 가수분해 활성은 glucose에 의해 미미하게 감소하였으나, glucose에 의해 $pNP-{\beta}Gal$에 대한 활성은 1.3배 증가하였다. 특히, xylose에 의한 lactose의 가수분해 활성에는 영향이 없었고, $pNP-{\beta}Gal$에 대한 활성은 1.6배 증가시켰다.

• 한국미생물·생명공학회지
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• 제20권1호
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• pp.46-52
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• 1992

농축유청으로부터 유청음료 제조를 위한 최적조건을 조사하기 위해 역삼투장치(reverse osmosis system)를 사용하여 치즈유청 속의 유당을 농축한 수 $\beta$-D-glactosidase로 가수분해시켜 그 분해정도를 HPLC(high performance liquid chromatography)로 측정하였다. 유당의 가수분해 정도는 농축적 유청, 2배 농축 유청과 3배 농축 유청 순으로 가수분해되었고 일정량의 효소첨가에 의해 농축된 염이 $\beta$-D-Galactosidase에 대한 약간의 저해작용을 일으켰다.

• 한국균학회지
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• 제11권3호
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• pp.109-114
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• 1983

Aspergillus phoenicis의 ${\beta}-galactosidase$ 활성을 ONPG와 lactose를 기질로서 사용하여 조사하였다. 이 효소 활성은 성장의 대수기 동안은 서서히 증가하였으나 정지기가 시작되면서 급격하게 감소하였다. 또한 이 효소는 높은 온도에서도 좋은 효소 활성을 유지하였으며, 산성 pH에서 최고의 효소활성을 나타내었다. ${\beta}-galactosidase$는 lactose보다 ONPG에 대한 기질의 친화력이 더 좋았으며, 효소 활성도 ONPG의 경우가 더 높았다. Lactose의 가수분해율은 반응액중의 lactose의 농도가 낮을 수록 높았으며, 사용균의 무게에 따라 초기에는 증가하다가 어느 수준 이상에서 부터는 점근값을 나타내었다. 효소의 활성은 효소의 고정 방법 및 조건에 영향을 받았으며, matrix의 가교가 pH 7.2 및 0.35 vol. %의 glutaraldehyde 농도에서 행하여졌을 때, 가장 높은 효소 활성을 보였다.

• 한국미생물·생명공학회지
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• 제31권2호
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• pp.151-156
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• 2003

토양으로부터 세포외로 $\beta$-galactosidase를 분비 생산하는 방선균 YB-10이 분리되었으며, 분리균의 배양ㆍ형태ㆍ생리적 특성을 조사한 결과 Streptomyces속 균주로 확인되었다. 분리균의 배양상등액을 30%~70% ammonium sulfate로 처리하고 투석하여 얻은 $\beta$-galactosidase를 조효소액으로 사용하였을 때 para-nitrophenyl-$\beta$-D-galactopyranoside (pUP$\beta$Gal)는 pH 6.0과 6$0^{\circ}C$의 반응조건에서 가장 잘 분해되었으며, lactose는 galactose와 glucose로 가수분해되는 것으로 확인되었다. 분리균이 생산하는 $\beta$-galactosidase는 galactose에 의해 lactose와 pNP-$\beta$Gal의 가수분해 활성이 모두 저해되었으나, glucose에 의해서는 lactos의 가수분해 활성만 저해되었다. 특히 pUP-$\beta$Gal의 가수분해 활성은 glucose에 의해 약 1.8배 증진되었다.

• Asian-Australasian Journal of Animal Sciences
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• 제20권6호
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• pp.989-993
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• 2007

A lactose-hydrolyzed milk with low sweetness was developed using nanofiltration. Raw milk was treated with 0.03% ${\beta}$-galactosidase at $4^{\circ}C$ for 24 h to hydrolyze lactose partially. The resultant lactose-hydrolyzed milk containing 0.43% lactose was then concentrated using a nanofiltration membrane to reach concentration factor of 2.13. The concentration factors and coefficients of retention of milk components in nanofiltration were determined. The concentration factor of milk fat was 2.20 which was the highest of the milk components. The coefficient of retention of calcium and riboflavin was 0.96 and 0.76, respectively. However, the coefficient of retention of glucose, galactose, and sodium was 0.21, 0.15, and 0.22, respectively. Raw milk was treated with 0.1% ${\beta}$-galactosidase at $4^{\circ}C$ for 40 h to hydrolyze lactose fully and then concentrated to reach a concentration factor of 1.6 by using nanofiltration. The concentrated milk was reconstituted with water. The lactose-hydrolyzed milk had sweetness similar to milk. The compositional ratios of crude protein, calcium, sodium, and riboflavin of lactose-hydrolyzed nanofiltrated milk to those of raw milk were 99%, 97%, 77%, and 80%, respectively. This study showed that nanofiltration of lactose-hydrolyzed milk to remove galactose and glucose did not cause significant loss of calcium. The lactose-hydrolyzed nanofiltrated milk contained 0.06% lactose and had sweetness similar to milk.

• 자연과학논문집
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• 제5권2호
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• pp.13-17
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• 1992

자연계에서 분리, 동정한 호알칼리성, 고온성 Bacillus sp. TA-11의 $\beta$-galactosidase 생합성 조절 기작을 조사 하였다. 시험균주의 $\beta$-galactosidase 생합성은 isoprophyl-$\beta$-Dthiogalactopyranoside (IPTG) 보다 lactose에 의해 더욱 효과적으로 유도 되었고 glucose는 lactose의 세포내 유입을 방해하면서 $\beta$-galactosidase의 생합성을 억제 하였다. 또한 이러한 glucose의 효소합성 억제효과는 cAMP에 의해 완하되지 못했다.

• 한국미생물·생명공학회지
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• 제17권5호
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• pp.524-528
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• 1989

토양으로부터 분리한 호알카리성 Bucillus sp. YS-309는 $\beta$-galactosidase 생산력이 강력하였으며 중성배지 보다도 알카리배지 중에서 균체생육 및 효소생산량이 많았다. 이 분리균의 최적 배양조건은 lactose 0.5%, yeast extract 0.5%, defatted soybean meal extract 0.6%(v/v)가 함유된 PH9.9의 알카리 배지를 사용하였을 때 얻어졌다. 이 때의 배양온도는 4$0^{\circ}C$, 배양시간은 24-30시간의 바람직한 것으로 나타났다. 또 IPTG와 lactose에 의해 효소생산이 유도적으로 증가하였으며 전자는 후자의 3배 효과가 있었다. Lactose 농도도 균체생육 및 효소생산에 영향을 미쳤으며 그 농도가 1.5% 이상 배지 중에 첨가되면 균체생육 및 효소생산이 모두 감소하였다.

• 한국미생물·생명공학회지
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• 제19권2호
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• pp.128-134
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• 1991

To study the reduced growth and synthesis, proeviously reported, of ${\beta}$-galactosidase of alkalophilic Bacillus sp. YS-309 at the higher lactose concentration of 0.5% (w/v) in the medium, lactose transport and utilization were examined. The results showed that lactose transport was influenced by the addition of four kinds of antibiotics, and tetracycline stimulated most but not valinomycin. PEP-potentials of the cells grown on lactose was estimated lower than the cells on glucose and on galactose. Thus, the transport of lactose was independent of intracellular PEP and phosphorylation reactions, and was thought to be uptaked directly or oxidized in part in the transport process. In the other hand, once lactose was uptaked into the cells, it was hydrolyzed by ${\beta}$-glactosidase to glucose and galactose. The former was metabolized fast but the latter was accumulated. Galactose and lactose were not utilized until glucose was mostly depleted in the medium. The ${\beta}$-galactosidase synthesis decreased in the presence of glucose over 0.2% and galactose over 0.05 to 0.1%, respectively. In conclusion, it was considered for glucose as a repressor and galactose as a inducer for ${\beta}$-galactosidase synthesis even though the mechanisms were not elucidated. Catabolite repression of glucose on the enzyme synthesis was not relieved by the addition of exogeneous cAMP.

• Journal of Microbiology and Biotechnology
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• 제8권5호
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• pp.484-489
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• 1998

Galactooligosaccharides (GalOS) were efficiently produced by partially purified $\beta$-galactosidase from the yeast strain Bullera singularis ATCC 24193. Ammonium sulfate precipitation and ultrafiltration methods were used to prepare the enzyme. The enzyme activity decreased at $50^{\circ}C$ and above. A maximum yield of 40% (w/w) GalOS, corresponding to 120 g of GalOS per liter, was obtained from 300 g per liter of lactose solution at $45^{\circ}C$, pH 3.7 when the lactose conversion was 70%. The yield of GalOS did not increase with increasing initial lactose concentration but the total amounts of GalOS did. Volumetric productivity was 4.8 g of GalOS per liter per hour. During this reaction, the by-products, glucose and galactose, were found to inhibit GalOS formation. Reaction products were found to be comprised of disaccharides and trisaccharides according to TLC and HPLC analyses. We propose the structure of the major product, a trisaccharide, to be ο-$\beta$-D-galactopyranosyl-(l-4)-ο-$\beta$-D-galactopyranosyl-(l-4)-$\beta$-D-glucose (4'-galactosyl lactose).