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Cooperation of $G{\beta}$ and $G_{\alpha}q$ Protein in Contractile Response of Cat Lower Esophageal Sphincter (LES)

  • Sohn, Uy-Dong;Lee, Tai-Sang
    • The Korean Journal of Physiology and Pharmacology
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    • 제7권6호
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    • pp.349-355
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    • 2003
  • We previously shown that LES contraction depends on $M_3$ receptors linked to PTX insensitive $G_q$ protein and activation of PLC. This results in production of $IP_3$, which mediates calcium release, and contraction through a CaM dependent pathway. In the esophagus ACh activates $M_2$ receptors linked to PTX sensitive $G_{i3}$ protein, resulting in activation of PLD, presumably, production of DAG. We investigated the role of PLC isozymes which can be activated by $G_q$ or $G{\beta}$ protein on ACh-induced contraction in LES and esophagus. Immunoblot analysis showed the presence of 3 types of PLC isozymes, $PLC-{\beta}1$, $PLC-{\beta}3$, and $PLC-{\gamma}1$, but not $PLC-{\beta}2$, $PLC-{\beta}4$, $PLC-{\gamma}2$, $PLC-{\delta}1$, and $PLC-{\delta}2$ from both LES and esophageal muscle. ACh produced contraction in a dose dependent manner in LES and esophageal muscle cells obtained by enzymatic digestion with collagenase. $PLC-{\beta}1$ or $PLC-{\beta}3$ antibody incubation reduced contraction in response to ACh in LES but not in esophageal permeabilized cells, but $PLC-{\gamma}1$ antibody incubation did not have an inhibitory effect. The inhibition by $PLC-{\beta}1$ or $PLC-{\beta}3$ antibody on Ach-induced contraction was antibody concentration dependent. The combination with $PLC-{\beta}_1$ and $PLC-{\beta}_3$ antibody completely abolished the contraction, suggesting that $PLC-{\beta}1$ and $PLC-{\beta}3$ have a synergism to inhibit the contraction in LES. $PLC-{\beta}1$, -${\beta}3$ or -${\gamma}1$ antibody did not reduce the contraction of LES cells in response to DAG ($10^{-6}$ M), suggesting that this isozyme of PLC may not activate PKC. When $G_{q/11}$ antibody was incubated, the inhibitory effect of the incubation of PLC ${\beta}3$, but not of PLC ${\beta}_1$ was additive (Fig. 6). In contrast, when $G_{\beta}$ antibody was incubated, the inhibitory effect of the incubation of PLC ${\beta}_1$, but not of PLC ${\beta}_3$ was additive. This data suggest that $G_{q/11}$/11 or $G{\beta}$ may activate cooperatively different PLC isozyme, $PLC{\beta}_1$ or $PLC{\beta}_3$ respectively.

보리와 귀리의 ${\beta}-Glucans$ 및 가공에 의한 용해성의 변화 (${\beta}-Glucans$ in Barley and Oats and Their Changes in Solubility by Processing)

  • 이영택
    • Applied Biological Chemistry
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    • 제39권6호
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    • pp.482-487
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    • 1996
  • 한국산 보리 및 귀리품종의 수용성, 불용성 및 총 ${\beta}-glucan$ 함량을 분석하여 ${\beta}-glucan$의 용해성을 조사하였다. 보리원맥의 총 ${\beta}-glucan$ 함량은 $3.3{\sim}5.6%$ 범위였으며 $65{\sim}70%$ 정맥수율로 도정하여 껍질 및 강층을 제거한 정맥의 ${\beta}-glucan$ 함량은 $3.5{\sim}7.1%$로 증가하였다. 보리원맥의 수용성 ${\beta}-glucan$ 함량은 $1.4{\sim}3.3%$의 분포였으며 총 ${\beta}-glucan$에 대한 수용성 ${\beta}-glucan$의 백분을로 나타낸 용해성(% solubility)은 $43{\sim}61%$ 범위로 총량의 약 반가량이 수용성인 것으로 나타났다. 보리정맥에 있어서는 총 ${\beta}-glucan$과 불용성 ${\beta}-glucan$ 함량은 증가한 반면 수용성 ${\beta}-glucan$은 약간 감소하는 경향을 보여 용해성이 $35{\sim}55%$로 원맥보다 다소 낮았다. 귀리는 총 ${\beta}-glucan$ 함량이 겉귀리에서 $3.1{\sim}4.0%$, groats에서 $4.0{\sim}4.8%$였으며 불용성 ${\beta}-glucan$ 함량이 $0.5{\sim}0.7%$로 보리에서 보다 훨씬 낮아 추출되어 나오는 수용성 ${\beta}-glucan$은 약 84%로 매우 높게 나타났다. 보리와 귀리는 추출초기에 빠른 속도로 ${\beta}-glucan$이 추출되었으며 귀리가 보리에 비해 추출이 보다 급격히 이루어졌는데 $2{\sim}3$시간 후에는 대부분의 수용성 ${\beta}-glucan$이 추출되었다 추출온도가 $23{\sim}45^{\circ}C$로 증가함에 따라 수용성 추출량이 증가하였으나 $65^{\circ}C$에서는 보리의 경우 추출량이 떨어졌다. 보리 및 귀리는 증자에 의한 가열처리에 의해 불용성 ${\beta}-glucan$ 함량이 증가하여 ${\beta}-glucan$의 용해성이 떨어진 반면 보리의 볶음처리에서는 ${\beta}-glucan$이 가용화됨에 따라 용해성이 증가하는 것으로 나타났다.

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\beta-Galactosidase를 생산하는 Streptomyces sp. YB-10의 분리 및 효소 특성 (Characterization of the \beta-Galactosidase Produced by Streptomyces sp. YB-10)

  • 윤기홍;이경섭;김창진
    • 한국미생물·생명공학회지
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    • 제31권2호
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    • pp.151-156
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    • 2003
  • 토양으로부터 세포외로 $\beta$-galactosidase를 분비 생산하는 방선균 YB-10이 분리되었으며, 분리균의 배양ㆍ형태ㆍ생리적 특성을 조사한 결과 Streptomyces속 균주로 확인되었다. 분리균의 배양상등액을 30%~70% ammonium sulfate로 처리하고 투석하여 얻은 $\beta$-galactosidase를 조효소액으로 사용하였을 때 para-nitrophenyl-$\beta$-D-galactopyranoside (pUP$\beta$Gal)는 pH 6.0과 6$0^{\circ}C$의 반응조건에서 가장 잘 분해되었으며, lactose는 galactose와 glucose로 가수분해되는 것으로 확인되었다. 분리균이 생산하는 $\beta$-galactosidase는 galactose에 의해 lactose와 pNP-$\beta$Gal의 가수분해 활성이 모두 저해되었으나, glucose에 의해서는 lactos의 가수분해 활성만 저해되었다. 특히 pUP-$\beta$Gal의 가수분해 활성은 glucose에 의해 약 1.8배 증진되었다.

보리 ${\beta}$-glucan 강화 국수의 품질 특성 (Quality Characteristics of Barley ${\beta}$-Glucan Enriched Noodles)

  • 이영택;정지영
    • 한국식품과학회지
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    • 제35권3호
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    • pp.405-409
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    • 2003
  • 생리적 활성이 큰 보리 ${\beta}$-glucan 을 효율적으로 활용하기 위한 방안으로 보리가루와 보리 ${\beta}$-glucan 강화분을 30% 수준으로 첨가하여 제조한 고식이섬유 국수의 품질 특성에 관하여 조사하였다. 보리가루와 보리 ${\beta}$-glucan 강화분을 첨가한 복합분은 중력분에 비해 호화개시온도가 낮았고 최고점도가 약간 높았으며 set back은 감소하여 노화속도가 느릴 것으로 해석되었다. 보리가루와 ${\beta}$-glucan 강화분을 첨가한 국수의 L값과 b값은 약간 낮았으며 조리했을 때 L, a, b값이 모두 감소하는 경향을 보였다. 보리 ${\beta}$-glucan 강화분을 첨가한 국수는 조리시의 체적, 중량, 함수율, 고형분 용출량이 대조구 보다 낮게 나타났다. 보리 ${\beta}$-glucan 강화분을 첨가한 국수의 조리후 텍스쳐에서 탄성은 대조구보다 떨어지나 검성, 견고성, 씹힘성은 더 높았으며 관능평가에서 대조구보다 다소 떨어지는 것으로 나타났다. 보리 ${\beta}$-glucan 강화 국수는 조리후 총, 불용성, 수용성 ${\beta}$-glucan의 함량이 약간 증가하였다.

Bryostatin-1에 의한 Wnt/${\beta}$-Catenin 신호전달체계 저해효과 (Suppression of the Wnt/${\beta}$-catenin Pathway by Bryostatin-1)

  • 박서영;오상택
    • 한국미생물·생명공학회지
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    • 제42권1호
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    • pp.89-92
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    • 2014
  • Wnt/${\beta}$-catenin 신호전달체계는 세포 증식, 분화, 그리고 기관 발생과 같은 다양한 생명현상에 중요한 역할을 한다. 본 연구에서는 세포기반 스크리닝 기법을 사용하여 Wnt/${\beta}$-catenin 신호전달체계를 저해하는 bryostatin-1을 발굴하였다. Bryostain 1은 ${\beta}$-catenin의 mRNA 수준에는 영향을 미치지 않는 반면 세포 내 ${\beta}$-catenin 단백질 수준을 감소시킴으로 Wnt3a-CM에 의해 활성화 된 ${\beta}$-catenin response transcription (CRT)을 억제하였다. 또한 프로테아좀의 활성을 저해하였을 경우 bryostatin-1에 의한 ${\beta}$-catenin 수준 감소가 억제되었다. 본 연구의 결과들로부터 bryostatin-1이 프로테아좀에 의한 ${\beta}$-catenin 단백질 분해를 촉진함으로써 Wnt/${\beta}$-catenin 신호전달체계를 저해함을 확인하였다.

Four New Acetylated Ginsenosides from Processed Ginseng(Sun Ginseng)

  • Park, Il-Ho;Han, Sang-Beom;Kim, Jong-Moon;Piao, Longzhu;Kwon, Sung-Won;Kim, Na-Young;Kang, Tak-Lim;Park, Man-Ki;Park, Jeong-Hill
    • Archives of Pharmacal Research
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    • 제25권6호
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    • pp.837-841
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    • 2002
  • Four new acetylated ginsenosides were isolated from the processed ginseng (SG, sun ginseng). Their structures were determined to be $3{\beta},{\;}12{\beta}-dihydroxydammar-20(22),24-diene-3-O-{\beta}-D-glucopyranosyl(1{\rightarrow}2)-{\beta}-D-6"-O-acetylglucopyranoside;{\;}3{\beta},12{\beta}-dihydroxydammar-20(21),{\;}24-diene-3-O-{\beta}-D-glucopyranosyl(1{\rightarrow}2)-{\beta}-D-6"-O-acetylglucopyranoside;{\;}3{\beta},{\;}6{\alpha},12{\beta}-trihydroxydammar-20(22),24-diene-6-O-{\beta}-D-6'-O-acetylglucopyranoside{\;}and{\;}3{\beta},6{\alpha},12{\beta}-trihydroxydammar-20(21),24-diene-6-O-{\beta}-D-6'-O-acetylglucopyranoside$ based on spectroscopic evidences. The compounds were named ginsenoside $Rs_4,{\;}Rs_5,{\;}RS_6{\;}and{\;}Rs_7$, respectively.pectively.

생체적합성과 생분해성을 갖는 키틴유도체의 합성과 물성 VI. -$\beta$-키틴과 그 유도체들의 라이소자임에 의한 생분해도 및 물성변화- (Synthesis and Physical Properties of Biocompatible and Biodegradable Chitin Derivatives Vl. -Biodegradation of $\beta$-Chitin and Its Derivatives by Lysozyme-)

  • 김선정;이영무
    • 대한의용생체공학회:의공학회지
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    • 제16권3호
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    • pp.257-264
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    • 1995
  • $\beta$-키틴의 글구코사민 단위에 클로로프로판, 산화프로필렌 및 클로로프로판 디올을 반응시켜 프로필키틴(PPC), 히드록시프로필 키틴(HPC) 및 디히드록시프로필 키틴(DHPC) 등의 $\beta$-키틴 유도체들을 합성하였고 이들을 99% 포름산에 용해시켜 30wt%이상의 고분자용액의 농도에서 액정을 형성시켰다. 액정이 형성된 용액으로 부터 필름을 제조하여 라이소자임이 포함된 유사체액 pH 1.2, pH 6.7, 및 pH 8.2 용액에서 in vitro 분해정도를 관찰한 결과 처음 일주일에서 $\beta$-키틴 유도체들이 $\beta$-키틴보다 급격히 분해되었으며 $\beta$-키틴 유도체들중에서는 DHPC가 가장 좋은 생분해정도를 나타냈다.

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Pseudomonas sp. Endo-1,4-$\beta$-Glucanase와 $\beta$-1,4-Glucosidase 유전자의 대장균 및 효모에서의 동시 발현 (Simultaneous Expression of Pseudomonas sp. Endo-1,4$\beta$-Glucanase and $\beta$-1,4=Glucisidase Gene in Escherichia coli and Saccharomyces cerevisiae)

  • 김양우;전성식;정영철;성낙계
    • 한국미생물·생명공학회지
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    • 제23권6호
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    • pp.652-658
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    • 1995
  • We attempted simultaneous expression of genes coding for endoglucanase and $\beta $-glucosidase from Pseudomonas sp. by using a synthetic two-cistron svstem in Escherichia coli and Saccharomyces cerevisiae. Two-cistron system, 5'--tac promoter-endoglucanase gene--$\beta $-glucosidase gene-- 3', 5'-tac promoter--$\beta $-glucosidase gene--endoglucanase gene--3' and 5'-tac promoter--endoglucanase gene--SD sequence--$\beta $-glucosidase gene--3, were constructed, and expressed in E. coli and S. cerevisiae. The E. coli and S. cerevisiae contained two-cistron system produced simultaneously endoglucanase and $\beta $-glucosidase. The recombinant genes contained the bacterial signal peptide sequence produced low level of endoglucanase and $\beta $-glucosidase in S. cerevisiae transformants: Approximately above 44% of two enzymes was localized in the intracellular fraction. The production of endoglucanase and $\beta $-glucosidase in veast was not repressed in the presence of glucose or cellobiose. The veast strain contained recombinant DNA with two genes hydrolyzed carboxvmethyl cellulose, and these endoglucanase and $\beta $-glucosidase degraded CMC synergistically to glucose, cellobiose and oligosaccharide. This result suggests the possibility of the direct bioconversion of cellulose to ethanol by the recombinant yeast.

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췌장 베타세포에서 인터루킨-$1{\beta}$로 유도한 인슐린 의존형 당뇨병 실험 모델 (Prediabetic In vitro Model in Pancreatic Beta Cells Induced by Interleukin-$1{\beta}$)

  • 이인순;이인자;김경태
    • 약학회지
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    • 제42권4호
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    • pp.408-413
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    • 1998
  • To establish prediabetes in vitro/ model concerning the etiology of Insulin Dependent Diabetes Mellitus (IDDM) in cellular level we have designed experimental prediabefic model in pancreatic beta cells. RINm5F, HIT-T15 and isolated rat islets were chosen as pancreatic beta cells. Since interleukin-$1{\beta}$-induced beta cell cytotoxicity has been implicated in the autoimmune cytotoxicity of IDDM, we used inteleukin-$1{\beta}$ as diabetogenic agent. For establishment of prediabetic in vitro model, the degree of beta cell deterioration was determined by cell proliferation, insulin release and morphological appearance. Cell proliferation, insulin release and morphology were changed dose-dependently in condition that inteleuldn-$1{\beta}$ was exposured to pancreatic beta cells. The concentration and exposure time of interleukin-$1{\beta}$ to set up prediabetic model in beta cell lines and isolated rat islets were 100${\sim}$1000U/ml, 48hr. And 25${\sim}$100U/ml, 48hr, respectively.

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Production and bioactivity of recombinant tilapia IL-$1\beta$

  • Hong, Su-Hee
    • 한국어병학회지
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    • 제22권2호
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    • pp.147-153
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    • 2009
  • To study the biological activity of interleukin-$1\beta$(IL-$1\beta$), a proinflammatory cytokine, in nile tilapia, Oreochromis niliticus, the recombinant tilapia IL-$1\beta$ was produced in E. coli cells based on pQE vector. Ni-NTA (nitriloacetic acid) metal affinity chromatography was used to purify recombinant protein. The eluted fractions exhibited a single band of protein with a molecular weight of about 25kDa, which is in close agreement with 25.4 kDa predicted by the cDNA sequence. The biological activity of the purified recombinant tilapia IL-$1\beta$ was tested through its effects on IL-$1\beta$ gene expression, which are known as IL-$1\beta$ inducible genes in mammals and fishes. IL-$1\beta$ gene expression induced by poly I:C, a synthetic double stranded RNA, was also assessed in tilapia head kidney cells. IL-$1\beta$ gene expression was analysed using QPCR (quantitative polymerase chain reaction). The ratio of the indicated gene expression was expressed as the relative mRNA level to $\beta$-actin mRNA level, which is constitutively expressed in macrophages. Consequently, head kidney cells incubated for three hours with rIL-$1\beta$(10, 2, 1 $\mu{g}$/ml) showed a dose dependent increase in IL-$1\beta$ mRNA levels and 1 $\mu{g}$/ml of poly I:C was also able to induce IL-$1\beta$ gene expression in head kidney in tilapia.