• 제목/요약/키워드: $\beta$-

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Beta-4 Integrin 유전자 주입, 클로닝과 편평상피암에서의 Beta-4 Integrin 기능에 관한 연구 (Beta-4 Integrin Transfection, Cloning and Functional Assay in Squamous Cell Carcinoma)

  • 김영민
    • 대한두경부종양학회지
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    • 제13권2호
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    • pp.169-179
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    • 1997
  • 서론 : Laminin의 수용기로 알려진 Integrin $\alpha6\beta4$의 세포내 표현 정도는 편평상피암을 위시한 여러 악성종양의 전이능력 및 예후와 밀접한 상관관계가 없다고 알려져 있다. 이 Integrin은 Laminin과 같은 세포와 리간드와 결합하면 상피세포의 기저막 지주 구조물인 hemidesmosome의 세포체질 요소(cytoskeletal element)와 연관되어 그 결과 세포의 기저막과 세포내 케라틴을 연결하는 역할을 한다. Integrin $\alpha6\beta4$는 구조적으로 다른 많은 integrin들과 달리 $\beta$4의 세포질내 영역(cytoplasmic domain)이 특징적으로 크다. 이 세포질내 영역 $\beta$4 integrin의 기능은 아직 밝혀지지 않고 있으나 아마 세포 성장의 신호전달 및 악성종양의 특징인 침윤 전이에 관련할 것으로 보아지고 있다. 재료 및 방법: 저자들은 우선 $\beta$4 integrin의 wild type s-DNA와 $\beta$4 세포질내 영역(cytoplasmic domain) 및 $\beta$4의 tyrosine 인산화 반응 부위가 각각 결손된 c-DNA를 PCR을 통하여 합성하여 pRc/CMV 벡터에 삽입한 후 원래 $\beta$4 integrin의 발현이 결집된 인간 방광암 세포에 Calcium phosphate precipitation 방법으로 주입(transfection)시켜 형질변환된 세포를 면역형광법, Flow cytometry 및 Immunoprecipitation 방법으로 클로닝하여 wild type $\beta$4-full length(Clone FL), truncated $\beta$4-cytoplasmic domain(C1one CD), 및 mutated $\beta$4-tyrosine phosphorylation site (Clone M)을 얻었다. 암 세포의 부착 및 침투 능력의 기능적 연구로 모노 클로날 항체와 fibronectin, laminin, Matrigel을 단백질 기질로 사용하였으며 결과 비교를 위하여 pRc/CMV 벡터만 주입시켰던 클로운과 방광암 세포주를 $\beta$4 integrin 음성 대조군으로 또한 이 Integrin의 높은 발현을 보이는 두경부 편평상피암 세포주를 양성 대조군으로 이용하였다. 결과 : 세포부착능력에 있어서 온전한 $\beta$4 cytoplasmic domain이 존재하는 클로운이 laminin에 강한 부착능력을 보였으나 fibronectin의 부착정도는 $\beta$4 integrin의 표현정도와 관계없이 모든 클로운에서 비슷하였다. Matrigel을 투과하는 암세포 침윤 능력에서는 $\beta$4 integrin의 표현이 존재하는 클로운들이 투과 능력이 높았으나 세포외 리간드가 없는 control membrane을 사용하였을 때와 비교하여 투과능력의 차이를 보이지 않았다. 결론 : 유전자 주입(transfection) 방법으로 integrin의 다양한 클로운의 합성이 가능하여 이 Integrin의 암 세포의 부착 및 침투 능력에서의 기능을 규명 할 수 있게 한다. $\beta$4 integrin은 편평상피 암세포의 부착에 있어서 세포외 리간드 laminin과 특이 결합하여 부착 능력을 높이는 중요한 역할을 하며 편평상피 암세포의 침투에 있어서는 $\beta$4 integrin의 표현이 침투 능력을 높이는 역할을 하나 이때에는 laminin과 같은 리간드와의 특이 결합에 의존하지는 않는 것으로 사료된다.

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${\beta}-Estradiol$이 토끼 근위 세뇨관 상피세포의 성장에 미치는 영향 (Effect of ${\beta}-Estradiol$ on the Growth of Primary Rabbit Proximal Tubule Cells in Serum-free Medium)

  • 박상호;정주호;고계창;정지창
    • 대한약리학회지
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    • 제29권1호
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    • pp.73-83
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    • 1993
  • Steroid hormone의 하나인 ${\beta}-estradiol$이 serum-free medium에서 배양한 토끼의 신장 근위세뇨관 상피세포의 세포성장과 기능에 미치는 영향을 관찰한 바 다음과 같은 결과를 얻었다 1. Serum-free medium에서 토끼의 신장 근위세뇨관 상피세포는 ${\beta}-estradiol$ 1 nM의 농도에서 유의한 세포 성장 촉진 효과를 나타내었고, ${\beta}-estradiol$ 10 nM이상의 농도에서는 세포성장이 억제되었다. 2. ${\beta}-Estradiol$은 serum-free medium에서 성장촉진인자의 하나인 hydrocortisone을 뺀 조건하에서 세포 성장을 증가시키었다. 3. ${\beta}-Estradiol$은 hydrocortisone을 growth supplement로 넣어준 serum-free medium에서 토끼 신장의 근위세뇨관 상피세포의 성장을 촉진시키었다. 4. ${\beta}-Estradiol$은 Northern blot analysis에 의하여 확인한 alpha I (IV) collagen mRNA level에는 별다른 변화를 보이지 않으나, ${\beta}-actin$mRNA level은 증가되었다. 이상의 결과로 미루어 보아, serum-free 그리고 hormonally defined media에서 ${\beta}-estradiol이$ 토끼의 신장 근위세뇨관 상피세포의 성장 및 기능에 대하여 촉진적으로 작용하는 것은 cellular microfilament의 중요한 구성단백의 하나로 밝혀진 ${\beta}-actin$의 합성 증가에 기인하는 것으로 생각된다.

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β-glycerophosphate 혼합시 인간 치수 세포에 대한 Portland cement의 생활성에 관한 연구 (A BIOACTIVITY STUDY OF PORTLAND CEMENT MIXED WITH β-GLYCEROPHOSPHATE ON HUMAN PULP CELL)

  • 오영환;장영주;조용범
    • Restorative Dentistry and Endodontics
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    • 제34권5호
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    • pp.415-423
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    • 2009
  • $\beta$-glycerophosphate는 치수의 상아모세포 분화를 촉진하는 물질이다. Portland cement는 수중에서 장기간에 걸쳐 용해되기 때문에 $\beta$-glycerophosphate을 혼합한 Portland cement는 수산화칼슘과 함께 $\beta$-glycerophosphate를 장기간 용출하게 된다. 본 실험에서는 $\beta$-glycerophosphate을 혼합한 Portland cament에 대한 인간치수세포의 반응을 알아보았다. 인간 치수 세포에 대한 $\beta$-glycerophosphate의 효과를 알아보기 위해 다양한 농도의 $\beta$-glycerophosphate와 dexamethasone에 대한 인간 치수 세포의 ALP activity을 측정하였고 alizarin red S로 염색하여 관찰하였다. $\beta$-glycerophosphate가 다양한 농도(10 mM, 100 mM, 1 M)로 혼합된 Portland cement에 대한 인간 치수 세포의 MTS assay, ALP activity를 측정하고 SEM으로 관찰하였다. 치수세포의 석회화 정도를 관찰한 연구에서 $\beta$-glycerophosphate와 dexamethasone 단독으로 적용하였을 때 거의 효과가 없었으나 5 mM $\beta$-glycerophosphate와 100 nM dexamethasone을 혼합 적용하였을 때 가장 높은 ALP acticity를 보였다. 분화제를 첨가하거나 첨가하지 않은 모든 실험군에서 치수세포에 대한 독성은 관찰되지 않았으며 Portland cement에 10 mM $\beta$-glycerophosphate을 혼합한 시편의 ALP activity가 대조군에 비교하여 가장 많이 증가하였다. 결론적으로 $\beta$-glycerophosphate이 혼합된 Portland cement는 세포 독성이 없으며 첨가물이 없는 Portland cement에 비해 치수 분화 및 석회화를 더 많이 일으키므로 임상적으로 $\beta$-glycerophosphate을 혼합한 Portland cement 적용은 재료 하방에 더 많은 상아질을 형성시킬 것으로 추측된다.

芳香族 誘導體의 염素化反應 Ethyl-${\alpha},{\beta}-dichloro-{\beta}$-phenyl propionate의 gamma 線 鹽素化反應 (Chlorination of Phenyl Derivatives : Chlorination of ethyl -${\alpha},{\beta}-dichloro-{\beta}$-phenyl propionate under gamma ray irradiation)

  • 김유선;김기수
    • 대한화학회지
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    • 제12권2호
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    • pp.55-60
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    • 1968
  • 芳香族誘道體 化合物의 鹽素化反應을 紫外線照射 및 ${\gamma}$-線照射下에서 行하였던 바 ethyl,${\alpha} ,{\beta} -dichloro-{\beta}$-phenyl propionate의 境遇 紫外線下에서는 主로 p-chloro 化合物이 生成되었다. 같은 反應을 ${\gamma}$-線 照射下에서 行한 結果 에스텔과 鹽素의 몰比가 1:2일 때에는 p-chloro 化合物이 主로 生成되었으나 몰比가 1:8인 境遇에는 側鎖鹽素化物이라고 判斷되는 多鹽素化合物이 生成되었다. 反應生成物을 確認하기 爲하여서 ethyl , ${\alpha} ,{\beta} -dichloro-{\beta}$-(p-chlorophenyl) propionate 및 ethyl${\alpha} ,{\beta} -dichloro-{\beta}$ -($o$-chlorophenyl) propionate 를 各各 ${\gamma}$-線 照射下에서 鹽素化시켜 보았더니 p-chloro誘道體에서는 側鎖鹽素化物을, o-chloro誘道體에서는 o,p-dichlorophenyl 化合物에 各各 該當하는 鹽素化物을 生成하였다. 化合物 確認에는 放射化 thin layer chromatography를 利用 하였으며 鹽素含量을 放射化分析法을 分析하였다. 反應結果를 鹽素化反應에 對한 芳香族의 置換基의 效果와 關聯시켜 論議하였으며 實驗方法을 記述하였다.

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$\beta$-시클로덱스트린($\beta$-Cyclodextrin)의 결합 특성과 벤젠의 생물학적 분해에의 적용에 대한 연구 (A Study on the Binding Characteristics of $\beta$-Cyclodextrin with Benzene and Its Application on the Bioremediation)

  • 최종규;손현석;조경덕
    • 한국환경보건학회지
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    • 제28권5호
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    • pp.65-70
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    • 2002
  • Recently, surfactants were frequently used in order to desorb the hydrophobic organic compounds (HOCs) from soil and to enhance the bioavailability. Among them, -cyclodextrin ($\beta$-CD) is one of those. This study was performed to investigate the binding characteristics between benzene and $\beta$-CD and to examine the bioavailability of benzene. First, we investigated binding characteristics between benzene and $\beta$-CD in water and water/soil system. Then, we examined the effect of $\beta$-CD on the biodegradation of benzene in water and water/soil system. Experimental results on the binding characteristics showed that $\beta$-CD resulted in an efficient complex formation with benzene. As -CD concentration increased, the benzene concentration complexed with $\beta$-CD rapidly increased to 30-40% initial benzene added, and reached the equilibrium. We also investigated the effect of $\beta$-CD on the desorption of benzene from soil in the water/soil system. As $\beta$-CD concentration increased, benzene concentration desorbed into water increased up to 90%. How-ever, in its application to biodegradation of benzene in water and water/soil system, the biodegradation rate of benzene did not improved in the presence of $\beta$-CD compared with in the absense of $\beta$-CD. This result indicated that $\beta$-CD was more preferentially used as a carbon source than benzene. Therefore, for remediation of benzene contaminated soils, $\beta$-CD can be used as a surfactant to desert benzene from soil, and then ex-situ chemical treatment can be applied for the remediation.

에스트로겐 수용체 ${\beta}$ 발현과 유방암 재발과의 관련성 (The Relationship Between the Expression of Estrogen Receptor ${\beta}$ and Recurrence in Breast Cancer)

  • 강수환;최정은;이수정
    • Journal of Yeungnam Medical Science
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    • 제28권2호
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    • pp.153-164
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    • 2011
  • Background: It has been reported that estrogen receptor beta ($ER{\beta}$) mRNA expression was down-regulated during carcinogenesis and was inversely related to estrogen receptor alpha ($ER{\alpha}$) expression in breast cancer. The association of $ER{\beta}$ mRNA expression to tamoxifen resistance has also been reported. In this study, the expression of $ER{\alpha}$ and $ER{\beta}$ via immunohistochemistry (IHC) and reverse transcription-polymerase chain reaction (RT-PCR) was prompted, and an attempt was made to find out the relationship between $ER{\beta}$ expression and recurrence in the hormonal therapy group, and between $ER{\beta}$ expression and known prognostic factors. Methods: Tumor specimens were obtained at surgery from 67 female breast cancer patients during the period of September 1995 to December 2000. All the specimens were frozen in liquid nitrogen and kept at $-70^{\circ}C$ until they were used. The medical records were analyzed retrospectively. The expressions of ER were analyzed using IHC and RT-PCR methods. Results: The median follow-up was at 93.0 months (range: 14-157 months). The percentage of $ER{\alpha}+/ER{\beta}+$, $ER{\alpha}+/ER{\beta}-$, $ER{\alpha}-/ER{\beta}+$, and $ER{\alpha}-/ER{\beta}$ group were 35.9% 9.4%, 47.2%, and 7.5%, respectively, in 53 patients with hormonal therapy. $ER{\beta}$ was positive in 42 (82.3%) of 51 ER-positive patients. In the hormonal therapy group, the recurrence rates of each group was 15.8%, 0%, 40.0%, and 0%, respectively. In this group, the $ER{\beta}$ expression tended to recur, but there was no clinical significance (p=0.084). Conclusion: The $ER{\beta}$ expression may be a predictive marker of a poor response to endocrine therapy in breast cancer patients, although this needs to be confirmed in additional studies.

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젖산균 발효를 통한 녹차 추출물의 Epigallocatechin 함량의 증대 (Increase of Epigallocatechin in Green Tea Extract by Lactic Acid Bacteria Fermentation)

  • 최찬영;박은희;주영운;김명동
    • 한국미생물·생명공학회지
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    • 제44권1호
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    • pp.62-67
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    • 2016
  • 전통발효 식품으로부터 젖산균을 분리하고, ${\beta}$-glucosidase, ${\beta}$-glucuronidase, ${\beta}$-xylosidase, ${\beta}$-galactosidase, ${\beta}$-arabinofuranosidase, ${\beta}$-arabinosidase, ${\beta}$-arabinopyranosidase 등 생물전환과 관련된 유용 효소활성을 조사하였다. 효소활성 평가를 통하여 선발된 9점의 젖산균 발효에 의한 epigallocatechin-3-gallate(EGCG), epigallocatechin(EGC), epicatechin gallate(ECG), 및 epicatechin(EC)의 함량 변화를 조사하였다. 배추 김치에서 분리된 Leuconostoc mesenteroides MBE1424로 명명된 균주는 발효에 의하여 카테킨 중 EGC의 함량을 약 60% 증가시켰으며, 배양온도 $40^{\circ}C$에서 가장 우수한 비성장속도를 나타내어 기존에 보고된 균주보다 상대적으로 내열성이 우수한 것으로 판단되었다. Leuconostoc mesenteroides 균주는 녹차 추출물의 생물전환에 필요한 유용한 효소계를 보유하고 있는 것으로 추정되었다.

Cloning and Molecular Characterization of ${\beta}$-1,3-Glucan Synthase from Sparassis crispa

  • Yang, Yun Hui;Kang, Hyeon-Woo;Ro, Hyeon-Su
    • Mycobiology
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    • 제42권2호
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    • pp.167-173
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    • 2014
  • A ${\beta}$-glucan synthase gene was isolated from the genomic DNA of polypore mushroom Sparassis crispa, which reportedly produces unusually high amount of soluble ${\beta}$-1,3-glucan (${\beta}$-glucan). Sequencing and subsequent open reading frame analysis of the isolated gene revealed that the gene (5,502 bp) consisted of 10 exons separated by nine introns. The predicted mRNA encoded a ${\beta}$-glucan synthase protein, consisting of 1,576 amino acid residues. Comparison of the predicted protein sequence with multiple fungal ${\beta}$-glucan synthases estimated that the isolated gene contained a complete N-terminus but was lacking approximately 70 amino acid residues in the C-terminus. Fungal ${\beta}$-glucan synthases are integral membrane proteins, containing the two catalytic and two transmembrane domains. The lacking C-terminal part of S. crispa ${\beta}$-glucan synthase was estimated to include catalytically insignificant transmembrane ${\alpha}$-helices and loops. Sequence analysis of 101 fungal ${\beta}$-glucan synthases, obtained from public databases, revealed that the ${\beta}$-glucan synthases with various fungal origins were categorized into corresponding fungal groups in the classification system. Interestingly, mushrooms belonging to the class Agaricomycetes were found to contain two distinct types (Type I and II) of ${\beta}$-glucan synthases with the type-specific sequence signatures in the loop regions. S. crispa ${\beta}$-glucan synthase in this study belonged to Type II family, meaning Type I ${\beta}$-glucan synthase is expected to be discovered in S. crispa. The high productivity of soluble ${\beta}$-glucan was not explained but detailed biochemical studies on the catalytic loop domain in the S. crispa ${\beta}$-glucan synthase will provide better explanations.

Varietal and Annual Variations of β-Glucan Contents in Korean Barley (Hordeum vulgare L.) and Oat (Avena sativa L.) Cultivars

  • Lee, Mi-Ja;Yoo, Jae-Soo;Kim, Yang-Kil;Park, Jong-Chul;Kim, Tae-Soo;Choi, Jae-Seong;Kim, Kee-Jong;Kim, Hyung-Soon
    • 한국작물학회지
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    • 제56권3호
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    • pp.284-291
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    • 2011
  • Varietal and annual variations in the contents of ${\beta}$-glucan fractions per weight grain samples were examined in sixteen covered and eighteen naked barley and five oat cultivars developed in Korea. Also, the effect of pearling on ${\beta}$-glucan content was investigated. Average contents of total, soluble and insoluble ${\beta}$-glucan fractions were 5.25, 3.72, and 1.53%, respectively, in covered barley, and 5.86, 3.51, and 2.35%, respectively, in naked barley. Soluble ${\beta}$-glucan content was higher in covered barley, though total ${\beta}$-glucan content higher in naked barley. The total and insoluble ${\beta}$-glucan contents were higher in pearled grains. Total ${\beta}$-glucan content was higher in waxy barley than in non-waxy barley. Duwonchapssalbori, a two-rowed and waxy naked barley cultivar, was highest in total, soluble and insoluble ${\beta}$-glucan contents. Highly significant positive correlations were observed between total ${\beta}$-glucan and soluble ${\beta}$-glucan contents both in covered and naked barley. There were significant annual variations in total ${\beta}$-glucan content in barley. Average contents of total, soluble and insoluble ${\beta}$-glucans of oat cultivars were 4.33, 3.44, and 0.89%, respectively. Contents of all fractions of ${\beta}$-glucans were higher in barley than in oat. These results would be useful for the breeding of high ${\beta}$-glucan variety and also for the use barley and oat as valueadded food ingredients.

Linkage Structure Analysis of Barley and Oat $\beta$-Glucans by High Performance Anion Exchange Chromatography

  • Ryu, Je-Hoon;Yoo, Dong-Hyung;Lee, Byung-Hoo;Lee, Su-Yong;Joo, Mi-Hyun;Yoo, Sang-Ho
    • Food Science and Biotechnology
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    • 제18권1호
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    • pp.271-274
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    • 2009
  • Cereal $\beta$-glucans, linked essentially by mixed $\beta$-(1,4/1,3) glycosidic bonds, were extracted, purified, and structurally identified. Previously chemical structure of barley $\beta$-glucans was characterized from 3 varieties of 'Gang', 'Ohl', and 'Gwangan', and the (1,4)/(1,3) linkage ratio of the $\beta$-glucans was identical. In this study, $\beta$-glucans from 1 barley ('Chal') and 3 oat ('Ohl', 'Samhan', and 'Donghan') varieties were structurally scrutinized, and the linkage pattern of total 7 cereal $\beta$-glucans was compared. The amount of 2 major 3-O-$\beta$-cellobiosyl-D-glucose (DP3) and 3-O-$\beta$-cellotriosyl-D-glucose (DP4) from barley and oat accounted for only 66.6-73.3 and 68.12-81.89% of water-extractable $\beta$-glucan fractions, and the (1,4)/(1,3) linkage ratios of both barley and oat $\beta$-glucans were within very narrow range of 2.27-2.31 and 2.38-2.39, respectively, among the cultivars tested. Structural difference in the cereal $\beta$-glucans was evident when DP3:DP4 ratio in the $\beta$-glucan structure was compared. As a result, this ratio was significantly greater for barley $\beta$-glucan (2.26-2.74) than for oat (1.54-1.66). Chal-B had the greatest DP3 to DP4 ratio among the samples, which in turn reflected the least amount of (1,4)-linkages.