• 제목/요약/키워드: $\alpha$-D-galactosidase

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Pectolytic Enzymes of the Industrial Fungus Aspergillus kawachii

  • Vita, Carolina Elena;Esquivel, Juan Carlos Contreras;Voget, Claudio Enrique
    • Food Science and Biotechnology
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    • 제18권6호
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    • pp.1365-1370
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    • 2009
  • Aspergillus kawachii extracellular pectinases were screened in liquid cultures with different carbon sources. The fungus grown on citrus pectin or lemon pomace produced at least one of these inducible pectinases: acidic polygalacturonase, pectin lyase, pectin methylesterase, $\alpha$-L-arabinofuranosidase, $\alpha$-1,5-endoarabinase, $\beta$-D-galactosidase/exogalactanase, and $\beta$-1,4-endogalactanase. The lemon-pomace filtrates also contained significant $\alpha$-L-rhamnosidase and $\beta$-D-fucosidase activities. Most of the screened pectinases were active at pH 2.0-2.5, indicating that the A. kawachii enzymes were acidophilic. Under the culture conditions employed we could not detect enzymatic degradation of soybean rhamnogalacturonan. The A. kawachii pectinase-production-related regulatory phenomena of induction-repression resemble those described for other Aspergillus sp.

Effects of Dietary Carbohydrases on Growth Performance, Nutrient Digestibility and Blood Characteristics in Finishing Pigs

  • Kim, Keun Hyoung;Cho, Jin Ho;Kim, In Ho
    • Journal of Animal Science and Technology
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    • 제55권4호
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    • pp.289-293
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    • 2013
  • The objective of this study was to assess the effects of dietary carbohydrases on growth performance, nutrient digestibility and blood characteristics in finishing pigs. A total of 90 pigs [(Landrace ${\times}$ Yorkshire) ${\times}$ Duroc] (initial BW = $56.15{\pm}1.26kg$) were used for a 35 d feeding trial. The dietary treatments included: 1) CON (control diet), 2) MIX (CON + mixture with ${\alpha}$-galactosidase and ${\beta}$-mannanase 0.05%) and 3) MAN (CON + ${\beta}$-mannanase 0.05%). There were six replications per treatment with five pigs per pen. The average daily gain (ADG) in MIX was higher than in CON (p<0.05). No significant differences were noted in the average daily feed intake (ADFI) and feed efficiency (G:F) among dietary treatments (p>0.05). Apparent total tract digestibility (ATTD) of dry matter (DM) and energy (E) in MIX increased (p<0.05) relative to CON and MAN. The ATTD of nitrogen (N) in MIX was higher (p<0.05) than in CON. No differences in red blood cells (RBC), white blood cells (WBC), lymphocytes and IgG concentrations were observed among dietary treatments (p>0.05). In conclusion, the addition of the mixture of carbohydrases (${\alpha}$-galactosidase and ${\beta}$-mannanase 0.05%) increased ADG and nutrient digestibility in finishing pigs.

Lectin Activity and Chemical Characteristics of Escherichia coli, Lactobacillus spp. and Bifidobacterium spp. from Gastrointestinal Mucosa of Growing Pigs

  • Gao, W.;Meng, Q.X.
    • Asian-Australasian Journal of Animal Sciences
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    • 제17권6호
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    • pp.863-868
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    • 2004
  • Lectin activities and chemical characteristics of Escherichia coli, Lactobacillus spp. and Bifidobacterium spp. originating from the porcine cecal mucosal layer were studied based on hemagglutination assay (HA) and hemagglutination inhibition assay (HIA). Although all the bacterial strains were able to agglutinate erythrocytes of porcine or rabbit origin, much higher HA titers were consistently observed for Lactobacillus spp. than for E. coli or for Bifidobacterium spp. A remarkable reduction in HA titers occurred by the treatment of E. coli and Lactobacillus spp. with protease or trypsin and of Bifidobacterium spp. with protease, trypsin or periodate. There were no significant effects on the HA titers of the three groups of bacteria after the treatment with lipase. Hemagglutination of E. coli was strongly inhibited by D (+)-mannose and D (+)-galactose; Lactobacillus spp. by $\alpha$-L-rhamnose and methyl-$\beta$-galactopyranoside; Bifidobacterium spp. by D (+)-alactose, $\alpha$-L-rhamnose, $\alpha$-L-fucose, L (+)-arabinose, D (+)-mannose, D (-)-fructose at a relatively low concentration (1.43 to 3.75 mg/ml). These results, combined with the enhanced HA activities of the three bacterial strains by modification of rabbit erythrocytes with neuraminidase and abolished HA activity of E. coli after treatment with $\beta$-galactosidase, indicate that it might be the glycoproteinous substances surrounding the surface of the bacterial cells that are responsible for the adhesions of these microorganisms by recognizing the specific receptors on the red blood cell.

재조합 미생물 바이오센서를 이용한 chlorotoluene과 nitrotoluene 화합물의 검출 (Detection of Chlorotoluene and Nitrotoluene Compounds by Recombinant Microbial Biosensors)

  • 이다영;조재호;임운기;신혜자
    • 생명과학회지
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    • 제24권1호
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    • pp.54-60
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    • 2014
  • 방향족 화합물은 독성 환경오염물질로 생태계와 인간의 건강에 해로운 영향을 미친다. 그중 chlorotoluene과 nitrotoluene 화합물은 수생생물에 독성을 나타내며 인간의 피부, 눈, 호흡기를 자극한다. 본 연구에서는 폐수의 chlorotoluene과 nitrotoluene 화합물을 저렴하고 간단하게 검출하고자 재조합 미생물 바이오센서를 개발하였다. BTEX (benzene, toluene, ethylbenzene, xylene) 분해 조절 유전자 xylR를 Po' (upstream activating sequences를 제거한 DmpR 조절단백질 promoter Po) 또는 Pu (XylR 고유의 프로모터)::lacZ 유전자(${\beta}$-galactosidase 유전자)의 upstream에 연결한 플라스미드를 제작한 후, E. coli $DH5{\alpha}$에 형질 전환하였다. 유도 화합물 존재 하에서, 아가로스에 고정된 이 재조합 바이오센서 세포는 유도 화합물에 의해 ${\beta}$-galactosidase를 발현하고 기질인 chlorophenol red ${\beta}$-D-galactopyranoside (CPRG)를 분해하여 1~2시간에 붉은색을 나타내었다. BTEX 화합물 중, 특이적으로 o-, m-, p-chlorotoluene ($0.1{\mu}M-100 mM$) 그리고 o-, m-, p-nitrotoluene (0.1 mM-100 mM)에서 높은 반응을 나타내었으며 Po'가 Pu보다 높은 반응성을 보여주었다. 아가로스에 고정된 바이오센서는 $4^{\circ}C$에서 21일간 보존 후에도 활성의 큰 변화 없이 안정하였으며, chlorotoluene과 nitrotoluene 화합물들로 spike된 전처리 하지 않은 폐수 시료 중에서도 좋은 반응을 보여 주어 폐수 중 chlorotoluene과 nitrotoluene 화합물의 간단한 초기 검출에 활용될 수 있음을 제시하였다.

Enzymatic Synthesis and Characterization of Galactosyl Trehalose Trisaccharides

  • Kim, Bong-Gwan;Lee, Kyung-Ju;Han, Nam-Soo;Park, Kwan-Hwa;Lee, Soo-Bok
    • Food Science and Biotechnology
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    • 제16권1호
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    • pp.127-132
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    • 2007
  • [ ${\alpha},\;{\alpha}$ ]-Trehalose was efficiently modified by a transgalactosylation reaction of Escherichia coli ${\beta}-galactosidase$ using lactose as a donor to yield two galactosyl trehalose trisaccharides. The reaction products of trehalose by the enzyme were observed by thin layer chromatography (TLC) and high performance anion exchange chromatography (HPAEC) and were purified by BioGel P2 gel permeation chromatography and recycling preparative HPLC. Liquid chromatography-mass spectrometry (LC-MS) and ^{13}C$ nuclear magnetic resonance (NMR) analyses revealed that the structures of the main products were $6^2-{\beta}-D-galactosyl$ trehalose (1) and $4^2-{\beta}-D-galactosyl$ trehalose (2). A reaction of 30%(w/v) trehalose and 15%(w/v) lactose at pH 7.5 and $45^{\circ}C$ resulted in a total yield of approximately 27-30% based on the amount of trehalose used. The galactosyl trehalose products were not hydrolyzed by trehalose. In addition the mixture of transfer products (9:1 ratio of 1 to 2) showed higher thermal stability than glucose, lactose, and maltose, but less than trehalose, against heat treatment over $100^{\circ}C$ at pH 4 and 7. It also exhibited better thermal stability than sucrose at pH 4 alone.

Glyphosate 독성: III. psb A와 lac Z 유전자의 Hybrid 단백질로부터 만들어진 항체를 이용한 토마토 정단분열조직의 Thylakoid막 내 QB 단백질의 검정 (Glyphosate Toxicity: III. Detection of QB Protein in Thylakoid Membrane of Tomato Apical Meristem Using an Antibody Raised from Hybrid Protein of psb A and lac Z Gene)

  • 김태완;니콜라스 암라인
    • 한국잡초학회지
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    • 제15권3호
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    • pp.206-213
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    • 1995
  • Glyphosate를 토마토의 동화산물 공급부위에 처리하였을 때, 제초제결합 단백질인 QB 단백질을 Escherichia coli 내에서 ${\alpha}$-galactosidase가 발현되기 위해 lac Z 유전자의 3' 말단에 cloning된 시금치 psb A 유전자에 의해 발현되는 hybrid 단백질에 대한 항체를 형성시킨 후 이것을 이용하여 immunoblotting을 실시하였다. G1yphosate는 thylakoid 막의 Photosystem II내에 있는 D1 단백질의 붕괴에 영향을 주었다. LHC II 복합체내의 D1 단백질의 기능 이상은 glyphosate 의 다면발현적 효과였다.

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돼지 동결정액의 배양에 따른 체외수정능력과 Glycosidase Activity의 변화

  • 황인선;정희태;양부근;김정익;박춘근
    • 한국동물번식학회:학술대회논문집
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    • 한국동물번식학회 2003년도 학술발표대회 발표논문초록집
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    • pp.25-25
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    • 2003
  • 본 연구는 돼지 동결-융해 정자의 배양에 의한 체외수정능력과 glycosidase activity의 관계를 검토하였으며, 또한 돼지난자의 투명대내에서 발견된 당잔기에 대한 정자의 glycosidase 특이성을 확인하기 위하여 $\alpha$-L-fucosidase, $\alpha$-D-mannosidase, $\beta$-D-galactosidase 및 N-acetyl-$\beta$-D-glucosaminidase ($\beta$-GlcNAc'ase)의 activity를 분석하였다. 그 결과 glycosidase activity는 동결정자의 융해 후 배양하지 않았을 때보다 2시간 배양했을 때 더 높게 나타났다. $\beta$-GlcNAc'ase의 activity는 정자 배양 유무에 관계없이 다른 glycosidase 처리시보다 최소한 2배 이상 높게 나타났다. 또한 첨체반응이 유기된 정자의 비율은 glycosidase ($\alpha$-D-mannosidase; P<0.05)에 의해 영향을 받았으며 정자를 배양하지 않은 경우보다는 배양된 정자에서 높게 나타났다. 그러나 배양시간에 따른 정자의 생존성에 대해 glycosidase의 종류에 따른 유의차는 인정되지 않았다. 한편 투명대내 정자의 접착과 침입에 대한 또 다른 실험에서, 서로 다른 glycosidase가 첨가된 배양액내에서 수정된 정자가 배양시간이 길어짐에 따라 정자의 침입율은 낮아졌다($\beta$-GlcNAc'ase; P<0.05). 투명대내의 정자접착 정도는 glycosidase의 첨가시에 무첨가시보다 접착정도가 더 높았으며, 가장 높은 접착율은 $\beta$-GlcNAc'ase첨가시 나타났다. 또한 모든 glycosidase 처리시 2시간 배양한 정자보다는 배양하지 않은 정자에서 투명대에 대한 접착정도가 높게 나타났으며, $\alpha$-D-mannosidase의 처리시 유의적인 차이를 보였다(P<0.05). 본 연구의 결과, $\beta$-GlcNAc'ase가 주로 돼지정자의 원형질막내에 존재하는 것으로 추측되며, 배양된 정자에 의한 투명대 접착정도와 침입율이 낮았음에도 불구하고 glycosidase activity가 증가하는 것으로 나타났다

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Changes of Glycosidase Activity of Frozen-Thawed Spermatozoa in Human

  • Lee, Chae-Sik;Lee, Sang-Chan;Lee, Ji-Eun;Cheong, Hee-Tae;Yang, Boo-Keun;Park, Choon-Keun
    • Reproductive and Developmental Biology
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    • 제35권2호
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    • pp.185-190
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    • 2011
  • To evaluate the effect of spermatozoa culture on glycosidase activity of frozen-thawed spermatozoa in human, the spermatozoa were treated experimentally and assayed for activities of ${\alpha}$-L-fucosidase, ${\alpha}$-D-mannosidase, ${\beta}$-D-galactosidase and N-acetyl-${\beta}$-D-glucosaminidase (${\beta}$-GlcNAc'ase). The ${\beta}$-GlcNAc'ase activity was at least two-folds higher than other glycosidases regardless of spermatozoa incubation (p<0.05). The spermatozoa motility was decreased with incubation periods, but no effects by different glycosidases on the changes of spermatozoa motility during the various periods of incubation. In all glycosidases, the spermatozoa-zona binding rates in spermatozoa without incubation were higher than in spermatozoa incubated for 2 h (p<0.05). ${\beta}$-GlcNAc'ase is present mainly in the plasma membrane of spermatozoa frozen-thawed in human. It was also shown that the glycosidase activity was increased in all glycosidases in spite of lower sperm-zona binding by spermatozoa incubation.

인삼 Saponin이 Lysosome 효소 활성에 미치는 영향 (Effects of Ginseng Saponin on the Lysosomal Enzyme Activities in Streptozotocin-induced Diabetic Mice)

  • 문창규;김희수;김강석
    • 한국식품위생안전성학회지
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    • 제9권3호
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    • pp.105-109
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    • 1994
  • Lysosomal enzymes might play a most important role in the pathogenesis od diabetic microangiopathy. Some glycosidases, which participate in the catabolism of glycoprotein, are significantly decreased in diabetic mice. In search of new potential lysosomal enzyme inducers, we examined the effects of crude red-ginseng saponin fraction on N-acetyl-$\beta$-D-glucosaminidase, $\beta$-D-galactosidase and $\alpha$-D-mannosidase activities in the liver and kidney of normal and streptozotocin induced diabetic mice. It was found that i.p. administration of ginseng saponin produced the induction of lysosomal enzymes in the kidney more intensively than in the liver. The obtained results suggest the possibility that ginseng saponin might prevent the diabetic microangiopathy.

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돼지 동결정액의 배양에 따른 체외수정능력과 Glycosidase Activity의 변화 (Changes of Glycosidase Activity and Fertilizing Ability in Vitro by Incubation of Frozen-Thawed Spermatozoa in the Pig)

  • 황인선;정희태;양부근;김정익;박춘근
    • 한국가축번식학회지
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    • 제27권2호
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    • pp.153-161
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    • 2003
  • 본 연구는 돼지 동결-융해 정자의 배양에 의한 체외수정능력과 glycosidase activity를 평가하기 위하여 chlortetracycfine fluorescence분석법을 이용하여, glycosidase가 체외수정능력과 정자침입에 미치는 영향에 대하여 검토하였다. 또한 돼지난자의 투명대내에서 발견된 당잔기에 대한 정자의 glyco-sidase 특이성을 확인하기 위하여 $\alpha$-L-fucosidase, $\alpha$-D-mannosidase, $\beta$-D-galactosidase 및 N-acetyl-$\beta$-D-glucosaminidase ($\beta$-GlcNAc'ase)의 activity를 분석하였다. 그 결과 glycosidase activity는 동결정자의 응해 후 배양하지 않았을 때보다 2시간 배양했을 때 더 높게 나타났다. $\beta$-GlcNAc'ase의 activity 는 정자 배양 유무에 관계없이 다른 glycosidase 처리시보다 최소한 2배 이상 높게 나타났다. 또한 첨체반응이 유기된 정자의 비율은 glycosidase ($\alpha$-D-mannosidase; P<0.05)에 의해 영향을 받았으며 자를 배양하지 않은 경우보다는 배양된 정자에서 높게 나타났다. 그러나 배양시간에 따른 정자의 존성에 대해 glycosidase의 종류에 따른 유의차는 인정되지 않았다. 한편 투명대내 정자의 접착과 입에 대한 또 다른 실험에서, 서로 다른 glyco-sidase가 첨가된 배양액내에서 수정된 정자가 배양시간이 길어짐에 따라 정자의 침입율은 낮아졌다 $\beta$-GlcNAc'ase; P<0.05). 투명대내의 정자접착정도는 glycosidase의 첨가시에 무첨가시보다 접착정도가 더 높았으며, 가장 높은 접착율은 $\beta$-GlcNAc'ase 첨가시 나타났다. 또한 모든 glycosidase 처리시 2시간 배양한 정자보다는 배양하지 않은 정자에서 투명대에 대한 접착정도가 높게 나타났으며, $\alpha$-D-mannosidase의 처리시 유의적인 차이를 보였다 (P<0.05). 본 연구의 결과, $\beta$-GlcNAc'ase가 주로 돼지정자의 원형질막내에 존재하는 것으로 추측되며, 배양된 정자에 의한 투명대 접착정도와 침입율이 낮았음에도 불구하고 glycosidase activity가 증가하는 것으로 나타났다.