Development and Evaluation of an Automated Stainer for Mycobacterium Tuberculosis

The detection of tubercle bacilli (TB) from sputum smear is one of the fast and inexpensive methods for diagnosis of tuberculosis. For this method. sputum smears are usually flexed by heating and stained by acid-fast staining method, and then examined under an optical microscope. Two Procedures are commonly used fur TB staining. One is hot staining and the other is cold staining method. The Ziehl-Neelsen method which is a hot staining method is widely used in Korea because its stained color is more vivid However, the conventional automated stainer has to fix the sputum smear on a slide manually and the stain is not so vivid because it has not heating function. In an effort to save labor and minimize variations in manual staining Procedure. we developed an automated stainer with heating function. The entire staining process is fully automated. from fixation to final washing and drying. With the automated methods, five slides can be flexed and stained in 21 minutes at consistent high quality We compared the concordance rate between the two methods for 91 sputum samples to validate the stain quality of the developed automated stainer. As the results, the concordant rate between the two methods was 95% and there was no significant difference (p>0.05)

결핵균 자동염색기의 개발 및 평가

결핵을 진단하는 방법 중에서 신속하고 비교적 비용이 적게드는 방법은 객담을 통한 결핵균 도말 검사이다. 결핵균 도말 검사는 슬라이드에 도말한 환자의 객담을 가온 과정을 통해 고착시키고. acid-fast 염색방법을 통해 염색시킨 후 현미경으로 결핵균을 관찰하는 것이다. Acid-fast 염색방법은 크게 hot staining과 cold staining 방법 두 가지가 있으며, 우리나라에서는 염색 결과가 선명한 hot staining 방법인 Ziehl-Neelsen 방법을 주로 이용한다. 그러나, 기존의 결핵균 자동염색기는 가온 기능이 없어 환자의 객담을 슬라이드에 검사자가 고착을 시켜야 하고. 선명도도 낮은 문제점을 가지고 있다. 본 연구에서는 검사자의 인력 절감과 검사자 개인의 염색 능력에 따른 염색 정도의 변화를 줄이기 위해 가온이 가능한 결핵균 자동염색기를 개발하였다 개발된 염색기는 객담의 고착에서 염색 그리고 건조가지 전 과정이 자동으로 이루어진다. 염색 시간은 5개의 슬라이드를 고품질로 염색할 경우 21분이 소요되었다. 성능 평가를 위해 총 91개 객담을 대상으로 자동과 수동염색을 시행하여 일치율을 비교해 본 결과 75%로 통계적으로 유의한 차이를 보이지 않았다 (P>0.05).