Changes in Yeast and Bacterial Flora during Fermentation and Storage of Gugija-Liriope tuber Makgeolli using PCR-DGGE

In this study, we investigated the microbial flora changes in Gugija-Liriope tuber Makgeolli during fermentation and storage periods. We brewed Gugija-Liriope tuber Makgeolli for a week through twostage fermentations and stored the fermentation broth for a month at $4^{\circ}C$ or $20^{\circ}C$. We collected the samples periodically and analyzed microbial flora changes using viable cell counts and PCR-denaturing gradient gel electrophoresis (DGGE). Yeast viable cells were seen to have decreased to 13% of pre-storage levels after storage for 15 days at $20^{\circ}C$; however significant changes were not observed during storage at $4^{\circ}C$. Prolongation of storage time dramatically decreased the availability of viable cells. Yeast viable cell numbers had decreased to 38% of pre-storage levels at $4^{\circ}C$ and 4.8% at $20^{\circ}C$ after storage for 30 days. The results of the DGGE profile for yeast showed that Saccharomyces cerevisiae and Saccharomyces sp. were the predominant strains at the beginning of fermentation and throughout the whole period of storage. Viable cell counts for total bacteria had decreased to 36% of pre-storage levels after storage for 15 days but did not significantly change for the full 30 days of storage at $4^{\circ}C$. Similarly, viable cell counts for bacteria had decreased to 5% while viable cell numbers did not significantly change for the full 30 days at $20^{\circ}C$. Viable cell counts for lactic acid bacteria were performed and the results were similar to those for total bacteria. The results of the DGGE profile for bacteria showed that Weissella cibaria was the predominant strain at the beginning of fermentation. However it had disappeared by the end of fermentation, and Lactobacillus fermentum and Pediococcus acidilactici became the predominant species during storage.

PCR-DGGE를 이용한 구기자-맥문동 막걸리의 발효 과정과 저장 기간 중 효모와 세균 균총의 변화

구기자-맥문동 막걸리의 미생물 분포와 최적 저장 기간을 확립하기 위하여 먼저 구기자-맥문동 막걸리를 제조한 후 $4^{\circ}C$와 $20^{\circ}C$에 저장하면서 효모, 총 세균 그리고 젖산균의 생균 수 변화를 조사하였다. 발효가 완료되어 $4^{\circ}C$에서 15일간 저장하는 동안 효모 수는 큰 변화가 없었다. 하지만 30일간 저장한 후에는 약 62%가 감소되었다. $20^{\circ}C$에서 수행한 저장 실험에서는 15일간 저장한 후 초기 효모균수의 87%가 감소하였으며 30일간 저장한 후에는 약 95.2%가 감소되었다. 구기자-맥문동 막걸리의 DGGE 분석에 의해 S. cerevisiae와 미동정의 Saccharomyces sp.가 동정되었는데 $20^{\circ}C$에서 저장하였을 때Saccharomyces sp.가 더 빨리 사멸하였다. 저장 기간 중 총 세균 수와 젖산균의 변화 양상은 유사하였다. $4^{\circ}C$에서 저장 하였을 때 저장 15일 시점에서 총 세균 수는 약 64%가 감소하였으나 그 이후 저장 30일까지 총 세균수의 변화는 크게 없었다. $20^{\circ}C$에서 저장하였을 경우에는 초기 세균 수가 저장 15일 시점에서 총 세균수의 약 95%가 감소하였으며 그 이후 저장 30일 시점까지 총 세균수는 크게 변화하지 않았다. DGGE분석을 통해 발효 개시 시점에서는 W. cibaria가 우점균이었다가 점차 L. fermentum과 P. acidilactici가 증가하여 저장 기간 동안 이들이 우점균으로 존재 함을 확인하였다.