Isolation and Characterization of Inhibition Helicobacter pylori from Culture Media of Fomitopsis pinicola

The culture media from Fomitopsis pinicola were extracted by methanol and examined growth inhibition against Helicobacter pylori. The culture media from 8 days fermentation of F. pinicola showed maximum inhibition activity on H. pylori in 0.25 mg as MIC value. The highest activity against H. pylori by MHCS agar diffusion medium by Fp-P1 in 22.7 mm ID among 3 peaks from methanol fraction of 8 days culture media of Fomitopsis pinicola which purified by ion-exchange chromatography. The Fp-P1 from DEAE-Sephadex A-25 have been analysed by TLC as Fp-T1, Fp-T2 and Fp-T3 by ninhydrin staining. Fp-T3 (Rf value : 0.67) was higher activity against H. pylori in 14.4 mm ID. Fp-T3 was identified as single band by HPLC and TLC. It was assumed to aminosugar by BioLC analysis and TLC staining.

Fomitopsis pinicola 균사체배양액의 Helicobacter pylori에 대한 저해물질의 분리 및 특성

Helicobacter pylori에 대하여 항균효과가 가장 높은 Fomitopsis pinicola를 동정하고 저해물질의 성질에 관한 연구를 수행한 결과 다음과 같은 결론이 얻어졌다. H. pylori에 대한 항균력이 가장크게 나타난 네팔에서 채취한 F. pinicola의 동정결과는 F. pinicola AY854083로 밝혀졌다. F. pinicola의 균사체는 액상배양을 시작한 후 5일이 경과하면서 H. pylori에 대한 항균력이 나타났으며 8일 이후부터 가장 높았다. 그러나 균사체 추출물에서는 항균력이 나타나지 않았다. F. pinicola 균사체 8일 배양액의 H. pylori에 대한 최소억제 농도는 $0.25\;mg/m{\ell}$ 이었고, 배양액의 낮은 pH (pH 2.0)가 H. pylori의 생육억제에 영향을 주지만 중화를 하여도 H. pylori에 대한 항균력은 유지되었다. F. pinicola 균사체 8일 배양액을 DEAE-sephadex A-25 LC로 분리하여 Fp-P1, Fp-P2 및 Fp-P3를 얻었으며 H. pylori에 대한 항균력은 Fp-P1에서만 나타났다. Fp-P1을 thin layer chromatography로 분리하였으며 H. pylori에 대한 항균력은 $R_{f}$ 값이 0.67인 Fp-T3에서만 나타났다. F. pinicola 균사체 8일 배양액, Fp-P1, Fp-T3를 HPLC의 Waters symmetry $300\;C_{18}\;5\;{\mu}m$ column ($3.9{\times}150\;mm$)으로 분리한 결과 Fp-T3에서 단일 peak만 남았으며 이것이 H. pylori에 대한 항균력을 확인하였다. H. pylori에 대한 항균력을 나타내는 F. pinicola 균사체 배양액에서 분리 정제한 물질은 BioLC 분석과 TLC 발색결과로써 아미노기를 포함한 당으로 사료된다.