Tremendous progress has been made over the past quarter-century studying the genetics of gametogenesis and the resulting gametes and embryos. Studies merging molecular techniques and conventional cytogenetics are now beginning to bridge the gap between what we have learned about the meiotic process in males and females and what we know of the mitotic chromosomes of zygotes. Numerical abnormalities in sperm, oocytes and embryo can now diagnosed by fluorescence in situ hybridization (FISH). "At risk" couples can, therefore, have only unaffected embryos replaced in the sterus and avoid the possibility of terminating a pregnancy that might only be diagnosed as affected later gestation. Single-cell genetic analysis has also provided powerful tools for studying genetic defects arising during early human development. Recent studies of sperms, oocytes and cleavage-stage human embryos have revealed an unexpectedly high incidence. These genetic abnormalities are likely to contribute to early pregnancy loss and have important implications for improving pregnancy rates in infertile couples by assisted reproduction. The widespread use of preimplantation genetic diagnosis (PGD) awaits further documentatio of safety and accuracy. Other issues also must be addressed. First, the ethical issues regarding germ cell and embryo screening must be addressed including what diseases are serious enough to warrant the procedure. Another concern is the use of this technology for non-genetic disorders such as gender selection. Finally, the experimental nature of these procedure must continually be discussed with patients, and long-term follow-up studies must be undertaken. Development of more accurate and less expensive assays coupled with improved assisted reproductive technology success rates may make PGD a more widely use clinical tool. The future awaits these development.velopment.

흰쥐의 배아발생 동안에 CGE가 존속하는지 여부와 이러한 물질에 의한 투명대와 배아표면의 미세구조 변화를 조사한 결과는 다음과 같다. 배아표면은 미수정란과는 다르게 배아표면의 미세 융모가 단축된 특징을 보였고, 8-세포기 배아에서 뚜렷하게 볼 수 있는 구조물에 의해 덮혀있다. 투명대의 구조역시 성숙난자에 존재하는 구조와는 다른 특징을 나타났고, 특히 투명대의 섬유성 미세공 구조가 거칠고 수적인 감소가 나타났다. 위란강에 피질반응에 의한 피질과립막이 형성되어 배아발생 동안에 존속하였으나 배아발생 동안에 수정란 보다는 엷고 국소적인 분포양상을 나타내었다. 본 결과를 종합해 볼때 흰쥐 초기배아발생 동안에 피질과립막이 존속하였고, 수정시 투명대경화 뿐만 아니라 피질반응에 의해 투명대의 미세구조와 배아표면의 구조도 변화됨을 알 수 있다.

Whole body (fetus)의 경우 수정후 8일부터 10일, 15일까지 계속적으로 증가하였으며, 18일에는 약간 감소하였으나 높게 유지되는 것이 관찰되었다. 간 (liver)에서는 15일에서의 발현이 18일에서보다 높았으며, 뇌 (brain)조직에서도 역시 15일째의 발현이 약간 높았다. 그런데, 모체의 태반에서의 발현을 보면 착상 초기인 8일에 가장 높았으며, 10일, 15일까지 감소하다가 18일에는 매우 약하게 발현되었다. 즉, fetus에서는 착상후 기관형성기에는 대체로 왕성한 발현을 보이다가 기관형성이 마무리되는 시점에 발현이 감소하는 현상이 관찰되었다. 그러나, 태반조직의 경우는 8일이후 계속적으로 발현이 감소되는 것이 관찰되었다. 기관형성기의 배 (embryo)와 태반은 발생시기별 유전자 발현에서 서로 상반된 결과를 보였다.

1. LHRHa를 정상배란 시기의 30일전부터 10일 간격으로 3회 주사한 것과 20일 전부터 2회 주사한 모든 실험구에서 난소의 성숙촉진과 배란의 동시화 효과가 나타났다. 2. 은어 배란의 도시화가 유도하고 발안란의 생조율을 높이기 위한 LHRHa 주사방법은 어체중 100g 당 10 $\mu$ g을 정상배란 30일전부터 3회 혹은 20일전부터 2회 주사하는 것이 바람직하였다. 3. LHRHa 주사에 의해 배란된 알의 발안기까지의 생존율은 LHRHa 주사 농도가 높을수록 낮아지는 경향을 보였다. 4. 혈장 estradiol과 testosterone의 농도는 LHR 주사후 배란기까지 증가하는 경향을 보였다.

생물체에서 유전외적 변형의 하나인 DNA 메틸화는 cis-acting factor의 조성변화를 통하여 세포특이 유전자의 발현과 virus latency, genomic imprinting, mutagenesis등과 같은 생물학적 효과를 나타내는 것으로 알려져 있다.(reviewed by Olle Heby, 1995). 5-azaCR, 5-azaCdR 그리고 6-azaCR의 처리결과는 배아자체의 DNA 메틸화의 유지가 정상발생에 필수적임을 알 수 있으며, 메틸화에 의한 배아발생 조절기작이 존재함을 암시하고 있다. 이러한 과정에서 5-azaCR과 5-azaCdR은 서로다른 경로를 통하여 배아발생에 관여함을 보여주었다. 즉, 5-azaCdR은 주로 DNA에 incorporation되어 작용하는 것으로 여겨지며, 5-azaCR은 DNA 보다는 RNA에 incorporation되어 작용하는 것으로 나타났다. 그리고, 비록 소수의 유전자만이 조사되었지만, 5-azaCdR의 incorporation에 의한 cis-acting factor의 변화는 전사인자인 c-myc proto-oncogene과 fluid 수송에 관여하는 $Na^{+}$, $K^{+}$-ATPase 유전자의 전사를 억제하지 않았다. 반면, 5-azaCR의 RNA로의 incorporation은 전사인자인 c-myc proto-oncogene의 전사를 억제하였으며, 연이어 fluid 수송에 관련되어있는 $Na^{+}$, $K^{+}$-ATPase 유전자의 전사를 억제하였다. 이것은 아마도 RNA로 incorporation된 5-azaCR은 RNA의 post-transcriptional processing에 영향을 주어 trans-acting factor의 조성을 변화, 전사적 repression을 유발한 것으로 사료된다. 생쥐 착상전 초기배아에서 DNA 메틸화는 short-term하게는 cis-acting factor로써 전사적 수준에서 유전자발현 조절하며, 그리고 유전자발현을 통하여 long-term하게는 배아발생에 관여 할 것이라고 사료된다.

생쥐 자궁의 조직세포는 생식주기와 초기 임신시기동안 $\beta$ -galactosidase mRNA를 지속적으로 발현하며, 이로부터 합성 및 분비되는 $\beta$ -galactosidase 단백질의 발현과 활성은 자궁의 조직추출액에서는 생식주기 중 proestrus시기에, 자궁내액에서는 diestrus시기에 가장 높게 나타났고 임신 1일째부터 4일째의 기간동안에는 임신이 진행될수록 점점 더 높게 나타났다. 이러한 결과로 미루어 $\beta$ -galactosidase는 생쥐의 생식 활동 즉, 생식 주기동안의 자궁 조직세포의 분화와 임신 초기 배아의 자궁 내막에의 착상에서 중요한 역할을 하는 것으로 사료된다.

수온과 광주기를 조절한 실험구는 대조구에 비해 GSI의 peak가 2개월 늦어졌으며, 난소의 발달도 지연되었다. 암컷 혈중의 $E_{2}$와 T 농도도 성숙 단계의 지연에 따라 peak가 각기 다르게 나타났다. 그러나 수온과 광주기를 조절한 그룹의 일부개체는 성숙이 지연되지 않았으며, 수컷의 GSI나 수컷 혈중의 T 농도도 수온과 광주기의 변화에 영향을 받지 않았다.

The changes in calcium binding protein(CBP) of mouse epididymal sperm during their post-testicular differentiation were analyzed by two-dimensional SDS-PAGE. According to dpididymal maturation, capacitation and acrosome reaction of spermatozoa, both quantitative and qualitative changes of CBPs in the epididymal sperm was detected. It suggested that the development of fertilizing ability of epididymal sperm was closely related to the changes in the CBPs profiles of sperm during epidiyaml transit.

Effect of somatic cell coculture on hatching of mouse blastocyst was examined. Mid-blastocysts were cocultured with granulosa cell primary culture or Sertoli cell line ($TM_{4}$) derived from mouse testis for 48 hr. Blastocysts cultured in medium (10% FBS) started to hatch more faster than cocultured embryos during 12 hr of coculture. After then blastocysts cocultured with somatic cell hatched faster than control. Degeneration of embryos was also greately reduced by coculture. This result suggested the potentiation of hatching as well as embryonic viability by coculture with somatic cell and Sertoli cell line can be used for embryo coculture.

STZ를 주사한 후 혈액내 인슐린 및 포도당 농도는 당뇨병 유발에 의해 반비레적인 관계를 보였다. 대조군의 부정소두와 체내 정자의 농도 그리고 부정소미내 정자의 수는 당뇨병 유발에 의한 혈당량의 변화에 민감하게 감소하였다. 자발적 첨체반응율은 대조군의 부정소미와 수정관내 두부위간 유의한 차이로 증가하였다. 3일군과 14일군의 부정소미내 정자의 자발적 첨체반응율은 대조군에 비해 유의하게 증가하였다. ARIC test 결과 대조군, 3일군, 그리고 14일군에서 약 12%의 차이를 보였다. 결과저긍로 당뇨병 유발에 의해 부정소미내 정자수의 감소와 자발적 첨체반응율이 상대적으로 높아지나 ARIC test의 결과에서 부정소미내 정자는 수정능력이 있는 것으로 판단된다. 따라서 당뇨병은 정자의 수적인 감소를 유발하며 부정소내 기능의 이상을 초래하여 정자성숙을 방해하여 자발적 첨체반응을 증가시킴으로서 개체의 수정율 감소를 초래할 수 있는 것으로 사료된다.

생쥐 수정난 및 초기 2세포배를 체외배양시 0.428mM 이상의 칼슘 농도를 필요로 하는 것을 알았다. 칼슘 chelator인 EDTA를 저농도로 배양액에 처리 할 경우 2-cell block이 유의하게 극복되었으며, 저농도의 칼슘이 존재하는 배양액에서 보인 2-cell block은 니켈 50 $\mu$ M을 처리함으로서 극복 효과를 보였다. EDTA와 니켈에 의한 2-cell block 극복 현상이 어떠한 기작에 의해 이루어지는가에 대한 자세한 연구가 필요하다고 생각된다.

guanidinoacetate methyltransferase (GAMT) catalyzes the last step of creatine biosynthesis in mammals. Creatine plays an important role in cellular energy metabolism in variety of tissues including brain and male reproductive tract. Congenital deficiency of the enzyme leads to a neurologic disorder in humans. We used an interspecific backcross DNA panel to map Gamt to the central region of mouse Chromosome (Chr) 10 near the locus of hesitant mutation affecting male fertility. We assigned the human GAMT gene to Chr 19 by PCR analysis of a human/rodent somatic hybrid cell line DNA panel, and further localized the human gene to Chr 19 at band p13.3 by PCR analysis of a human radiation hybrid DNA panel. Human chr 19p13.3 is homologous to the central part of mouse Chr 10 where mouse Gamt is located. Furthermore, this part of mouse Chr 10 contains mutant loci the phenotype of which is similar to the GAMT deficiency in human.

햄스터 난자에서 관찰되는 SAC의 활동은 30mmHg 이내의 음압자극에 대하여 잘 관찰되었으며 단일통로의 크기나 open time에 따라 4종류로 구분될 수 있었다. SAC 활동은 PKA에 의하여 활성이 조절되었으며 수정 후 할구분할이 진행될수록 SAC 전도도가 작은 통로로 전환되어 발생 초기 SAC 활도양상이 특징적인 변화가 관찰되었다.

From the present study, following conclusions can be drawn: 1. lide in other species, axolotl FGF-8 is proposed to play a similar role in the early phase of limb development. However, the mechanism of its expression might be somewhat different from amniotes considering its characteristic mesenchymal expression. 2. In the regenerating axolotl limbs, Fgf-8 expression profile suggests that it is involved in wound gealing, dedifferentiation, and blastema formation. 3. Exoggenously supplied FGF-8 can accelerate blastema formation and concomitantly increase the Msx-1 expression level at the early stage of limb regeneration. Furthermore, it can partially substitute for nerve factor(s) as has been indicated by the induction of blastema formation in the denervated regenerates after FGF-8 application. 4. The unique expression feature of Fgf-8 in hte mesenechymal tissue of the regenerating axolotl limb might be casually related to its remarkable regeneration capacity of urodele.

A DNA construct containing rat T $\alpha$ 1 $\alpha$ -tuulin gene 5'-flanking sequence and GFP reporer gene was microinjected into 1-cell loach embryos. Neuron-specific FGP expression was observed in developing loach embryos and early stage fry. The results demonstrated that rat T $\alpha$ 1 $\alpha$ -tubulin gene promoter may be sufficient to specify gene expression to neurons in loach embryos. Thus, the use of GFP reporter controlled by T $\alpha$ 1 $\alpha$ -tubulin gene promoter may facilitate visualization of the dynamic processes of neural tissue development.

The effects of rearing temperature on the sex determination of zebrafish were examined to address the questions, "Is it possible to control phenotypic sex artificially; and what genes may be involved in that process\ulcorner". At higher temperature(${32-34}^{\circ}C vs 28.5^{\circ}$C), a dramatic shift of the sex ratio(female 1 : male 9) was found. with DD-PCR cloning, several candidate genes were cloned and analyzed. Further analysis should help to understand sex-determining mechanisms involved in the artificial induction.induction.

생쥐의 초기발생과정에서 배아 세포질의 제거로 nucleus/cytoplasm ratio를 증가시켰을 경우, 발생과 gene expression에는 영향을 미치지 않았으나 형태형성은 촉진되었다. 또, nucleus/cytoplasm ratio의 변화 없이 발생후기의 cytoplasm으로 일부 치환된 배아에서 발생과 gene expression, 형태형성은 모두 촉진되었다. 이상의 결과로 보아 초기배아의 gene expression과 형태형성과정에서 일어나는 time schedule의 조절은 nucleus/cytoplasm ratio가 직접적으로 영향을 미치지 않고 난자와 배아 내에 존재하는 cytoplasm factor에 의해 조절 받으며, 특히 형태 형성의 time schedule은 cytoplasmic factor와 이들에 의해 조절되는 물질의 상대적인 농도에 의해 조절될 것으로 여겨진다.

난황형성기의 난소를 가진 암컷 어미에게 갑상선 호르몬인 3,5,3'-triiodo-L-thyronine ($T_{3}$)를 20 mg $T_{3}$/kg체중으로 주사하여 출산된 조피볼락 자어를 대조구 자어와 함께 30일간 사육하면서 성장과 생존율을 비교하였고, 실험종료시인 전어체를 갈아 체성분 조성을 파악하였다. 출산자어의 성장은 대조구에 비해 $T_{3}$구에서 유의하게 빨랐으며, 생존율 역시 $T_{3}$구가 대조구보다 유의하게 높았다. 실험종료시 치어의 비만도는 대조구가 $T_{3}$구에 비해 높게 나타났다. 실험종료시 $T_{3}$구의 어체내 수분과 회분함량은 대조구의 결과와 유의한 차이를 보이지 않았으나, 단백질 함량은 $T_{3}$구에서 대조구 보다 높았으며, 지질은 $T_{3}$에서 오히려 낮았다. 이상의 결과로 조피볼락에 대한 $T_{3}$의 모체주사는 출산자어의 성장과 생존율 향상에 도움을 주는 것으로 평가되었다.

정액의 ml당 정자수는 $1.13 \pm 0.34 \times 10^{10}$이었고 spermatocrit는 $64.8 \pm 1.4$였으며, 정장의 삼투질농도는 $266 \pm 2$ mOsm/kg이었다. 총 단백질 함량과 총 지질 함량은 정장에 비해 정자에서 높은 값을 보였고, glucose는 검출되지 않았다. 황복 정자를 16일간 $0 \pm 0.5 \circ C$에서 냉장보존 하였을 때, 수정률은 0-0.7%로 보존효과가 저조한 것으로 나타났다. 황복 정자의 냉동보존을 위한 희석액으로는 marine fish Ringer's solution, 동해방지제로는 5% DMSO가 적합하였으며, 이때의 수정률은 $79.3 \pm 7.5$%였다.