Investigation of the IL-1β, TNF-α and iNOS gene differential expression in Raw 264.7 cells by the water extract of Angelicae Radix from Korea, China and Japan

참당귀, 중국당귀, 일당귀 열수 추출물의 RAW 264.7 대식세포에서 IL-1β, TNF-α, iNOS 유전자 차등 발현 연구

We tried to analyze the inflammation reactions by treatment of AG, AS and AA in murine RAW 264.7 cells. To investigate the effect of AG, AS and AA on cell viability of RAW 264.7 cells, AG, AS and AA were treated for 24 h and MTS assay was performed. Cell viabilities were increased in $1,600{\mu}g/ml$ concentration by AS, AA and AG treatments, respectively. The mRNA expression levels of $IL-1{\beta}$, $TNF-{\alpha}$ and iNOS were increased by AG and AA treatment at a concentration of $200{\mu}g/ml$ in RAW 264.7 cells without Lipopolysaccharide (LPS) treatment. The mRNA expression levels of $IL-1{\beta}$, $TNF-{\alpha}$ and iNOS were increased by AG and AA 6 h treatment at a concentration of $200{\mu}g/ml$ with LPS treatment. In this study, we observed that AG, AS and AA show various activities on inflammation reaction depend on their treatment time. In the future, studies should be conducted to investigate the effects of AG, AS and AA on the various inflammatory responses of macrophages.

Murine macrophage cell line인 RAW 264.7 대식세포에 참당귀(AG), 중국당귀(AS), 일당귀(AA)를 6시간과 24시간을 반응시킨 뒤 시간별로 나타나는 inflammation 반응을 확인하고자 하였다. LPS-induced RAW 264.7 대식세포에 AG, AS, AA를 6시간 반응 시킨 경우 $IL-1{\beta}$, $TNF-{\alpha}$, iNOS의 mRNA 발현량을 증가시켰고, AA에서 더 높은 Anti-inflammatory effect를 확인하였다. AG, AS, AA가 RAW 264.7 대식세포의 cell viability에 미치는 영향을 확인하기 위해 MTS Assay(24시간)를 수행한 결과 $1,600{\mu}g/ml$ 농도에서 모두 증가시켰다. AG, AS, AA가 LPS를 처리하지 않은 RAW 264.7 대식세포에 6시간동안 면역반응에 미치는 영향을 확인한 결과 AG와 AA를 $200{\mu}g/ml$ 농도로 처리한 RAW 264.7 대식세포에서 $IL-1{\beta}$, $TNF-{\alpha}$, iNOS의 발현이 증가되었다. 이 연구를 통해 AG, AS, AA는 RAW 264.7 대식세포에 LPS를 처리하였을 때 inflammation 반응을 촉진하며, 24시간 뒤 inflammation의 억제를 유도한 결과를 얻을 수 있었다. 향후 참당귀, 중국당귀, 일당귀 열수 추출물이 대식세포의 다양한 염증 반응 메커니즘에 미치는 작용을 확인하는 연구가 필요하다.