Inhibitory Effects of Euphorbia supina Rafin on the Production of Pro-Inflammatory Mediator by LPS-Stimulated RAW 264.7 Macrophages

LPS로 활성화된 RAW 264.7 대식세포에서 애기땅빈대(Euphorbia supina Rafin)의 염증매개물질 억제효과

This study was designed to evaluate the effect of hot water extract (ESW) and 70% ethanol extract (ESE) from Euphorbia supina Rafin on LPS-stimulated inflammatory response in RAW 264.7 macrophages. Upon investigation at concentrations up to $1000\;{\mu}g$/mL, ESW and ESE did not have any cytotoxic effects on RAW 264.7 macrophages. ESW induced inhibition of 21.6%~54.8% of nitric oxide (NO) production at 100~1000${\mu}g$/mL, and $PGE_2$ production was inhibited up to 25.7%~38.2% at 250~1000${\mu}g$/mL, proportional to the ESW concentrations. ESW induced inhibition of 66.1% and 54.3% of IL-6 production at 250 and $1000\;{\mu}g$/mL, respectively. ESE (100~1000${\mu}g$/mL) induced inhibition of 38.3%~77.5% of NO, 40%~94.7% of $PGE_2$, and 43.9%~89.4% of IL-6 production, proportional to the ESE concentrations. Only 44.1% of IL-10 production was inhibited at a concentration of $500\;{\mu}g$/mL. ESE induced an increase in TNF-${\alpha}$ production at a concentration of 100 and $250\;{\mu}g$/mL, whereas at high concentrations (500 and $1000\;{\mu}g$/mL), ESE induced inhibition of 19.2% and 92.4% of TNF-${\alpha}$ production, respectively. In conclusion, concentrations of more than $500\;{\mu}g$/mL ESE demonstrated effective immune-modulating activity through inhibition of NO, $PGE_2$, IL-6, IL-10, or TNF-${\alpha}$ production, as it relates to the macrophage's immuno-activity; therefore, ESE has potential as a good candidate substance for reduction of inflammatory responses.

본 연구는 애기땅빈대(Euphorbia supina Rafin.) 열수(ESW) 및 에탄올 추출물(ESE)의 항염증 효과를 조사하기 위하여 RAW 264.7 세포에서 LPS에 의해 생성되는 염증매개물질에 대한 억제효과를 조사하였다. ESW와 ESE은 조사된 모든 농도에서 95% 이상의 생존율을 보여 세포독성이 없는 것으로 확인되었다. ESW의 경우, NO의 생성을 100, 250, 500, $1000\;{\mu}g$/mL 농도에서 각각 21.6%, 31.9%, 44.3%, 54.8% 억제하였고, PGE2의 생성은 250, 500, $1000\;{\mu}g$/mL 농도에서 각각 25.7%, 34%, 38.2% 억제하여 농도 의존적이고 유의적인 억제효과가 확인되었다. IL-6의 생성은 250, $1000\;{\mu}g$/mL 농도에서 각각 66.1%, 54.3% 억제하였다. IL-10, TNF-${\alpha}$의 생성은 $500\;{\mu}g$/mL 농도에서 유의적인 증가를 나타냈다. ESE의 경우, NO의 생성을 100, 250, 500, $1000\;{\mu}g$/mL 농도에서 각각 38.3%, 66%, 74.7%, 77.5%, $PGE_2$의 생성은 100, 250, 500, $1000\;{\mu}g$/mL 농도에서 각각 40%, 51.8%, 92.4%, 94.7% 농도 의존적이고 유의적으로 억제하였다. IL-6의 생성은 100, 250, 500, $1000\;{\mu}g$/mL 농도에서 각각 43.9%, 48.9%, 69.7%, 89.4% 억제하였다. IL-10의 생성은 $500\;{\mu}g$/mL 농도에서 44.1% 억제하였고, TNF-${\alpha}$의 생성은 $1000\;{\mu}g$/mL 농도에서 92.4% 억제하였다. 결과를 종합해 볼때, 애기땅빈대는 ESW보다는 ESE의 경우가 LPS로 활성화된 RAW 264.7 대식세포에서의 염증매개물질 억제효과가 좋은 것으로 나타났으며, ESE는 저농도보다는 $500\;{\mu}g$/mL 이상의 고농도에서 NO, $PGE_2$, IL-6, IL-10, TNF-${\alpha}$와 같은 염증매개물질 억제효과가 좋은 것으로 확인되었다. 따라서 애기땅빈대 ESE는 $500\;{\mu}g$/mL 농도 이상에서 염증매개물질 억제 보조제로서 활용될 수 있을 것으로 사료된다.