Abstract
This study was carried out to investigate the utilization of hemolymph of silkworm, Bombyx mori, as a substitute for fetal bovine serum(FBS) in the insect cell culture. Hemolymph is collected on a small scale by clipping the abdominal leg; however, this method is not appropriate for large scale collection. The hemolymph was collected from 5 th instar larva by centrifugation after cutting of the abdominal legs was more appropriate procedure for large scale collection. The cell growth in the medium supplemented with hemolymph(Baekokjam) collected in large scale was almost same as that in the medium hemolymph supplemented with hemolymph collected in small scale. However, the mutant($wE^b$) hemolymph collected in large scale was still less effective in the cell growth, as compared to the Baekokjam hemolymph collected in large scale. The optimum centrifugation condition for large-scale bleeding was 500 rpm and 15 min.
누에체액이 동물세포 배양의 필수첨가물인 FBS를 대체할 수 있는 세포증식 효과가 있는 것으로 확인되었으나, 누에의 배발에 상처를 내어 채혈하는 방법으로는 대량 채취가 어렵다. 본 연구에서는 이러한 문제점을 해결코자 대량의 체액을 한꺼번에 얻을 수 있는 대규모 채혈법을 검토하게 되었다. 1. 누에 머리부분과 꼬리부분(배발 포함)에 상처를 낸 후 원심하여 체액을 채취하는 방법(절피원심법)이 기존의 소규모 채취한 체액과 유사한 세포증식 촉진효과를 보였다. 2. 절피원심한 체액의 원심속도에 따른 세포증식 촉진 효과는 500rpm과 1000rpm에서 양호한 값을 보였다. 3. 원심속도를 500rpm으로 고정한 경우 원심시간을 5분에서 30분까지 달리하여도 세포증식 효과는 유사하였고, 체액 회수율은 원심시간이 길어질수록 증가하였으나 일정시간 이상부터는 증가하지 않았다. 4. 절피원심법으로 대규모 채취한 체액의 액상회수율은 누에(백옥잠)생체중의 19.5%이었고, 분말회수율은 1.4% 이었으며, 분말체액에서도 세포증식 촉진 효과가 인정되었다.
