Korean Journal of Microbiology (미생물학회지)

The Microbiological Society of Korea (한국미생물학회)
권호 표지

Characteristics of Vibrio vulnificus Isolated in Incheon

인천지역에서 분리된 비브리오 패혈증균의 특성

  • 오보영 (인천보건환경연구원 질병조사과) ;
  • 김정희 (인천보건환경연구원 질병조사과) ;
  • 공용우 (인천보건환경연구원 질병조사과) ;
  • 제갈승 (인천보건환경연구원 질병조사과) ;
  • 김혜영 (인천보건환경연구원 질병조사과) ;
  • 이미연 (인천보건환경연구원 질병조사과) ;
  • 황경화 (인천보건환경연구원 질병조사과) ;
  • 고연자 (인천보건환경연구원 질병조사과) ;
  • 이제만 (인천보건환경연구원 질병조사과) ;
  • 고종명 (인천보건환경연구원 질병조사과) ;
  • 김용희 (인천보건환경연구원 질병조사과)
  • Published : 2007.12.30
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Abstract

We performed the biochemical characteristics, molecular epidemiologocal analysis, and drug susceptibility test on V. vulnificus isolated from environmental sources in Incheon. For this study, 233 strains were isolated from seawater, sediment, shellfish. V. vulnificus isolates were divided into 15 biochemical groups, which were positive for ONPG and Amygdalin test. Among the 209 strains, 206 (98.6%) strains and 110 (52.6%) strains revealed positive for vvhA and viuB gene, and the viuB gene detection rates of V. vulnificus from seawater, shellfish and sediment were 48%, 48.5% and 61.6%, respectively. From disc diffusion test on 175 isolates, most of strains were sensitive to Imipenem (100.0%), Sulfamethoxazole/trimethoprim (98.9%), Tetracycline, Ciprofloxacin (98.3%), Ampicillin/sulbactam (97.1%), Ohloramphenicol (96.6%), Cefepime (94.9%) and Ceftriaxone (94.8%), multi-drug resistance rates was 31.5% of seawater, 34.4% of sediment and 29.2% of shellfish. PFGE was performed on 233 V. vulnificus isolates with the objective of investigating the extent of genetic diversity of these isolates in our region. We could find that at least 126 different PFGE patterns were generated according by 90% of similarity and 13 clusters by 58% of similarity. The major cluster was type I (44.6%) during the most of the year, and type J was frequent pattern in June and October. There were 9 distinct PFGE types in July, 8 types in August, 7 types in June, 6 types in September, 5 types in October 3 types in May and 1 type in March.

2006년도 인천지역 해양환경에서 분리된 Vibrio vulnificus에 대한 생화학적, 분자생물학적 특성 및 항생제 감수성 결과를 알아보았다. 본 실험에 사용된 균주는 총 233주로 해수, 갯벌, 어패류, 수족관수에서 분리되었다. API 20E kit 실험 결과 15개 profile로 분류되었으며, 모든 균주가 ONPG와 Amygdalin 양성이었다. 209주를 대상으로 vvhA와 viuB 유전자 부위에 대해 PCR 실험결과 vvhA는 206주(98.6%) 양성, viuB는 110주(52.6%)가 양성이었으며, 특히 viuB 유전자부위에 대한 PCR 결과는 해수, 어패류, 갯벌에서 분리한 균주의 48%, 48.5%, 61.1%가 양성인 것으로 나타났다. 시험균주 175주에 대해 항생제 감수성 실험 결과 Imipenem (100.0%), Sulfamethoxazole/trimethoprim (98.9%), Tetracycline, Ciprofloxacin (98.3%), Ampicillin/sulbactam (97.1%), Chloramphenicol (96.6%), Cefepime (94.9%), Ceftriaxone (94.8%)이 감수성을 나타내었고, 항생제 하나 또는 그 이상의 약제에 대해 내성을 나타낸 것은 56주(32%)로 해수 28주(31.5%), 갯벌 21주(34.4%), 어패류 7주(29.2%)였다. V. vulnificus 233주에 대해 PFGE를 실시하여 dendrogram으로 분석한 결과 90%이상의 상동성 기준으로 126개의 유형으로 분리되었고, 58%이상의 상동성을 기준으로 13개의 cluster로 분류되었다. Cluster I는 104주(44.6%)로 가장 많은 균주들이 분포하였고 채취시기 대부분 I에 가장 많은 균주들이 분포하였으나 10월과 6월에 채취한 검체는 J에 16주(69.6%)와 13주(36.1%)로 가장 많은 균주들이 분포하였다. 7월에 채취한 검체에서 분리된 균주는 9개의 cluster에 속하였고 8월은 8개, 6월은 7개, 9월은 6개, 10월은 5개, 5월은 3개, 3월은 1개를 나타냈다.

Keywords

References

  1. 김석호, 정혜숙, 김준영, 이복권. 2006. PFGE Standardization and Molecular Epidemiological Study of Vibrio vulnificus. May 3-4. Daegu. Korea. 156
  2. 류필열, 최정인, 이준행. Vibrio vulnificus에 대한 quinolone계 항균제의 살균효과. 대한미생물학회지 27, 449-456
  3. 박근태, 박민정, 정초록, 송춘복, 이제희, 여인규, 전유진, 허문수. 2004. 국내 연안에서 분리한 Vibrio vulnificus의 특성. 생명과학회지 14, 986-990
  4. 박석돈. 1996. 비브리오 불니피쿠스 감염증. 고려의학, 서울
  5. 소향아. 2005. Vibrio vulnificus의 혈청형과 DNA 분자형 및 항균제 감수성에 관한 연구. 전주대학교 대학원. 박 사학위논문
  6. 양성진, 신종희, 조덕, 기승정, 신명근, 서순팔, 양동욱. 2005. Microscan과 Vitek II 시스템을 이용한 Vibrio vulnificus의 동정. 대한 진단검사의학회지 25, 33-38
  7. 질병관리본부. 2005. 감염병실험실진단
  8. 최윤미, 배직현. 1998. Pulsed-field Electrophoresis를 이용한 Salmonella typhi 염색체 유전자의 다양성 분석. 대한임상병리학회 18, 343-351
  9. 황규잠, 주영인, 이영희, 이광준, 배송미, 김기상. 2003. 2001년 국내 해양환경에서 분리된 Vibrio vulnificus의 생화학적 특성 및 항생제 감수성 패턴. J. Bacteriol. Virol. 33, 285-291
  10. Arias, C.R., L. Verdonck, J. Swings, E. Garay, and R. Aznar. 1997. Intraspecific differentiation of Vibrio vulnificus biotypes by amplified fragment length polymorphism and ribotyping. Appl. Environ. Microbiol. 63, 2600-2606
  11. Eiji, A., S. Haruo, K. Junjiro, S. Hironshi, T. Takumi, E. Kan, and D. Yoshiaki. 1997. Evaluation of the polymerase chain reaction method for identification of Vibrio vulnificus isolated from marine environments. J. Food Protection 60, 81-83 https://doi.org/10.4315/0362-028X-60.1.81
  12. Hill, W.E., S.P. Keasler, M.W. Trucksess, P. Fneg, C.A. Kaysmer, and K.A. Laampel. 1991. Polymerase chain reaction identification of Vibrio vulnificus in artificially contaminated oysters. Appl. Environ. Microbiol. 57, 707-711
  13. Lee, S.E., S.L. Kim, S.J. Kim, H.S. Kim, J.H. Shin, S.H. Choi, S.S. Chung, and J.H. Rhee. 1998. Direct identification of Vibrio vulnificus in clinical specimens by nested PCR. J. Clin. Microbiol. 36, 2887-2892
  14. Lin, M., D.A. Payne, and J.R. Schwarz. 2003. Intraspecific diversity of Vibrio vulnificus in Galveston bay water and oysters as determined by randomly amplified polymorphic DNA PCR. Appl. Environ. Microbiol. 69, 3170-3175 https://doi.org/10.1128/AEM.69.6.3170-3175.2003
  15. Mahalingam, S., Y.M. Cheong, S. Kan, R.M. Yassin, J. Vadivelu, and T. Pang. 1994. Molecular epidemiologic analysis of Vibrio cholerae O1 isolates by pulsed-field gel electrophoresis. J. Clin. Microbiol. 32, 2975-2979
  16. Matushek, M.G., M.J.M. Bonten, and M.K. Hayden 1996. Rapid preparation of bacterial DNA for pulsed-field gel electrophoresis. J. Clin. Microbiol. 34, 2589-2600
  17. Panicker, G., M.C. Vickery, and A.K. Bej. 2004. Multiplex PCR detection of clinical and environmental strains of Vibrio vulnificus in shellfish. Can. J. Microbiol. 50, 911-922 https://doi.org/10.1139/w04-085
  18. Ryang, D.W., S.W. Cho, M.G. Shin, J.H. Shin, and S.P. Suh. 1997. Molecular typing of Vibrio vulnificus isolates by random amplified polymorphic DNA(RAPD) analysis. Jpn. J. Med. Sci. Biol. 50, 113-121 https://doi.org/10.7883/yoken1952.50.113
  19. Sader, H.S., R.J. Hollis, and M.A. Pfaller. 1995. The use of molecular tekchniques in the epidemiology and control of infectious disease. Clin. Lab Med. 15, 407-431 https://doi.org/10.1016/S0272-2712(18)30338-X
  20. Tamplin, M.L., J.K. Jackson, C. Buchrieser, R.L. Murphhree, K.M. Portier, V.G. Angar, L.G. Miller, and C.W. Kaspar. 1996. Pulsed-field gel electrophoresis and ribotype profiles of clinical and environmental Vibrio vulnificus isolates. Appl. Environ. Microbiol. 62, 3572-3580
  21. Tison, D.L. and M.T. Kelly. 1986. Virulence of Vibrio vulnificus strains from marine environments. Appl. Environ. Microbiol. 51, 1004-1006
  22. Wong, H.C., S.H. Liu, T.K. Wang, C.L. Lee, C.S. Chiou, D.P. Liu, M. Nishibuchi, and B.K. Lee. 2000. Characteristics of Vibrio parahaemolyticus O3:K6 from Asia. Appl. Environ. Microbiol. 66, 3981-3986 https://doi.org/10.1128/AEM.66.9.3981-3986.2000
  23. Wong, H.-C., S.-Y. Chen, M.Y. Chen, J.D. Oliver, L.-I. Hor, and W.-C. Tasi. 2004. Pulsed-field gel electrophoresis analysis of Vibrio vulnificus strains isolated from Taiwan and the United States. Appl. Environ. Microbiol. 9, 5153-5158