DOI QR코드

DOI QR Code

낙동강 하류에 분포하는 남조류 Microcystis aeruginosa의 무균분리 및 16S rRNA 유전자 염기서열분석

Axenic Isolation and 16S rRNA Gene Sequence of the Cyanobacterium Microcystis aeruginosa in Downstream of Nakdong River

  • 박홍기 (부산광역시 상수도사업본부 수질연구소) ;
  • 정은영 (부산광역시 상수도사업본부 수질연구소) ;
  • 이유정 (부산광역시 상수도사업본부 수질연구소) ;
  • 정종문 (부산광역시 상수도사업본부 수질연구소) ;
  • 홍용기 (부경대학교 생물공학과)
  • 발행 : 2002.04.01

초록

남조류 Microcystis aeruginosa를 무균적으로 분리하기 위해 낙동강 물금지역의 수화를 멸균 증류수로 vortex 전처리를 하였으며, 세균제거 및 무균상태를 계속 유지하기 위하여 항생물질(ampicillin 150 $\mu$g/$m\ell$, neomycin 25 $\mu$g/$m\ell$)을 배지에 첨가하고, 독립 집락으로 형성시켜 오염 기회를 줄이기 위하여 0.7% agarose로 고형화시킨 CB고체배지에서 3$0^{\circ}C$, 40 $\mu$mol m$^{-2}$ s$^{-1}$ 광 조건으로 배양하였다. 그 결과 분리되어진 26개의 Microcystis aeruginosa colony 중 3개의 무균 균주만이 확보되었다. 3개의 무균균주를 16S rRNA primer를 이용하여 PCR 증폭한 결과 M. aeruginosa AF 139292와 99.5에서 100%의 상동성을 가지는 것으로 나타났다.

For axenic isolation of the cyanobacterium Microcystis aeruginosa, water bloom at the Mulgum station from the Nakdong River was pretreated by shaking with distilled water. Removal of bacteria was accomplished using antibiotics (150 $\mu$g/$m\ell$ ampicillin and 25 $\mu$g/$m\ell$ neomycin) and colonizing on CB solid medium prepared from 0.7% agarose at 3$0^{\circ}C$ under 40 $\mu$ mol m$^{-2}$ s$^{-1}$ light. Among 26 strains of the Microcystis species, only three strains were axenically established. The three strains were examined by PCR-amplified 16S rRNA gene and 16S rRNA sequencing. The similarities were 99.5 ~100% with M. aeruginosa AF 139292.

키워드

참고문헌

  1. APHA-AWWA-WPCF(18th eds) Standard methods for the examination of water and wastewater APHA
  2. Nucleic Acids Research v.25 Genbank Benson;D.J.;M.S.Boguski;D.J.Lipman;J.Ostell https://doi.org/10.1093/nar/25.1.1
  3. Methods in Enzymoogy v.167 Culturing method for cyanobacteria Castenholz R. W.
  4. Algae v.12 Taxonomic implications of the genus Microcystis(cyanophyceae)from the Naktong River Lee;J.A.;A.R.Choi;W.Masayuki
  5. Applied Environmental Microbilolgy v.57 Toxicity and toxins of natural blooms and isolated strains of Microcystis spp. (cyanobacteria)and improved procedure for purification of cultures(cyanobacteria) Makoto S.;O.Akio;S.Takaki;M.Seiichiro;S.Takuya
  6. Applied Environmental Microbiology v.55 Development of solid medium for growth and isolation of axenic Microcystis strains (cyanobacteria) Makoto;S.;M. Katsumi;O. Akio;T. Yoshichika;A. Tokujiro;N. Masauasu
  7. DNA Sequence v.4 16S ribosomal RNA gene sequence and phylogenyof toxic Microcystis sp.(Cyanobacteria) Neilan;B.A.;P.T.Cox;P.R.Hawkins;A.E.Goodman https://doi.org/10.3109/10425179409020861
  8. Japan Jouranl Limnology v.48 Seasonal changes in the biomass of four species of Microcystis in the Lake kasumigaura Takamara;N.;M.M.Watanabe https://doi.org/10.3739/rikusui.48.Special_139
  9. Applied Environmental Microbiology v.49 Effects of enviromental factors on toxicity fo a cyanobacterium(Microcystis aeruginosa) under culture conditions Watanabe;M.;S.Oishi
  10. National Institute for Environmental Studies(4th eds) NIES-collection list of strains Watanabe,M;F. Kasai
  11. Res. Rep. Natl. Inst. Environ. Stud. v.25 Growth characteristics of Microcystis Yagi;O.;M.Okada;R.Sudo;T.Hagiwara;Y.Takamura
  12. Res. Rep. Nat. Inst. Environ. Stud. v.25 Isolation of Microcystis Yagi;O.;R. Sudo
  13. Algae v.12 낙동강 수계에서 남조류 Microcystis의 분포와 개체군 변동 신재기;조경제
  14. 한국환경과학회지 v.8 낙동강 하류에서 식물플랑크톤과 수질변화와의 관계 박홍기;정종문;박재림;홍용기
  15. 한국수질보전학회지 v.8 국내 주요 댐호에 있어서의 계절별 조류종 천이 박혜경;천세억;박승익;이문호;류재근
  16. 경북대학교 박사학위논문 한국산 남조류 Microcystis spp.의 생리 · 생태적 연구 박혜경