Glutathione Reductase 유전자의 도입에 의한 오차드그래스의 형질전환

Transformation of Orchardgrass (Dactylis glomerata L.) with Glutathione Reductase Gene

환경 스트레스에 의해 야기되는 활성 산소종에 의한 피해에 내성을 가지는 목초의 개발을 위하여 오차드그래스의 배반 조직 유래의 캘러스에 배추유래의 cytosolic glutathione reductase 유전자(BcGRl)를 Agrobucterium tumefaciens EHA101을 매개로 형질전환시켰다. Hygromcin으로 선발된 캘러스로부터 재분화된 식물체는 야생형과 비교하여 형태적으로 차이를 나타내지 않았다. PCR 및 Southern blot 분석을 통하여 형질전환 식물체의 염색체 내에 BcGRl 유전자가 integration 되었음을 확인하였다. 오차드그래스의 잎으로부터 total RNA를 분리하여 Northern blot 분석을 실시한 결과, 도입된 유전자가 형짙전환 식물체 내에서 지속적으로 발현된다는 것을 확인하였다.

To develop transgenic orchardgrass resistant to reactive oxygen species produced from environmental stresses, a vector with the cytosolic glutathione reductase cDNA (BcGRl) from Chinese cabbage was constructed under the control of the cauliflower mosaic virus 35S promoter and was introduced into orchardgrass using Agrobacterium tumefaciens EHA101. Transgenic plants from hygromycin-selected calli of orchardgrass did not show any morphological difference from wild-type plants. The results of PCR amplification and genomic Southern blot analysis confirmed the integration of foreign gene into the chromosome of transgenic orchardgrass. Northern blot analysis with total RNA from leaves also confirmed the constitutive expression of BcGR1 in transgenic orchardgrass.