Abstract
Soybeans contain the phytoestrogens genistein and daidzein, their glucosides genistin and daidzin and coumesterol. These isoflavonoid compounds are capable of producing an estrogenic response in a number of diverse species. This study determined optimum conditions for the extraction of the main isoflavones(daidzin, genistin, daidzein, genistein) in defatted soybean meal using high-performance liquid chromatography. The best optimum extraction was achieved at 75% ethanol, $80^{circ}C$, pH4 and a three hour contact time. In addition, isoflavones with high purity were separated by adding up to 4%(w/v) of calcium chloride dihydrate. Most soybean extracts were composed of $beta$-glucosidic conjugate(daidzin, genistin) which is difficult to adsorb in body. Therefore, $beta$-glucosidase was used to convert as conjugate to aglycone form (daidzein, genistein) which is easy to adsorb. The optimal conditions of enzyme reaction involved to be 8.4 units of enzyme concentration, pH5.0, $40^{circ}C$ and 40 minutes.
본 연구는 항산화작용, 항암작용, estrogen 유사작용, 항골다공증작용 등 다양한 생리적 기능을 가진 isoflavones의 추출조전을 추출용매획 농도, 추출온도, pH 및 추출시간으로 나누어 단계적으로 isoflavones을 추출함에 있어 최척의 추출 조건올 찾고자 하였으며, 보다 기능이 잘 알려진 4종 isoflavones 추출에 대한 결과를 분석하여 최적추출 초건을 선정하였다. 그 결과 75% ethanol, $80^{circ}C$, pH4, 3시간의 추출 조건에서 $4,024\mu\textrm{g}/mL$의 가장 높온 총 isofla vones 추출량을 나타내었고, 대두추출물 중의 단백질 제거를 위해 이용된 염화칼융의 농도가 증가할수록 보다 높은 함량의 isotla yones윤 얻을 수 있었다. 위의 결과로 얻은 최적추출조건에서의 대두추춤물에는 거의 대부분이 체내에 홉수되지 않는 daidzin과 genistin 같은 배당체의 형태로 존재해 있음을 확인하였다. 따라서 $beta$-glucosidase라는 효소를 이용하여 이러한 배당채 들흘 daidzein이나 genistein과 같이 체내여] 홉수 가능한 aglycones 형태로 전환시키는데 있어 효소의 농도, 반응온도 및 pH, 반웅시간의 조건에서 aglycon$\xi$s 형혜익 최적 전환수 율 조건을 각각 선정하였다. 그 결과 효소농도 8.7 units, 온도 $40^{circ}C$, pHS의 초건에서 4 40 분 풍안 반응시켰을 때 90%이상 전환된 aglycones 형태를 확인할 수 있었다.
