Isolation of Mutants Overproducing Amylase from Nuruk Fungi by NTG

NTG에 의한 Amylase활성이 높은 누룩사상균의 변이주의 분리

Aspergillus coreanus NR 15-1, Asp. oryzae NR 15-3 and Asp. oryzae NR 2-5 isolated from traditional Korean nuruk were screened as parental strains producing starch hydrolyzing enzymes. They were mutagenized by N-methyl -N'-nitro-N-nitrosoguanidine (NTG) and mutants were isolated for analysis of various amylase activities and the ability of acid production. Among them, the mutants harboring high saccharogenic activity, dextrinogenic activity, and the ability of acid production were selected. Fifteen, six, and five strains of mutants were isolated from Asp. coreanus NR 15-1, Asp. oryzae NR 2-5, and Asp. oryzae NR 15-3, respectively followed by NTG mutagenesis. Among these mutants, thirteen strains were identified as auxotrophic mutants. \ulcorner (Arg.￣) mutant from Asp. coreanus NR 15-1 showed high glucoamylase activity and total acid productivity. Z6 (Ade.￣) mutant from Asp. oryzae NR 2-5 showed the highest $\alpha$-amylase activity, therefore \ulcorner and Z6 mutant were selected.

한국 전통누룩으로부터 분리.동정된 Asp. coreanus NR 15-1, Asp. oryzae NR 15-3, 그리고 Asp. oryzae NR 2-5로부터 amylase활성이 높고 세포융합에 사용될 변이주를 분리하고 그의 특성을 검토했다. Aspergillus 속 사상균을 변이처리하기 위한 변이원으로는 NTG를 사용하였으며 Asp. coreanus NR 15-1로부터 총 15종의 변이주중 8종의 영양요구변이주, Asp. oryzae NR 15-3 으로부터 총 5종중 3종의 영양요구변이주를, Asp. oryzae NR 2-5로부터 총 6종중 2종의 영양요구변이주를 분리하였다. 이들 영양요구변이주는 최소배지 에서는 생육하지 않았으며 특정 아미노산과 핵산염기 등을 배지에 첨가했을 경우에만 생육하였다. 분리된 변이주의 당화력, 액화력 및 산 생성능 등을 검토한 결과, 산 생성능이 우수한 균주인 Asp. coreanus NR 15-1로부터 glucoamylase 활성이 높은 \ulcorner(Arg.￣) 변이주와 Asp. oryzae NR 2-5로 부터 $\alpha$-amylase 활성이 우수한 영양요구변이주인 Z6(Ade.￣) 변이주를 세포융합에 사용이 가능한 변이주라 사료되었다. 앞으로 이 들의 변이주를 대상으로 세포융합을 통해 우수한 사상균주를 획득할 수 있는 기초적 자료가 됨으로서 전통누룩의 과학화에 기여할 뿔만 아니라 외국 주류와 경쟁력이 있고 과학화된 전통주류의 개발이 가능하리 라 사료된다.