Ultrastructural Changes on the Cuticular Surface, Excretory and Digestive Organs of Anisakis simplex Larvae Chronologically Recovered from Experimental Cats

실험감염 고양이로부터 경시적으로 회수한 고래회충 유충의 표피, 배설기 및 소화기의 미세구조 변화

The ultrastructural changes of cuticular surface, excretory and digestive organs of Anisakis simplex larvae chronologically recovered from experimental cats were observed with a SEM and TEM. The larva recovered from an experimental cat at 3 days post-infection (PI) retained the cuticular surface with regular transverse striations and a longitudinal groove on the lateral side of body. This finding suggests that the molting of the 3rd stage larva of A. simplex to 4th one occurred from the 3rd day after infection in cats. The excretory organ (renette cell) consisted of a large cell with numerous ductules ramified from the main duct, mitochondria and secretory granules in cytoplasm. Secretory granules in the renette cell of larvae recovered at 24 hours PI were round whereas those of control and larvae recovered at 6 hours PI were amorphous. Muscular esophagus and ventriculus also retained many secretory granules in the cytoplasm. The secretory granules in these organs of larvae recovered at $6\sim24$ hours PI were electron-dense and widely distributed whereas those of control worm were packed in a pocket and retained various electron densities. In the cytoplasm of intestinal epithelial cells, numerous fine glycogen particles and mitochondria were distributed. The chronological changes of secretory granules in renette cell, muscular esophagus and ventriculus seem to be related with the worm penetration into host tissue.

아니사키스 유충의 숙주 조직 침입 기전을 알아보기 위하여 가장 빈번하게 인체감염을 일으키는 고래회충의 제3기 유충을 고양이에 경구감염시킨 후 경시적으로 충체를 회수하여 충체의 체표면, 배설기 및 소화기의 미세구조 변화를 관찰하고자 하였다. 고등어의 내장에서 분리, 수집한 고래회충의 유충을 20마리씩 고양이에 경구 감염시킨 후 6시간, 12시간, 24시간 및 3일에 회수한 충체와 고등어로부터 분리한 대조군 충체의 체표면, 소화기 및 배설기의 미세구조를 SEM및 TEM으로 관찰하였다. 주사전자현미경 관찰에서 대조군 충체는 전단에 잘 발달된 전단치아(boring tooth)를, 후단에 꼬리침(mucron)을, 체표면에는 불연속의 주름을 가지고 있었으나 감염 후 3일에 회수한 충체에서는 전단치아와 꼬리침이 관찰되지 않았고 체표면에는 규칙적인 가로주름이 관찰 되었으며 어떤 충체에서는 꼬리침 부위에서 전단까지 측면을 따라 세로홈(longitudinal groove)이 하나 관찰되었다. 대조군 충체의 배설기관 세포질내에는 무수히 많은 분비과립, 소포체, 골지체, 사립체 및 배설관 등이 분포하였고 특히, 분비과립은 직경이 $200\sim500nm$ 크기이고 비정형적적이며 다양한 전자밀도를 나타내었다. 감염 후 6시간 및 12시간에 회수한 충체는 대조군과 비슷한 소견을 나타낸 반면 감염 후 24시간에 회수한 충체에서는 직경이 $250\sim650nm$ 크기이며 구형인 분비과립과 분지된 소관들이 많이 관찰되었다. 근육성 식도의 벽은 방사상으로 배열되어 있는 잘 발달된 근섬유로 주로 구성되어 있었고 내강 부근에 $0.5\sim1.5{\mu}m$ 크기의 분비과립이 내포되어 있는 주머니가 있었으나 실험감염군 충체의 식도세포 세포질내에는 전자밀도가 높고 다양한 크기의 비정형 분비과립이 다수 분포하였다. 위(ventriculus)세포의 세포질내에는 다수의 사립체와 소포체 및 분비과립 주머니가 분포한 반면 감염 후 24시간에 회수한 충체의 위 세포 세포질내에는 전자밀도가 높은 다양한 크기의 비정형 분비과립이 다수 분포하였다. 이상의 결과로 고래회충의 제3기 유충이 고양이 위내에서 감염 후 3일에 제4기 유충으로 탈피함을 SEM으로 관찰하였고 TEM으로 관찰된 소화기 및 배설기 미세구조의 경시적 변화 소견 중 분비과립의 변화는 충체가 숙주조직을 들고 들어갈 때 중요한 역할을 하는 조직용해효소의 분비와 관계가 있는 것으로 판단되었다.