A Study on the Separation of Racemic Amino acids in Food or Biological Sample with GLC

GLC를 이용한 식품 및 생체 시료 중 아미노산 이성질체의 분리

After establishment of methodology for the separation and quantitation of optical isomer existed in food or biomaterial, the relationship between isomer and nutrient or biological sample was investigated. The optical isomers of standard amino acids and free amino acids were quantitized and the protein was assayed from the Korean bean, pasted bean, soy sauce, gochujang, powderd milk and cataract followed by hydrolysis and dervatization with TFA-IPA for GLC analysis with chirasil val column. Amino acids showing the racemization were alanine, aspartic acid, glutamic acid and phenyl alanine. The most convenient amino acid deducing age and biological activity was aspartic acid. Glutamic acid and phenyl alanine have shown poor resolution with less racemization. The ratio of d-form amino acids was 3~6% for home made pasted bean, about 3% for commerical pasted bean, 2~4% for soy sauce, about 1% for bean, 1~2% for cataract, 1.0~1.5% for powdered milk. The racemization during fermentation process was significant.

아미노산의 광학 이성질체를 분리하는 방법을 확립하고 식품이나 생체에 있는 광학이성질체를 분리 정량하여 영양학이나 생화학적 관계를 연구한다. 필수아미노산 20종을 포함하여 총 38종의 d, l-from 아미노산을 검색 대상으로 삼았다. 단백질은 한국산 콩, 된장, 고추장, 간장, 분유 및 환자의 백내장을 시료로 하여 산 가수분해 후 esterification과 acylation으로 TFA-IPA 유도체를 만들어 chirasil val GLC column을 사용하여 분리하였다. 이성질화가 일어나는 아미노산은 alanine, aspartic acid, glutamic acid, phenyl alanine으로 식물성 시료인 된장에서는 d-alanine이 검출되었으나 동물성 시료인 백내장과 분유에서는 검출되지 않았다. 연령추정 등 생리적으로 이용이 가장 적적한 것은 분리능과 함량을 비교했을 때 aspartic acid였다. d-from 아미노산의 분율은 가정용 된장이 3~6, 시판용 된장이 약 3%, 간장이 2~4%, 콩이 약 1%, 백내장 시료에서 1~2%, 분유에서 1.0~1.5%로 검출되었으며, 숙성 발효시 광학이성질체의 변환이 현저함을 알 수 있다.