재조합 Saccharomyces cerevisiae의 Invertase 발현에 미치는 아미노산과 용존산소의 영향

Effect of Amino Acids and Dissolved Oxygen on Expression of Invertase in Recombinant Saccharomyces cerevisiae

SUC2 유전자를 가진 재조합 Saccharomyces cerevisiae의 invertase 생산성을 향상시키기 위하여 균체 생육과 유전자 발현에 미치는 아미노산과 용존산소 농도의 영향을 연구하였다. 균체 생육과 invertase 발현에 적합한 leucine과 histidine의 최적 첨가량은 탄소원인 포도당에 대한 비율로서 나타내어 0.03g/g glucose와 0.04g/g glucose였다. 회분배양에서는 통기량이 적을수록 invertase 비활성이 증가하였다. 희석율 0.09h에서 용존산소농도를 조절한 연속배양에서는 요존산소농도가 감소함에 따라 유전자 발현이 잘되어 5 포화 이하일때 invertase 비활성이 급격히 증가하여 통기를 하지 않은 조건에서 125.54KU/g cell의 최고 비활성을 얻었다.

In order to improve the productivity of invertase by recombinant Saccharomyces cerevisiae containing SUC2 gene, the effect of amino acids and dissolved oxygen concentration on the gene expression was investigated. Optimal concentrations of leucine and histidine for cell growth and cloned gene expression were 0.03 gig and 0.04 gig, respectively, expressed as the ratio of amino acid/glucose. The lack or excess of leucine and histidine has inhibitory effect on cell growth and invertase expression. In batch culture, the less aeration was, the higher invertase activity was. In continuous culture at a dilution rate of 0.09 h 1 with controlled dissolved oxygen tension, invertase activity increased dramatically at DOT levels below 5% air saturation, and a maximum activity of 215.54 KUlg cell was obtained under unaerated condition.