A New Microassay for the Determination of Serum TBA (Thiobarbituric Acid) Value Enhanced by $FeCl_{3}$ under Anaerobic Condition

무산소상태에서 $FeCl_{3}$로 촉진된 Thiobarbituric Acid 반응을 이용한 혈청중 TBA 반응물의 새로운 정량법

  • Lee, Joung-Won (Dept. of Home Economics, Chungnam National Univ.) ;
  • Mo, Su-Mi (Dept. of Food and Nutrition, Seoul National Univ.) ;
  • Lee, Tae-Young (Dept. of Chemistry Education, Seoul National Univ.)
  • 이정원 (충남대학교 이과대학 가정교육과) ;
  • 모수미 (서울대학교 가정대학 식품영양학과) ;
  • 이태녕 (서울대학교 사범대학 화학교육과)
  • Published : 1984.03.30

Abstract

A new microassay was proposed for the determination of serum thiobarbituric acid(TBA) value greatly enhanced by ferric ion under anaerobic condition. One ${\mu}mole$ of $FeCl_{3}$ per $10{\mu}l$ of serum was added to the TBA reaction mixture containing serum protein precipitate. The reaction mixture was heated on boiling water-bath for 50min under $N_{2}$ flushing. The sensitivity of this assay was greatly enhanced by 40 times comparing with that of Yagi's method (1976). In favour of the enhancement, this test could be measured by colorimetry or spectrophotometry with the sample size of $10-20{\mu}l$ serum. The sensitivity and reproducibility were also improved by means of partial dehydration of the butanol extract with $(NH_{4})_{2}SO_{4}$ salting-out. Serum TBA values of healthy human at different age groups were determined by this proposed method.

혐기적 조건밑에서 $FeCl_{3}$에 의해 촉진된 TBA 반응을 이용하여 혈청중 과산화물 측정을 위한 새로운미량 분석법을 설정하였다. 즉. 혈청단백침전물이 현탁된 TBA반응흔합액에 혈청 $10{\mu}l$$1.0{\mu}mole$$FeCl_{3}$를 첨가한 다음 질소기류밑에서 50분간 끊는 물에 중탕한다. 이 분석법의 반응 예민도는 현행 일반 TBA법보다 40여배나 증대되었으며 따라서 미량의 시료$(10{\sim}20{\mu}l)$로도 TBA반응생성물의 농도 측정이 비색법으로도 가능하였다. 그리고 TBA반응생성물의 butanol 추출액을 $(NH_{4})_{2}SO_{4}$염석으로 부분말수시킴으로써 예민성 및 재현성이 개선될 수 있었다. 이 분석법을 이용하여 측정한 건강인들의 혈청 TBA같은 높은 연령군일수록 증가하는 경향을 보였다.

Keywords