Proceedings of the Korean Vacuum Society Conference (한국진공학회:학술대회논문집)
- 2013.02a
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- Pages.599-599
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- 2013
원자간력현미경(AFM)을 활용한 SH-SY5Y Neuroblastoma 세포의 분화 전후 세포막의 Stiffness 변화 연구
- Gwon, Sang-U ;
- Yang, U-Cheol ;
- Jeon, Gwang-Deok ;
- Lee, Ji-Eun ;
- Lee, Hui-Su ;
- Jeong, Jin-Gwon ;
- Hong, Hyeon-Min ;
- Lee, Jeong-Min ;
- Choe, Pu-Reum ;
- Jang, Ju-Hui ;
- Choe, Yun-Gyeong ;
- Jeon, Song-Hui
- 권상우 (동국대학교 물리학과) ;
- 양우철 (동국대학교 물리학과) ;
- 전광덕 (동국대학교 물리학과) ;
- 이지은 (동국대학교 물리학과) ;
- 이희수 (동국대학교 물리학과) ;
- 정진권 (동국대학교 물리학과) ;
- 홍현민 (동국대학교 물리학과) ;
- 이정민 (동국대학교 물리학과) ;
- 최푸름 (동국대학교 물리학과) ;
- 장주희 (동국대학교 물리학과) ;
- 최윤경 (동국대학교 화학공학과) ;
- 전송희 (동국대학교 물리학과)
- Published : 2013.02.18
Abstract
최근의 원자간력현미경(AFM)은 생체물질을 대상으로 여러 구조적 형상뿐만 아니라 물리적 특성 측정이 가능하여 바이오분야에 다양이 활용되고 있다. 줄기세포의 신경세포로 분화 인지에 대한 연구와 관련하여 본 연구에서는 AFM의 한 기능인 Force-Distance curve 측정법을 활용하여 신경암세포주라 불리는 SH-SY5Y를 대상으로 분화 전과 후의 세포막의 stiffness 변화를 측정하였다. 세포막의 stiffness값은 시료표면과 맞닿은 AFM 탐침에 계속적으로 수직방향의 힘이 가해질 시 AFM 캔티레버의 구부러짐 정도로 측정된다. SH-SY5Y는 RA (retinoic acid) 처리에 의해 분화유도 되었으며, 생물학적 방법인 western blotting법을 통해 분화여부를 확인하였다. 측정영역은 AFM topography 이미지 상에서 roughness가 가장 낮은 분화 전과 후 SH-SY5Y의 핵 주변영역으로 선정하였다. 선정된 영역 내에 여러 부분의 분화 전후 세포막의 stiffness 값을 측정하여 통계화한 결과, 분화 전과 후 세포막의 stiffness 차이를 확인할 수 있었다. 분화 전 SH-SY5Y 세포막의 stiffness는 0.79445 N/m인 반면, 분화 후 SH-SY5Y 세포막의stiffness는 0.60324 N/m로 확인되었다. 이는 분화 전에 비하여 분화 후 SH-SY5Y 세포막의 stiffness가 약 24.07% 감소된 것으로 판단할 수 있다. 본 연구는 생물학적 복잡한 방법이 아닌 간단한 방법으로 세포의 stiffness의 변화 측정을 통한 세포의 분화를 판별할 수 있는 방법을 개발한 것으로 여러 줄기세포의 특정세포로 분화여부 판단에 활용할 수 있을 것으로 사료된다.