본 연구에서는 새로이 개발한 마늘 가공품인 황마늘의 품질 특성과 물, 30, 50, 70 및 100% 에탄올 추출물의 항산화, 미백, 항당뇨 및 항염증 활성을 검증하였다. 황마늘은 생마늘에 비해 alliin 함량은 차이가 없었으나, S-allyl cysteine(SAC)의 함량이 월등히 높아 2.6 mg/g이었다. 용매별 추출물을 제조하였을 때 alliin과 SAC 함량은 추출용매 중의 에탄올 비율이 높아질수록 더 증가하였다. 총 페놀 및 플라보노이드 화합물의 함량도 동일한 경향으로 100% 에탄올 추출물에서 가장 많이 함유된 것으로 분석되었다. DPPH 및 ABTS 라디칼 소거 활성은 100% 에탄올 추출물에서 가장 높았는데, 10 mg/mL로 농도를 동일하게 하여 추출물 간의 활성을 비교할 때 0~70% 에탄올 추출물의 경우 시료 간의 유의차가 없었으나 100% 에탄올 추출물에서는 각각 93.45%와 91.46%로 가장 높았다. 미백 및 항당뇨 효과를 확인하고자 tyrosinase 저해 활성과 ${\alpha}$-glucosidase 저해 활성을 비교한 결과 추출용매에 따른 일정한 경향은 없었으며, 100% 에탄올 추출물의 활성이 각각 36.52%와 48.55%로 유의적으로 높았다. RAW 264.7 대식세포를 대상으로 항염증 효과를 확인한 결과 황마늘 추출물은 $100{\mu}g/mL$ 처리시 LPS에 의해 유도되는 염증 인자인 NO 및 cytokine의 생성을 효과적으로 저해하였다. 황마늘 추출물은 항산화, 미백, 항당뇨 및 항염증 활성을 가지고 있으며, 물 추출물보다는 에탄올 추출물에서 더 활성이 높은 것으로 확인되었고 흑마늘 못지않은 건강기능성 소재가 될 것으로 예상된다.
Garlic can be infected by a variety of viruses, but mixed infections with leek yellow stripe virus, onion yellow dwarf virus, and allexiviruses are the most damaging, so an easy, inexpensive on-site method to simultaneously detect at least these three viruses with a certain degree of accuracy is needed to produce virus-free plants. The most common laboratory method for diagnosis is multiplex reverse transcription polymerase chain reaction (RT-PCR). However, allexiviruses are highly diverse even within the same species, making it difficult to design universal PCR primers for all garlic-growing regions in the world. To solve this problem, we developed an inexpensive on-site detection system for the three garlic viruses that uses a commercial mobile PCR device and a compact electrophoresis system with a blue light. In this system, virus-specific bands generated by electrophoresis can be identified by eye in real time because the PCR products are labeled with a fluorescent dye, FITC. Because the electrophoresis step might eventually be replaced with a lateral flow assay (LFA), we also demonstrated that a uniplex LFA can be used for virus detection; however, multiplexing and a significant cost reduction are needed before it can be used for on-site detection.
A survey of virus infection in garlic plants cultivated in Korea was conducted for three years. Most virus-infected garlic plants (Allium sativum) showed typical symptoms on the leaves such as yellow mosaic, stripes, and distortion. Through immunosorbent electron micro-scopy and RT-PCR analysis, the complex mixtures of viruses including garlic viruses of the genus Allerivirus, gaylic strain of Leek yellow stripe virus of the genus Potyvirus, and Garlic latent virus of the genus Carlavirus were identified in the virus-infected garlic plants. Among these viruses, Allexivirus was the most frequently detect-ed in the regions surveyed. Using sets of differential primers for Allexivirus genomes, two members of the genus were amplified and sequenced from the purified viruses. The deduced amino acid sequences for the coat proteins and the nucleic acid binding proteins of two viruses showed high homologies to Garlic virus A (CarV-A) and Garlic virus D (GarV-D) of Allekivirus. This is the first report of GarV-A and GarV-D in Korea. This suggests that Allexivirus in gavlic plants in Korea was mixed and varied. Phylogenetic analyses showed that the genus Allexivirus was diversi(ied by the processes of accumulation and evolution of viruses in garlic plants due to the long period of repeated vegetative propagation.
PARK KWANG-SOOK;BAE YOUNG-JOO;JUNG EUN-JEONG;KANG SOON-JA
Journal of Microbiology and Biotechnology
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제15권5호
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pp.1110-1114
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2005
Six viruses of the genera Carlavirus (Garlic mosaic virus, GarMV, and Garlic latent virus, GarLV), Allexivirus (Garlic virus X, GarV-X, and Garlic mite-borne filamentous virus, GarMbFV) and Potyvirus (Leek yellow stripe virus, LYSV, and Onion yellow dwarf virus, OYDV) from Korean garlic plants with mosaic symptoms were simultaneously detected by multiplex RT-PCR and subsequently sequenced. An immunocapture RT-PCR for the detection of GarLV, LYSV, and OYDV was also performed. The coat protein phylogenetic analysis of the garlic viruses showed that the Korean isolates were most closely related to the isolates from China, Japan, Brazil, and Argentina. This study is the first report for the differentiation of six garlic viruses in Korea by simultaneous detection using multiplex RT-PCR.
흑마늘을 새로운 기능성 식품의 재료로 사용하기 위하여 흑마늘 분말을 첨가한 옐로우 레이어 케이크를 제조하여 비중, 점도, 색도, 텍스처 및 관능검사와 같은 품질특성을 조사하였다. 반죽의 비중은 흑마늘의 첨가량에 상관없이 모든 실험구에서 유의적인 차이를 보이지 않았으며, 반죽의 점도는 31,315~41,048 cP로 흑마늘 분말첨가량이 증가할수록 증가하였다. 케이크의 pH는 7.54~6.18로 흑마늘 분말 첨가량이 증가함에 따라 유의적으로 감소하는 경향을 보였으며, 케이크의 높이 또한 6.14~5.62 cm로 흑마늘 분말 첨가량이 증가 할수록 유의적으로 감소하는 경향을 보였다. 케이크의 비용적은 5%, 10% 첨가구에서는 대조구와 차이를 보이지 않았으나 15% 첨가구에서는 감소하는 것으로 나타났다. 케이크색도를 측정한 결과 L값은 흑마늘 분말의 첨가량이 증가함에 따라 대조구에 비하여 감소하는 경향을 나타내었으며, a값은 흑마늘 분말 첨가량이 많을수록 증가하는 경향을 보였다. b값의 경우 crust에서는 흑마늘 분말의 첨가량이 증가할수록 감소하는 경향을 보였으나 crumb과 batter에서는 증가하다가 감소하는 경향을 나타내었다. 조직감을 측정한 결과 견고성, 부착성 및 응집성은 흑마늘 분말의 첨가 비율이 증가할수록 점차적으로 증가하였다. 관능검사 결과 전체적인 기호도는 5% 첨가구에서 가장 높은 것으로 나타났다.
In Japan, the P1 protein (S-type) encoded by leek yellow stripe virus (LYSV) isolates detected in Honshu and southward is shorter than the P1 (N-type) of LYSV isolates from garlic grown in Hokkaido due to a large deletion in the N-terminal half. In garlic fields in Hokkaido, two types of LYSV isolate with N- and S-type P1s are sometimes found in mixed infections. In this study, we confirmed that N- and S-type P1 sequences were present in the same plant and that they belong to different evolutionary phylogenetic groups. To investigate how LYSV with S-type P1 (LYSV-S) could have invaded LYSV with N-type P1 (LYSV-N)-infected garlic, we examined wild Allium spp. plants in Hokkaido and found that LYSV was almost undetectable. On the other hand, in Honshu, LYSV-S was detected at a high frequency in Allium spp. other than garlic, suggesting that the LYSV-S can infect a wider host range of Allium spp. compared to LYSV-N. Because P1 proteins of potyviruses have been reported to promote RNA silencing suppressor (RSS) activity of HC-Pro proteins, we analyzed whether the same was true for P1 of LYSV. In onion, contrary to expectation, the P1 protein itself had RSS activity. Moreover, the RSS activity of S-type P1 was considerably stronger than that of N-type P1, suggesting that LYSV P1 may be able to enhance its RSS activity when the deletion is in the N-terminal half and that acquiring S-type P1 may have enabled LYSV to expand its host range.
Viruses in garlic plants (Allium sativum L.) have accumulated and evolved over generations, resulting in serious consequences for the garlic trade around the world. These viral epidemics are also known to be caused by aphids and eriophyid mites (Aceria tulipae) carrying Potyviruses, Carlaviruses, and Allexiviruses. However, little is known about viral epidemics in garlic plants caused by eriophyid mites. Therefore, this study investigated the infection of garlic plants with Allexiviruses by eriophyid mites. When healthy garlic plants were cocultured with eriophyid mites, the leaves of the garlic plants developed yellow mosaic strips and became distorted. In extracts from the eriophyid mites, Allexiviruses were observed using immunosorbent electron microscopy (ISEM). From an immunoblot analysis, coat proteins against an Allexivirus garlic-virus antiserum were clearly identified in purified extracts from collected viral-infected garlic plants, eriophyid mites, and garlic plants infected by eriophyid mites. A new strain of GarV-B was isolated and named GarV-B Korea isolate 1 (GarV-B1). The ORF1 and ORF2 in GarV-B1 contained a typical viral helicase, RNA-directed RNA polymerase (RdRp), and triple gene block protein (TGBp) for viral movement between cells. The newly identified GarV-B1 was phylogenetically grouped with GarV-C and GarV-X in the Allexivirus genus. All the results in this study demonstrated that eriophyid mites are a transmitter insect species for Allexiviruses.
흑마늘을 이용한 가공식품개발을 위해 흑마늘을 첨가(0, 1, 3, 5, 7%)한 쿠키를 제조하여 품질 특성을 알아보았다. 쿠키 반죽의 pH는 흑마늘 첨가에 의해 감소하였으며, 밀도 역시 영향을 받는 것으로 나타났다. 쿠키의 퍼짐성은 흑마늘 첨가에 의해 증가하였으며, 쿠키의 색은 L(lightness), b(yellow ness)값이 감소하고, a(redness)값이 증가하는 것으로 나타났다. 쿠키의 경도는 흑마늘 첨가량이 증가할수록 수분 함량이 증가하여 물러졌으며, 쿠키의 관능검사 결과 흑마늘 첨가에 의해 모든 항목(색, 냄새, 맛, 질감, 전체적인 기호도)에 영향을 미쳤고, 흑마늘 1% 첨가군과 3% 첨가군의 선호도가 가장 좋아 흑마늘 쿠키의 개발 가능성이 있는 것으로 확인되었다.
마늘을 0, 10, 20 및 30% 첨가하여 된장을 제조한 후 6주간 숙성시키면서 1주 간격으로 된장의 품질 관련인자의 변화를 분석하였다. 명도는 마늘 농도와는 상관없이 모든 시료가 숙성기간이 길어짐에 따라 그 값이 감소하였으며, 마늘 첨가 농도가 높아질수록 더 낮았다. 황색도는 숙성 후기에 그 값이 감소하였는데, 대조군보다 마늘 첨가된장에서 더 낮았다. 제조 직후와 비교하여 숙성 1주차에 pH는 크게 감소하고 산도는 증가하였으나 그 이후로는 불규칙한 증감을 보였으며, 마늘의 첨가 농도에 따른 통계적인 유의차도 없었다. 아미노태 질소는 숙성 5주차까지 지속적으로 증가하는 경향을 나타내었는데, 숙성 5주차와 6주에는 시료군간에 유의적인 차이가 없어 마늘의 첨가가 된장의 아미노태 질소 함량에 큰 영향을 미치지 않음을 확인할 수 있었다. 환원당 역시 숙성기간이 길어짐에 따라 그 함량 역시 증가하였는데, 제조 직후에 비하여 숙성 6주 뒤에는 모든 시료군에서 약 2.5배 증가하였다. 이소플라본 함량은 숙성시간의 경과와 더불어 감소하는 경향을 보였으며 숙성 초기에는 배당체 형태의 함량이 높았으나 후기로 갈수록 그 함량은 감소하고 비배당체 형태는 증가하는 경향이었다. Bacillus는 마늘의 첨가량에 따른 차이가 없었으나 효모수는 마늘의 첨가량이 높을수록 적었다.
가열, pH, 그리고 유기산 및 몇가지 염들의 첨가가 마쇄 마늘의 저장 중 일어나는 변색에 미치는 영향에 대하여 조사하였다. 그 결과 식초산, 구연산, 젖산은 녹변을 촉진시켰으나 소금은 영향이 거의 없었다. 마쇄마늘의 pH를 4.0으로 감소시켰을 때 녹변은 현저히 감소되었지만 그 이상의 산성 pH에서는 녹변이 오히려 증가되었다. 첨가한 인산염 중 $Na_{2}HPO_{4}$와 $Na_{3}PO_{4}$는 약간의 녹변억제 효과가 있었으며, BHA나 BHT등 항산화제는 효과가 없었다. 마쇄 마늘을 $80^{\circ}C$에서 10분간 pH $3.0{\sim}5.0$ 범위에서 가열했을 때 $80^{\circ}C$에서는 a값이 (-)값 이하로 더 감소하여 녹변이 심해졌으나 $90^{\circ}C$와 $100^{\circ}C$에서 30분 이상 가열했을 때 (-)a값이 낮아져 녹변이 억제되었다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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