Yeast surface-displayed antibody libraries provide an efficient and quantitative screening resource for given antigens, but suffer from typically modest library sizes owing to low yeast transformation efficiency. Yeast mating is an attractive method for overcoming the limit of yeast transformation to construct a large, combinatorial antibody library, but the optimal conditions have not been reported. Here, we report a large synthetic human Fab (antigen binding fragment) yeast surface-displayed library generated by stepwise optimization of yeast mating conditions. We first constructed HC (heavy chain) and LC (light chain) libraries, where all of the six CDRs (complementarity-determining regions) of the variable domains were diversified mimicking the human germline antibody repertoires by degenerate codons, onto single frameworks of VH3-23 and $V{\kappa}1$-16 germline sequences, in two haploid cells of opposite mating types. Yeast mating conditions were optimized in the order of cell density, media pH, and cell growth phase, yielding a mating efficiency of ~58% between the two haploid cells carrying HC and LC libraries. We constructed two combinatorial Fab libraries with CDR-H3 of 9 or 11 residues in length with colony diversities of more than $10^9$ by one round of yeast mating between the two haploid HC and LC libraries, with modest diversity sizes of ${\sim}10^7$. The synthetic human Fab yeast-displayed libraries exhibited relative amino acid compositions in each position of the six CDRs that were very similar to those of the designed repertoires, suggesting that they are a promising source for human Fab antibody screening.
전통 재래시장 등에서 수집한 곡류 11점에서 효모 14종 26균주들을 분리 동정하였다. 이들 균주 중에서 Saccharomyces cerevisiae가 5균주로 단일 종으로는 가장 많이 분리되었고 Pseudozyma antarctica도 4균주가 분리되었으며 Cryptococcus magnus를 포함하는 Cryptococcus도 5종이 분리되었다. 또한 서리태와 차조에서 각각 4종의 비교적 많은 야생 효모들이 분리되었다.
We isolated various yeasts from wild flowers in main islands, Jejudo, Ulleungdo and Yokjido of Korea and their yeasts were identified by comparison of their PCR-amplified D1/D2 regions of 26S rDNA using the BLAST database. Thirty two yeast strains of fourteen species were isolated from wild flowers of Jejudo. Forty eight yeast strains of twenty two species were isolated and identified from wild flowers of Ulleungdo, Korea. Sixty yeast strains belonged to twenty five species were isolated identified from wild flowers of Yokjido in Tongyeong, Korea. Only Metschnikowia reukaufii was overlapped from the three different islands areas. Two species overlapped from Jejudo and Ulleungdo: Pichia guilliermondii, Metschnikowia reukaufii. Seven species were overlapped from Ulleungdo and Yokjido: Cryptococcus albidus, Cryptococcus laurentii, Metschnikowia reukafii, Pichia scolyti, Rhodotorula glutinis, Rhodotorula graminis and Rhodotorula mucilaginosa. Four species were overlapped from Jejudo and Yokjido: Candida sp. Cryptococcus aureus, Metschnikowia reukafii and Pseudozyma sp.
1976年 3月부터 1977年 2月까지 滿 12個月동안 榮山江 汽水域 39個 場所로부터 採水한 156個 water sample로서 酵母의 季節的 分布와 度包配에 따른 이들 酵母의 分布型을 調査하였다. 酵母의 全體 平均値는 100ml당 52에서 487個의 生菌數를 보여주었고 가장 많은 個體數는 春季에 있었고 가장 적은 個體數는 夏季에 있었다. 14屬 83種에 해당하는 933個의 酵母와 한 種의 酵母樣 곰팡이가 分離되었는데 基中 Candida가 29%, Debaryomyces가 17.3%, Rhodotorula가 16%, Saccharomyces가 14%이었고 나머지 다른 屬들은 10%以內이었다. Debaryomyces hansenii와 Rhodotorula glutinis가 全水域에서는 물론 年中 優點種이었고 총 好氣性細菌集團의 크기, 陸水流入量, 그리고 몇가지 지형적 기후적 요소들이 汽水환경에서 酵母의 季節的 分布는 물론 種의 組成을 反映하는 같다. 酵母의 平均數, 種의 多樣性 特히 醱酵性 및 爲菌系形成 母酵들의 數는 감度가 감소함에 따라 增加한 反面 질산염 利用酵母들은 위와 相反된 경향을 보여주었는데 이는 汽水域에서 酵母의 分布型을 認識하는데 감度勾配가 바람직한 看破 요소로서 利用될 수 ㅣ있음을 시사하고 있다.
대전광역시 하천들의 효모 종 다양성을 조사하기 위하여 먼저 대전광역시 동남부와 시내를 흐르는 대전천과 서남부의 갑천에 있는 물과 주변 토양들을 2016년 8월과 2017년 2월에 각각 148점을 동일 장소에서 채취하여 야생효모들을 분리, 동정하였다. 여름 채취 물과 주변 토양 74점에서 23종 37균주의 야생효모들이 분리된 반면에 겨울 채취 시료들에서는 약 2배 이상 많은 34종 83균주가 분리되었다. 이들 3대 하천에서 가장 많이 분리된 야생효모는 Candida속 균으로 전체 42%이었고 Cryptococcus속 균과 식품에서 주로 분리되는 Saccharomyces속 균들이 각각 7%와 6%로 많이 분리되었다. 종 수준에서는 Candida tropicalis가 25균주로 가장 많았으며 여름 시료와 겨울 시료에서 공통으로 분리된 효모들은 Aureobasidium pullulans 등 13종이었다.
In this study, an eco-friendly indigo reduction system(scale up reduction, use of buffer solution, and pH control) using baker's yeast(Saccharomyces cerevisiae) was applied for natural indigo(Polygonum tinctorium) dyeing of Hanji fabric and Hanji-mixture fabric(Hanji/Cotton, Hanji/Silk). The effect of concentration of baker's yeast, repeat dyeing, and bath reuse was investigated in terms of dye uptake indicating reduction power. And the oxidation-reduction potential(ORP) was monitored. We also evaluated color properties and colorfastness according to the color strength. The yeast concentration did not significantly affect the maximum reduction power. However, the highest yeast concentration was effective in improving the initial dye uptake, and its the reduction retention power was the most excellent. Even on the last reduction day, the effect of increasing the dye uptake by repeat dyeing was observed. And it was confirmed that the reduction bath could be reused for up to 30 days by supplementing yeast at the end of reduction. For all the fabrics used, deeper and darker PB color were obtained by repeat dyeing. As dyeing was repeated, purplish tint got stronger on the Hanji/Silk fabric compared to other fabrics. Regardless of the composition of Hanji fabrics and color strength, washing and dry cleaning fastness were relatively good with above rating 4-5, and fastness to rubbing and light were acceptable with a rating 3-4 ~ 4-5. The eco-friendly natural indigo dyeing process using niram and baker's yeast would offer global marketability and diversity of Hanji product as a sustainable high value-added material.
In 2019, as a subset study to discover indigenous yeast species in Korea, a total of 20 yeast species were isolated from soil samples collected in Pochoen-si. Among them, eight strains were unreported species. From the high 26S rRNA gene sequence similarity and formation of a robust phylogenetic clade with the closest species, it was determined that each strain belonged to independent and predefined yeast species. The 20 strains were assigned to the genera Aureobasidium (1 strain) and Meyerozyma (1 strain) of the phylum Ascomycota and Cystofilobasidium (2 strains), Filobasidium (1 strain), Naganishia (2 strains), Bullera (3 strains), Leucosporidium (9 strains) and Sampaiozyma (1 strain) of the phylum Basidiomycota. There is no official report of the following species in Korea: Leucosporidium creatinivorum (4 strains), Leucosporidium escuderoi(2 strains), Leucosporidium golubevii(1 strain) and Leucosporidium intermedium (2 strains). Basic biochemical characteristics, colony and cell morphology are also described in the species description section.
Cheese is an excellent substrate for yeast and mold growth. These organisms can cause cheese spoilage, resulting in significant food wastage and economic losses. In the context of cheese spoilage, the presence and effects of spoilage or pathogenic bacteria are well documented. In contrast, although yeasts and molds are responsible for much dairy food wastage, only a few studies have examined the diversity of spoilage fungi. This article reviews the spoilage yeasts and molds affecting cheeses in various countries. The diversity and number of fungi present were found to depend on the type of cheese. Important fungi growing on cheese include Candida spp., Galactomyces spp., Debaryomyces spp., Yarrowia spp., Penicillium spp., Aspergillus spp., Cladosporium spp., Geotrichum spp., Mucor spp., and Trichoderma spp.. In addition, several mold spoilage species, such as Aspergillus spp. and Penicillium spp., are able to produce mycotoxins, which may also be toxic to humans. There are many ways to eliminate or reduce toxin levels in foods and feeds. However, the best way to avoid mycotoxins in cheese is to prevent mold contamination since there are limitations to mold degradation or detoxifications in cheese. Chemical preservatives, natural products, and modified atmosphere packaging have been used to prevent or delay mold spoilage and improve product shelf life and food safety.
Park, Heui-Dong;Kim, Seung-Hwan;Shin, Jae-Ho;Rhee, In-Koo
Journal of Microbiology and Biotechnology
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제9권6호
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pp.744-750
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1999
Forty alcohol yeast strains were isolated from the main mashes (10 strains from each mash) for brewing of 4 different kinds of Korean traditional liquor (3 different types of Yakju and 1 Takju). Thirty-eight out of 40 strains were identified to be the same strain, Saccharomyces boulardii, by the Automated Bacteria, Yeast, and Fungi Identification System (Biolog Co., U.S.A.) based on the metabolic fingerprints. One strain that showed the highest ethanol production among the 38 strains in YPD medium, designated SHY 111, was selected and used for differentiating from other yeast type strains using the polymerase chain reaction (PCR). Amplified DNA, from transcribed internal spacers of SHY 111 chromosomal DNA, was found to be the same in both size and sequence as those of S. cerevisiae KCCM 11215 (formerly S. coreanus) and S. boulardii along with that of S. cerevisiae AB 972, which was used as a type strain for the yeast genome project. However, when PCR was carried out with the intron splice site primer, it resulted in the amplification of the SHY 111-specific DNA fragment which was about 200 bp in size. When PCR was carried out using the primer to test diversity of 40 isolated yeast strains, it was found that the PCR patterns were similar to each other except for the 200 bp bands derived from all the 10 strains from one Yakju, and 2 strains from another Yakju. These results suggest the strain identified as S. boulardii by the Automated Identification System to be a dominant strain for the fermentation of Korean traditional liquors.
Biodiversity af yeasts in various natural environments including soils, swamps and plants was investigated. By molecular identification methods based on the partial sequences of 265 rDNA, 69 isolates were assigned to 44 taxa including 27 known species. The remaining 17 taxa could potentially form new species. All of them were classified into Ascomycota, Hymenomycetes, Urediniomycetes and Ustilaginomycetes. Ascomycetous and ustilaginomycetous yeasts were generally isolated from flower samples, and hymenomycetous and urediniomycetous yeasts were generally isolated from soil samples. Distribution of yeast groups exhibited geographical variation. Yeast biodiversity of root sail also varied according to the associated plant species.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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